| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MRE11-RAD50-NBS1 (MRN) complex (IC50 = 2 μM for human recombinant MRE11 nuclease activity; selectively inhibits MRE11’s 3’-5’ exonuclease and endonuclease activity; no significant inhibition of other nucleases (e.g., EXO1, DNA-PK) at concentrations up to 50 μM) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
Mirin 抑制 ATM 对 Nbs1 和 Chk2 下游靶标的磷酸化、DSB 诱导的 ATM 激活以及响应 DSB 而导致 ATM Ser1981 处的 MRN 依赖性自磷酸化。此外，味醂可防止 HEK293 细胞中的同源依赖性 DNA 修复和 TOSA4 细胞中的 G2 检查点。[1]
在已整合 HPV16 (SiHa) 的细胞中，味醂使 HPV 附加体对 PA25 更加敏感，从而将 PA25 IC50 降低[2] 此外，在用顺铂处理的人胚肾 293 细胞中，用味醂进行预处理会降低细胞的活力并阻止增殖细胞中核抗原的表达。 [3] Mirin（1-50 μM）剂量依赖性抑制重组人MRE11核酸酶活性，10 μM浓度下抑制率达80%；阻断MRN复合物介导的DNA双链断裂（DSB）切除，阻止同源重组（HR）修复 [1] - Mirin（5-20 μM）增强癌细胞系对电离辐射（IR）和DNA损伤药物的敏感性：HeLa细胞中，10 μM Mirin使IR诱导的HR修复效率降低65%，凋亡率从18%升至42% [1] - Mirin（10 μM）抑制HR功能正常的癌细胞（U2OS骨肉瘤、MCF-7乳腺癌）增殖，72小时后GI50值分别为15 μM和18 μM；对HR缺陷细胞（CHO-K1 XRCC3-/-）无明显作用 [2] - Mirin（20 μM）使A549细胞中γ-H2AX灶点（DSB标志物）增加3.8倍，证实因DSB修复受损导致DNA损伤累积 [4] - Mirin（15 μM）在U2OS细胞接受IR照射（2 Gy）后，使RAD51灶点形成（HR修复标志物）减少70%，阻断HR通路激活 [2] - Mirin（5-30 μM）抑制脂多糖（LPS）诱导的RAW 264.7巨噬细胞一氧化氮（NO）生成40-65%，20 μM时下调iNOS mRNA表达55% [3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
荷U2OS骨肉瘤异种移植瘤的裸鼠（BALB/c-nu）接受Mirin（50 mg/kg，腹腔注射，每3天1次，连续3周）联合IR（2 Gy，肿瘤局部照射，第1、8、15天）治疗。联合组肿瘤生长抑制率达75%，显著高于IR单药组（40%）和Mirin单药组（25%）[2]
- Mirin（50 mg/kg，腹腔注射，每3天1次×3）使U2OS异种移植瘤中γ-H2AX表达增加2.5倍，RAD51水平降低60%，证实体内DSB修复抑制 [2] - LPS诱导的炎症小鼠模型中，Mirin（30 mg/kg，腹腔注射，每日1次×5）使血清NO水平降低45%，肝脏iNOS蛋白表达降低50% [3] |
| 酶活实验 |
在 25 mM MOPS (pH 7.0)、60 mM KCl、0.2% Tween 20、2 mM DTT、1 mM 或 5 MnCl2（或 5 mM MgCl2）中，或10 μl 体积中的 5 mM CaCl2）、0.1 pmol DNA 底物和 0.3 pmol Mre11（或等量的与 Rad50 复合的 Mre11）是与寡核苷酸非发夹底物反应的内容物。然后将反应在 37°C 下孵育 30 分钟。之后，分别以终浓度0.1 mg/ml、5 mM和0.2%添加蛋白酶K、SDS和EDTA，并将混合物再孵育15分钟。含有 10% 丙烯酰胺和 7 M 尿素的测序凝胶上样有 4 μl 每个反应物以及 4 μl 甲酰胺上样缓冲液。运行后使用磷光成像装置检查每个凝胶。有和没有发夹底物的反应之间的唯一区别是，按照指示将 3 pmol Mre11 添加到反应中，并且反应在室温下放置过夜。非同源末端连接反应中包含 25 mM MOPS (pH 7.0)、60 mM KCl 和 0.2% Tween。 0.2 mM DTT、0.5 mM ATP、4 ng 质粒 DNA、10% 聚乙二醇、0.01 pmol 人 DNA 连接酶 I、0.06 pmol Mre11 和 0.1 单位大肠杆菌核酸外切酶 III (GIBCO-BRL)，体积为10 μl 全部包含在混合物中。在 37°C 孵育 25 分钟后，添加终浓度为 0.5% 的 Tween 20，并使用引物 DAR5 和 DAR147 通过 PCR 扩增 2.5 微升等分试样。 TA克隆试剂盒用于克隆PCR产物，自动ABI毛细管遗传分析仪用于对结果进行测序。
MRE11核酸酶活性实验：重组人MRE11（100 nM）与5’-FAM标记的双链DNA底物（50 nM）在反应缓冲液（pH 7.5）中37°C孵育。加入系列浓度Mirin（0.1-50 μM），孵育60分钟。聚丙烯酰胺凝胶电泳分离反应产物，量化切割DNA的荧光强度计算IC50值 [1] - 核酸酶选择性实验：重组EXO1、DNA-PK和TREX2在优化条件下与各自DNA底物及Mirin（0.1-50 μM）孵育。凝胶电泳或荧光法检测核酸酶活性，证实对MRE11的选择性 [1] - iNOS活性实验：RAW 264.7巨噬细胞裂解液与L-精氨酸（1 mM）及Mirin（0.1-30 μM）在37°C孵育30分钟。比色法试剂盒定量NO生成量，评估iNOS抑制效果 [3] |
| 细胞实验 |
在 37 °C、5% CO2 的湿润空气中，将人胚肾 (HEK) 293 细胞培养在补充有 5% 热灭活胎牛血清、青霉素（100 U/ mL) 和链霉素 (100 mg/mL)。每 48 小时，向细胞中添加新的培养基。在 96 孔板中，用常规生长培养基接种细胞。在接受顺铂 (20 μM) 处理并孵育八小时和二十四小时之前，细胞用味醂 (100 μM) 预处理一小时。按照制造商的说明，使用 EZ-Cytox 细胞活力测定试剂盒进行 MTT 测定，并使用酶标仪在 450 nm 波长下测量 MTT 减少。
HR修复效率实验：稳定表达DR-GFP报告基因的U2OS细胞用Mirin（5-20 μM）预处理24小时，再转染I-SceI表达质粒诱导位点特异性DSB。流式细胞术计数GFP阳性细胞（HR修复阳性），计算修复效率 [2] - 细胞增殖与放射增敏实验：U2OS、MCF-7和CHO-K1 XRCC3-/-细胞在添加胎牛血清的DMEM培养基中培养，用Mirin（0.1-50 μM）单药或联合IR（2 Gy）处理72小时。MTT法检测细胞活力；从剂量-反应曲线推导GI50值 [2] - DNA损伤与HR标志物实验：A549或U2OS细胞用Mirin（10-20 μM）±IR（2 Gy）处理24小时，固定后用抗γ-H2AX或抗RAD51抗体及DAPI免疫染色，荧光显微镜量化每个细胞的灶点数量 [4] - 炎症反应实验：RAW 264.7巨噬细胞用Mirin（5-30 μM）预处理1小时，再用LPS（1 μg/mL）刺激24小时。检测培养上清液NO水平；提取总RNA，RT-PCR定量iNOS mRNA [3] |
| 动物实验 |
肿瘤异种移植和放射增敏模型：将6-8周龄的BALB/c-nu裸鼠皮下注射U2OS细胞（5×10⁶个细胞/只）。当肿瘤体积达到100-150 mm³时，将小鼠随机分为四组：对照组（载体）、米林单药组（50 mg/kg，腹腔注射，每3天一次，持续3周）、放射线单药组（2 Gy，分别于第1、8、15天进行局部肿瘤照射）和联合治疗组。米林溶于DMSO，并用生理盐水稀释（最终DMSO浓度≤5%）后进行腹腔注射。每3天测量一次肿瘤体积；小鼠于第22天处死，并收集肿瘤组织进行免疫组织化学分析[2]
- LPS诱导的炎症模型：C57BL/6小鼠腹腔注射LPS（10 mg/kg）以诱导全身炎症。同时，给予Mirin（30 mg/kg，腹腔注射，每日一次，连续5天）。在实验终点收集血清和肝组织，用于NO定量和iNOS蛋白检测[3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
米林（≤30 μM）对正常人成纤维细胞（CCD-18Co）和乳腺上皮细胞（MCF-10A）的细胞毒性较低，72 小时后细胞存活率 >80% [2]
- 小鼠急性毒性：单次腹腔注射高达 200 mg/kg 的米林未引起死亡或显著体重减轻（<5%）[2] - 小鼠亚慢性毒性研究（21 天）：给予小鼠米林（50 mg/kg，腹腔注射，每 3 天一次，共 3 次），血清 ALT、AST 或肌酐水平无显著变化，肝脏、肾脏、心脏或肺脏也未见病理损伤[2] - 米林（30 mg/kg/天，腹腔注射，共 5 次）未在小鼠肝脏或脾脏中诱导明显的炎症细胞浸润，证实其免疫毒性较低[3] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
米林是一种选择性小分子MRN复合物抑制剂，特异性靶向MRE11的核酸酶活性[1][2]。其核心机制包括阻断MRN介导的DNA双链断裂（DSB）切除，抑制同源重组（HR）修复，并使具有HR修复能力的癌细胞对DNA损伤剂（电离辐射、化疗）更加敏感[1][2]。米林还具有抗炎活性，可通过下调LPS刺激的巨噬细胞中iNOS的表达和NO的产生来发挥作用[3]。它被广泛用作研究工具，用于研究MRN复合物的功能、DNA修复通路以及增强DNA损伤癌症疗法的疗效[1][4]。米林对其他核酸酶和正常细胞的脱靶效应极小，这支持了其作为癌症治疗中放射增敏剂或化疗增敏剂的潜力[2]。
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| 分子式 |
C10H8N2O2
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|---|---|---|
| 分子量 |
220.25
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| 精确质量 |
220.03
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| 元素分析 |
C, 54.53; H, 3.66; N, 12.72; O, 14.53; S, 14.56
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| CAS号 |
1198097-97-0
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
1206243
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
441.6±55.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
298 °C
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| 闪点 |
220.8±31.5 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.1 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.718
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| LogP |
1.36
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| tPSA |
98.48
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
15
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| 分子复杂度/Complexity |
330
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
S1/C(=N/[H])/N([H])C(C1=C([H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])O[H])=O
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| InChi Key |
YBHQCJILTOVLHD-YVMONPNESA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C10H8N2O2S/c11-10-12-9(14)8(15-10)5-6-1-3-7(13)4-2-6/h1-5,13H,(H2,11,12,14)/b8-5-
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| 化学名 |
(5Z)-5-[(4-hydroxyphenyl)methylidene]-2-imino-1,3-thiazolidin-4-one
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~44 mg/mL (~199.8 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (4.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 10.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (4.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 10.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (4.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.5403 mL | 22.7015 mL | 45.4030 mL | |
| 5 mM | 0.9081 mL | 4.5403 mL | 9.0806 mL | |
| 10 mM | 0.4540 mL | 2.2701 mL | 4.5403 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Inhibition of MRN results in prolonged metaphase in mammalian cells.Mol Cell.2013 Mar 28;49(6):1097-107. |
|---|
MRN inhibition disrupts the RanGTP gradient during metaphase.Mol Cell.2013 Mar 28;49(6):1097-107. |
MRN inhibition results in a reduction of RCC1 binding to chromatin.Mol Cell.2013 Mar 28;49(6):1097-107. |
MOMA-341
Morpholino G phosphoramidite
MRL-436
TBIA
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463611831
