| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Wee1 (IC50 = 5.2 nM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：MK-1775 以 ATP 竞争性方式抑制 Wee1 激酶。与 Wee1 相比，MK-1775 对 Yes 的效力低 2 至 3 倍，IC50 为 14 nM，对其他 7 种激酶的效力低 10 倍，在 1 μM 时抑制 >80%，选择性比人类高 100 倍Myt 1，另一种通过替代位点 (Thr14) 磷酸化来抑制细胞周期蛋白依赖性激酶 1 (CDC2) 的激酶。通过阻断携带突变 p53 的 WiDr 细胞中的 Wee1 活性来消除 DNA 损伤检查点，MK-1775 治疗可抑制 CDC2 在 Tyr15 (CDC2Y15) 的基础磷酸化，EC50 为 49 nM，并抑制吉西他滨、卡铂或顺铂诱导的损伤CDC2 磷酸化和细胞周期停滞呈剂量依赖性，EC50 分别为 82 nM 和 81 nM、180 nM 和 163 nM、以及 159 nM 和 160 nM。 30-100 nM 的 MK-1775 单独处理对 WiDr 和 H1299 细胞没有显着的抗增殖作用，而 300 nM 的 MK-1775 足以抑制 Wee1 > 80%，在 WiDr 细胞中显示出中等但显着的抗增殖作用，抗增殖作用达 34.1% H1299 细胞中为 28.4%。激酶测定：使用重组人Wee1。使用 10 μM ATP、1.0 μCi 的 [γ-33P]ATP 和 2.5 μg 聚（Lys、Tyr）作为底物，在浓度递增的 MK-1775 存在下，在 30°C 下进行激酶反应 30 分钟。掺入基质中的放射性被捕获在 MultiScreen-PH 板上，并在液体闪烁计数器上进行计数。细胞测定：细胞（WiDr、NCI-H1299、TOV21G 和 HeLa）用或不用吉西他滨处理 24 小时，然后用 MK-1775 再处理 24 小时。使用 SpectraMax 通过 WST-8 试剂盒测定细胞活力。使用 Caspase-3/7 Glo 试剂盒测定细胞 caspase-3/7 活性。
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| 体内研究 (In Vivo) |
MK-1775 单独治疗（约 20 mg/kg）对大鼠 WiDr 异种移植物显示出最小的抗肿瘤作用，第 3 天 T/C 为 69%。单独使用 MK-1775 对裸鼠 HeLa-luc 和 TOV21G-shp53 异种移植物的抗肿瘤功效款式也适中。
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| 酶活实验 |
Wee1 是一种人类重组蛋白。使用 10 μM ATP、1.0 μCi 的 [γ-33P]ATP 和 2.5 μg 聚（Lys、Tyr）作为底物进行激酶反应，所有这些都在增加 MK 的情况下进行-1775 浓度，30°C 30 分钟。混合到基质中的放射性被捕获在 MultiScreen-PH 板上，并使用液体闪烁计数器进行定量。
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| 细胞实验 |
使用含有 0.4 mol/L NaCl、1 mM EDTA 和 50 mM HEPES (pH 7.9) 的裂解液从细胞沉淀中提取整个蛋白质。然后用蛋白酶抑制剂、1% NP-40 和 10 µL/mL 磷酸酶抑制剂混合物 1 和 2 强化蛋白质。Bio-Rad 蛋白质测定可得出裂解物的蛋白质浓度。在 Immobilon 膜上，使用 12% SDS-PAGE 分离等体积的蛋白质。含有 0.1% 吐温 (TBS-T) 和 5% 脱脂奶粉的缓冲盐水（150 mM，pH 7.4）会阻断膜上的非特异性结合位点。将膜浸泡在含有一抗的 5% 脱脂奶粉中，在 4°C 下过夜，即可鉴定蛋白质信号。随后在已过氧化物酶偶联的相应二抗中孵育 45 分钟。之后，使用 Typhoon 9400 扫描仪对膜进行显影，并使用 ECL 和蛋白质印迹检测试剂增强化学发光。
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| 动物实验 |
Inoculation of 1×106 Calu-6 cells in 10 µL results in the production of tumor xenografts in the leg. Tumors with a diameter of 8 mm are treated with radiation and Adavosertib (MK-1775) for 5 days. Unanesthetized mice are given gamma-rays locally at a dose rate of 5 Gy/min via a small-animal irradiator that consists of two parallel-opposed 137Cs sources for their tumor-bearing legs. Tumors are exposed to radiation twice a day, six hours apart. Give adavosertib (MK-1775) by gavage in volumes of 0.1 mL one hour prior to and two hours following the initial daily radiation dosage.
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| 参考文献 |
>
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| 分子式 |
C27H32N8O2
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|---|---|---|
| 分子量 |
500.6
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| 精确质量 |
500.26
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| 元素分析 |
C, 64.78; H, 6.44; N, 22.38; O, 6.39
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| CAS号 |
955365-80-7
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| 相关CAS号 |
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| 外观&性状 |
Yellow solid powder
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| SMILES |
CC(C)(C1=NC(=CC=C1)N2C3=NC(=NC=C3C(=O)N2CC=C)NC4=CC=C(C=C4)N5CCN(CC5)C)O
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| InChi Key |
BKWJAKQVGHWELA-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H32N8O2/c1-5-13-34-25(36)21-18-28-26(29-19-9-11-20(12-10-19)33-16-14-32(4)15-17-33)31-24(21)35(34)23-8-6-7-22(30-23)27(2,3)37/h5-12,18,37H,1,13-17H2,2-4H3,(H,28,29,31)
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| 化学名 |
1-[6-(2-hydroxypropan-2-yl)pyridin-2-yl]-6-[4-(4-methylpiperazin-1-yl)anilino]-2-prop-2-enylpyrazolo[3,4-d]pyrimidin-3-one
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外) |
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| 溶解度 (体内) |
Solubility in Formulation 1: ≥ 2.87 mg/mL (5.73 mM) (saturation unknown) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution.
Preparation of saline: Dissolve 0.9 g of sodium chloride in 100 mL ddH₂ O to obtain a clear solution. Solubility in Formulation 2: ≥ 2.08 mg/mL (4.16 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution. For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 20.8 mg/mL clear DMSO stock solution to 400 μL PEG300 and mix evenly; then add 50 μL Tween-80 to the above solution and mix evenly; then add 450 μL normal saline to adjust the volume to 1 mL. Preparation of saline: Dissolve 0.9 g of sodium chloride in 100 mL ddH₂ O to obtain a clear solution. View More
Solubility in Formulation 3: ≥ 2.08 mg/mL (4.16 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution. Solubility in Formulation 4: ≥ 2.08 mg/mL (4.16 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution. For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 20.8 mg/mL clear DMSO stock solution to 900 μL corn oil and mix evenly. Solubility in Formulation 5: 2% DMSO +30% PEG 300 +5% Tween+ddH2O: 5 mg/mL Solubility in Formulation 6: 5 mg/mL (9.99 mM) in 0.5% Methylcellulose/saline water (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), Suspension solution; with ultrasonication. Preparation of saline: Dissolve 0.9 g of sodium chloride in 100 mL ddH₂ O to obtain a clear solution. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9976 mL | 9.9880 mL | 19.9760 mL | |
| 5 mM | 0.3995 mL | 1.9976 mL | 3.9952 mL | |
| 10 mM | 0.1998 mL | 0.9988 mL | 1.9976 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT01849146 | Active Recruiting |
Drug: Adavosertib Drug: Temozolomide |
Glioblastoma Recurrent Glioblastoma |
National Cancer Institute (NCI) |
August 19, 2013 | Phase 1 |
| NCT02617277 | Active Recruiting |
Drug: AZD1775 Drug: MEDI4736 |
Advanced Solid Tumours | AstraZeneca | December 28, 2015 | Phase 1 |
| NCT02659241 | Active Recruiting |
Other: Laboratory Biomarker Analysis Drug: Adavosertib |
Advanced Ovarian Carcinoma Carcinomatosis |
M.D. Anderson Cancer Center | February 4, 2016 | Early Phase 1 |
| NCT01922076 | Active Recruiting |
Other: Pharmacological Study Drug: Adavosertib |
Glioblastoma Gliosarcoma |
National Cancer Institute (NCI) |
September 3, 2013 | Phase 1 |
| NCT04439227 | Active Recruiting |
Drug: Adavosertib | Advanced Lymphoma Refractory Lymphoma |
National Cancer Institute (NCI) |
March 13, 2017 | Phase 2 |
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LEB-03-144
LEB-03-153
LEB-03-146
LEB-03-145
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