| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
histone acetyltransferase (HAT); CBP/p300; TIP60
MG149 targets Tip60 (IC50 = 0.5 μM) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
MG 149（Tip60 HAT 抑制剂）在 200 μM 时可抑制大约 90% 的 Tip60 活性，但对 p300 和 PCAF 没有抑制作用。 MG 149 本质上与 Ac-CoA 竞争，但不与组蛋白底物竞争。 MG 149 的 HAT 抑制实验表明，两种药物均强烈抑制不同位置核提取物中的 HAT 活性 (p < 0.05) [1]。
MG149 对Tip60的乙酰转移酶活性具有选择性抑制作用，在体外酶学实验中可浓度依赖性地抑制Tip60介导的组蛋白乙酰化。它对p300、CBP等其他组蛋白乙酰转移酶无明显抑制效果。在多种肿瘤细胞系中，MG149 处理后可抑制细胞增殖，诱导细胞周期停滞于G1期，并促进细胞凋亡。Western blot检测结果显示，MG149 处理后乙酰化组蛋白H4的水平降低，p21和p27的表达上调，Cyclin D1的表达下调 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
MYST1抑制剂MG149的给药缓解了小鼠的AKI[2]。
MG149抑制MYST1可减轻小鼠急性肾损伤[2] 最后，我们试图解决系统性抑制小鼠Myst1活性是否会在AKI模型中产生有益作用的问题。为此，在诱导AKI之前，C57/BL6小鼠被腹膜注射MG149。MG149给药显著缓解了IR诱导的AKI，这可以从血浆BUN（图7A）和肌酐（图7B）水平的降低中得到证明。肾切片的H&E染色为MG149的保护作用提供了额外的支持，表明接受MG149的小鼠表现出更少的铸型和更少的广泛肾小管坏死（图7C）。DHE染色证实，MG149注射液抑制了ROS的产生（图7D），同时抑制了肾脏中Nox基因的表达水平（图7E，F）。我们再次在LPS诱导的AKI模型中测试了MG149给药的效果。与IR模型相似，注射MG149可显著减轻LPS相关的肾损伤，如血浆BUN（图S4A）和肌酐（图S4B）水平、ROS染色（图S4C）和Nox表达定量（图S4D、S4E）所示。综上所述，MG149对MYST1的抑制可能在体内保护急性肾损伤。 |
| 酶活实验 |
生化抑制试验[1]
在30°C下，在30µL的反应体积内进行放射性同位素标记的乙酰转移酶测定。反应缓冲液含有pH 8.0的50 mM HEPES、0.1 mM EDTA、50µg/mL BSA、1 mM二硫苏糖醇、0.1%Triton-X100和2%DMSO。14C标记的Ac-CoA用作乙酰供体。含有组蛋白H4的N端20个氨基酸序列的肽（即H4-20）用作p300和Tip60的底物，含有组蛋白H3的N端30个氨基酸序列（即H3-20）的肽用作PCAF的底物。在30°C下平衡其他组分（Ac-CoA、肽底物和抑制剂）5分钟后，用HAT酶启动HAT反应。速率测量基于初始条件（通常低于限制底物消耗的15%）。反应后，将混合物装载到Waterman P81滤纸上，然后用50mM碳酸氢钠（pH 9.0）洗涤三次。将纸风干，通过液体闪烁计数定量掺入肽底物的放射性量。在所有情况下，从总信号中减去背景乙酰化（在没有酶的情况下）。IC50被确定为抑制一半酶活性的抑制剂的浓度。对于IC50测定，测试了至少七种抑制剂浓度的范围，这些浓度在IC50附近变化至少20倍。所有检测都至少进行了两次，重复的检测结果通常在20%以内。IC50测量的条件为：；对于Tip60测定，反应含有10 nM Tip60、1µM Ac-CoA、100µM H4-20，反应时间为7分钟；对于PCAF测定，反应包含1 nM PCAF、1µM Ac-CoA和100µM H3-20，反应速度为3.5分钟；对于p300测定，反应含5 nM p300、1µM-Ac-CoA，100µM H4-20，反应时间为5分钟；对于MOF测定，反应涉及1 nM MOF、1µM-Ac-CoA或100µM H8-20，反应距离为5分钟。抑制剂筛选条件如图1的图例所示。 采用放射性标记法检测Tip60的乙酰转移酶活性。反应体系包含重组Tip60蛋白、组蛋白底物、乙酰辅酶A（含放射性标记）以及不同浓度的MG149。反应在适宜温度下孵育一定时间后，通过过滤结合法分离结合的放射性底物，测定放射性强度以评估酶活性。计算不同浓度下的酶抑制率，进而确定IC50值 [1] |
| 细胞实验 |
使用Dignam等人描述的程序从HeLa细胞或不同脑区的组织样本中制备核提取物。使用ELISA测定法测定核提取物中的HAT活性，其中使用steptavidin-biotin连接固定生物素化的组蛋白H3肽（aa 1至21，Anaspec–61702）或组蛋白H4肽（aa 2-24， 12-372）。如前所述进行ELISA。酶反应缓冲液含有0.01%Triton X-100、0.1 mM EDTA、50µg/mL BSA、1mM DTT和50 mM HEPES pH 7.4。核提取物根据蛋白质浓度进行标准化。酶反应中HeLa核提取物的最终蛋白质浓度为2.5µg/mL。对于脑组织样本的核提取物，浓度为40µg/mL。酶反应的反应时间为15分钟[1]。
对多种肿瘤细胞系进行细胞活力实验，将细胞接种于96孔板，培养过夜后加入不同浓度的MG149，继续培养48小时。采用MTT法检测细胞活力，计算细胞增殖抑制率。对于细胞周期和凋亡分析，细胞经MG149 处理后收集，用PI染色后通过流式细胞仪检测细胞周期分布；用Annexin V-FITC/PI双染色法通过流式细胞仪检测凋亡率。Western blot实验中，细胞处理后提取总蛋白，经SDS-PAGE电泳、转膜、封闭后，加入特异性一抗（抗乙酰化H4、p21、p27、Cyclin D1等）孵育，再加入二抗孵育，最后通过化学发光法显影检测蛋白表达水平 [1] |
| 动物实验 |
通过将Mrtfaf/f品系（外显子9-14被floxed）与Lyz2-Cre品系杂交，培育出髓系特异性MRTF-A小鼠。本研究中使用的所有品系均为C57/BL6背景。对于缺血再灌注模型，将6-8周龄雄性小鼠用氯胺酮麻醉。使用无创微动脉瘤夹夹闭肾蒂。45分钟后移除夹子。整个过程中将体温控制在37℃。48小时后处死小鼠。对于败血症模型，将6-8周龄雄性小鼠腹腔注射LPS（25 mg/kg），24小时后处死。使用市售试剂盒，按照制造商的建议检测血浆肌酐水平、尿素氮水平和蛋白尿。在某些实验中，在诱导急性肾损伤（AKI）前两周，每隔一天腹腔注射一次CCG-1423或MG149。CCG-1423和MG149的剂量均为1 mg/kg。染色和定量分析采用双盲法，并遵循先前发表的方案[2]。
|
| 参考文献 |
[1]. 6-alkylsalicylates are selective Tip60 inhibitors and target the acetyl-CoA binding site. Eur J Med Chem. 2012 Jan;47(1):337-44.
[2]. Myocardin-related transcription factor A (MRTF-A) contributes to acute kidney injury by regulating macrophage ROS production. Biochim Biophys Acta Mol Basis Dis. 2018 Oct;1864(10):3109-3121 |
| 其他信息 |
组蛋白乙酰转移酶（HAT）是重要的酶，调控多种细胞功能，例如DNA转录的表观遗传调控。开发具有高选择性和高活性的HAT抑制剂将为阐明HAT的生物学功能提供强有力的机制研究工具，并可能具有开发潜在新疗法的药理学价值。本研究合成了已知HAT抑制剂腰果酸的类似物，并评估了其对HAT活性的抑制作用。生化分析表明，与PCAF和p300相比，新型腰果酸类似物能够选择性地抑制人重组酶Tip60。酶动力学研究表明，其中一种新型腰果酸衍生物20对Tip60的抑制作用主要与乙酰辅酶A（Ac-CoA）竞争性抑制，而与组蛋白底物非竞争性抑制。此外，这些组蛋白乙酰转移酶（HAT）抑制剂在微摩尔浓度下能有效抑制核提取物对组蛋白H3和H4的乙酰转移酶活性。[1]
多种致病因素可诱发急性肾损伤（AKI），导致肾功能衰竭。本研究评估了心肌相关转录因子A（MRTF-A）在AKI发病机制中的作用。我们发现，在缺血再灌注或脂多糖（LPS）注射诱导的小鼠模型中，系统性敲除MRTF-A或使用CCG-1423抑制MRTF-A活性可显著减轻AKI。值得注意的是，MRTF-A缺乏或抑制导致AKI模型中肾脏活性氧（ROS）生成减少，并伴有NADPH氧化酶1（NOX1）和NOX4表达下调。在培养的巨噬细胞中，MRTF-A可促进缺氧复氧或LPS处理后NOX1的转录。有趣的是，巨噬细胞特异性MRTF-A缺失可改善小鼠的急性肾损伤（AKI）。机制分析表明，MRTF-A通过与乙酰转移酶MYST1相互作用，在调控NOX基因启动子周围的组蛋白H4K16乙酰化中发挥作用。MYST1缺失抑制了巨噬细胞中NOX的转录。最后，给予MYST1抑制剂MG149可缓解小鼠的AKI。因此，我们的数据揭示了一条控制巨噬细胞中活性氧（ROS）产生的新型表观遗传通路，该通路与AKI的发生有关。靶向MRTF-A-MYST1-NOX轴可能为对抗AKI提供新的治疗策略。[2] MG149是一种合成的6-烷基水杨酸酯衍生物。作为一种选择性Tip60抑制剂，它靶向Tip60的乙酰辅酶A结合位点，为肿瘤治疗提供了一个潜在的药物靶点和治疗策略。[1] |
| 分子式 |
C22H28O3
|
|
|---|---|---|
| 分子量 |
340.46
|
|
| 精确质量 |
340.204
|
|
| 元素分析 |
C, 77.61; H, 8.29; O, 14.10
|
|
| CAS号 |
1243583-85-8
|
|
| 相关CAS号 |
1243583-85-8;
|
|
| PubChem CID |
49864204
|
|
| 外观&性状 |
Typically exists as White to off-white solids at room temperature
|
|
| LogP |
5.388
|
|
| tPSA |
57.53
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
10
|
|
| 重原子数目 |
25
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
374
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
|
| SMILES |
O([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C(=C1C(=O)O[H])C([H])([H])C([H])([H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H]
|
|
| InChi Key |
WBHQYBZRTAEHRR-UHFFFAOYSA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C22H28O3/c1-2-3-4-5-6-8-17-11-13-18(14-12-17)15-16-19-9-7-10-20(23)21(19)22(24)25/h7,9-14,23H,2-6,8,15-16H2,1H3,(H,24,25)
|
|
| 化学名 |
2-[2-(4-heptylphenyl)ethyl]-6-hydroxybenzoic acid
|
|
| 别名 |
|
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
|
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.75 mg/mL (8.08 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 27.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.75 mg/mL (8.08 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 27.5 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9372 mL | 14.6860 mL | 29.3720 mL | |
| 5 mM | 0.5874 mL | 2.9372 mL | 5.8744 mL | |
| 10 mM | 0.2937 mL | 1.4686 mL | 2.9372 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
KAT6-IN-4
WIZ degrader 8 TFA
NP1192
ARHB
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
