| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CGRP receptor ( IC50 = 0.12 nM )
CGRP receptor (human CGRP receptor: Ki = 0.024 ± 0.001 nM in SK-N-MC cells; Ki = 0.022 ± 0.002 nM on recombinant human receptor; rhesus monkey CGRP receptor: Ki = 0.024 ± 0.001 nM; canine CGRP receptor: Ki = 10 nM; rat CGRP receptor: Ki = 10 ± 1.2 nM) [1] Human adrenomedullin AM1 receptor (CLR/RAMP2): Ki = 16,500 nM [1] Human adrenomedullin AM2 receptor (CLR/RAMP3): Ki = 156 ± 17 nM [1] Human calcitonin receptor (CTR): Ki = 1.9 ± 0.58 μM [1] Human amylin AMY1 receptor (CTR/RAMP1): Ki = 0.75 ± 0.13 nM [1] Human amylin AMY3 receptor (CTR/RAMP3): Ki = 128 ± 25 nM [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
MK-3207 对恒河猴受体的亲和力 (Ki) 为 0.024±0.001 nM (n=14)，与人类相当，但其对犬和鼠受体的亲和力分别低 400 倍以上，分别为 10 nM 和 10±1.2 nM。MK-3207 对人 AM1 (CLR/RAMP2) 和 AM2 (CLR/RAMP3) 受体的 Ki 值分别为 16,500 nM 和 156±17 nM，表现出高度选择性。 MK-3207 的 Kα 值为 1.9±0.58 μM，对人 CTR 受体表现出高度选择性。其 Ki 值为 128±25 nM，表明 MK-3207 对 AMY3 (CTR/RAMP3) 受体也具有良好的选择性。然而，其 Ki 值为 0.75±0.13 nM，表明其对 AMY1 (CTR/RAMP1) 受体的选择性较低。MK-3207 能有效抑制人 α-CGRP 刺激的表达人 CGRP 受体的 HEK293 细胞中 cAMP 的反应，IC50 值为 0.12±0.02 nM。 MK-3207 对大鼠 CGRP 受体的效力显著降低，pIC50=7.31±0.09。
MK-3207 能有效阻断人 α-CGRP 刺激的表达人 CGRP 受体的 HEK293 细胞中 cAMP 的反应，IC50 = 0.12 ± 0.02 nM；添加 50% 人血清后，IC50 = 0.17 ± 0.02 nM [1] MK-3207 浓度的增加导致 CGRP 剂量反应曲线平行右移，但最大激动剂反应没有降低； Schild回归分析得出pA2 = 10.3和KB = 0.05 nM，与竞争性拮抗作用一致[1] MK-3207对大鼠CGRP受体的效力显著降低，pIC50 = 7.31 ± 0.09[1] MK-3207是人源和鼠源P-糖蛋白(P-gp)的底物，浓度分别为1 μM和5 μM，这由L-MDR1和L-mdr1a细胞系中B-to-A/A-to-B转运比分别为33和50表明；MK-3207具有较高的被动渗透性，为24 × 10⁻⁶ cm/s[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
MK-3207 能显著激活中枢受体，因为它是一种中枢神经系统穿透剂。口服 10 mg/kg 剂量的 MK-3207 后，脑脊液与血浆的浓度比为 2% 至 3%[1]。
在恒河猴药效学试验中，通过测量辣椒素诱导的皮肤血管舒张 (CIDV)，MK-3207 可浓度依赖性地抑制皮肤血流。血浆暴露量范围为 <1 nM 至约 260 nM。 MK-3207 对 CIDV 的抑制 EC50 = 0.8 ± 0.3 nM 和 Emax = 81 ± 5%；EC90 值约为 7 nM [1] |
| 酶活实验 |
在胰淀素结合实验中，将 MK-3207 和 40 pM 大鼠胰淀素混合，然后加入 25 μg CTR/RAMP1 或 25 μg CTR/RAMP3 膜。将混合物在 1 ml 结合缓冲液（10 mM HEPES、5 mM MgCl₂ 和 0.2% 牛血清白蛋白）中于室温孵育 3 小时。在降钙素结合实验中，使用 25 μg CTR 膜和 30 pM ¹²⁵I-人降钙素作为放射性配体。孵育过程通过用 0.5% 聚乙烯亚胺封闭的 GF/B 96 孔滤板过滤结束。 Prism用于数据分析，Ki值由公式Ki=IC50/(1+[配体]/KD)计算得出。饱和结合实验用于计算每个受体的KD值。
进行竞争性结合实验以确定MK-3207对人、恒河猴、大鼠和犬CGRP受体的相对亲和力。将膜（SK-N-MC细胞、重组人、恒河猴小脑、犬脑、大鼠脑）与¹²⁵I-hCGRP和不同浓度的MK-3207孵育。孵育通过用0.5%聚乙烯亚胺封闭的GF/B 96孔滤板过滤终止。Ki值使用公式Ki = IC50/(1+[配体]/KD)计算[1]。 竞争性结合实验肾上腺髓质素、降钙素和胰淀素受体：将 MK-3207 与 ⁴⁰ pM ¹²⁵I-大鼠胰淀素（用于 CTR/RAMP1 或 CTR/RAMP3 膜）、³⁰ pM ¹²⁵I-人降钙素（用于 CTR 膜）或适用于 AM1/AM2 受体的相应放射性配体混合，加入 25 μg 膜，置于结合缓冲液（10 mM HEPES、5 mM MgCl₂、0.2% 牛血清白蛋白）中，总体积为 1 ml。室温孵育 3 小时，通过过滤终止反应。[1] [³H]MK-3207 饱和结合：将浓度递增的 [³H]MK-3207（比活度 73.7 Ci/mmol）与 1 μM 化合物 25（用于非特异性结合）和 50 μM 化合物 25（用于非特异性结合）混合。将 50 μg/孔 SK-N-MC 膜置于 1 ml 结合缓冲液中，室温孵育过夜（18 小时），过滤终止反应。KD = 60 pM，Bmax = 350 fmol/mg 蛋白 [1] 结合动力学：将 60 pM [³H]MK-3207 与 50 μg/孔 SK-N-MC 膜置于结合缓冲液中，室温孵育 1 至 300 分钟；表观 kon = 1.5 × 10⁹ M⁻¹·min⁻¹ [1] 解离动力学：将 60 pM [³H]MK-3207 与 50 μg/孔 SK-N-MC 膜在室温下孵育 3 小时，然后加入 1 μM 化合物 25，监测解离 1 至 390 分钟；koff = 0.012 min⁻¹， t1/2 = 59 分钟 [1] |
| 细胞实验 |
使用稳定表达人CGRP受体（CLR/RAMP1）的HEK293细胞进行功能分析。在分析前约19小时，将细胞以85,000个/孔的密度接种于96孔聚赖氨酸包被板中。用PBS洗涤细胞后，在有或无50%人血清的情况下，于37℃、CO₂培养箱中用不同浓度的MK-3207预孵育30分钟。加入300 μM异丁基甲基黄嘌呤，于37℃孵育30分钟，然后用0.3 nM α-CGRP刺激5分钟。测定细胞内cAMP水平。 IC50 = 0.12 ± 0.02 nM（无血清），0.17 ± 0.02 nM（含 50% 人血清）[1]
使用瞬时表达人/大鼠杂合 CGRP 受体的 HEK293 细胞进行功能性检测：将细胞转染人 CLR + 大鼠 RAMP1、人 CLR + 人 W74A RAMP1 或大鼠 CLR + 大鼠 RAMP1。48 小时后，将细胞解离并重悬于含 300 μM 异丁基甲基黄嘌呤的检测缓冲液中，以 2000 个细胞/孔的密度加入含有拮抗剂的 384 孔板中，室温孵育 30 分钟，然后加入 EC50 浓度的 CGRP，孵育 20 分钟，最后进行 HTRF cAMP 检测。pIC50 值：hCLR/hRAMP1 = 9.75 ± 0.03； hCLR/rRAMP1 = 8.12 ± 0.1；hCLR/hW74A = 8.66 ± 0.18；rCLR/rRAMP1 = 7.31 ± 0.09 [1] |
| 动物实验 |
一根特制的柔性硅胶导管，在完全悬吊于枕大池内并牢固地固定在寰枕膜两侧后，被送入位于肩胛中部区域的手术植入端口。导管经皮下隧道到达该位置。通过覆盖端口的皮肤和膜，无菌地插入一根针头以获取脑脊液；外周静脉穿刺用于采集血样。在对植入枕大池导管的恒河猴口服10 mg/kg MK-3207（0.5%甲基纤维素，pH值调整至约3）后，分别于0.5、1、2、4、8和24小时采集脑脊液和血浆样本，并进行化合物水平分析。
恒河猴辣椒素诱导皮肤血管舒张（CIDV）药效学试验。六只成年恒河猴（雌雄不限，体重4.8–12.7 kg）用氯胺酮（5–30 mg/kg，肌注）麻醉，插管，并用异氟烷（1–2%，100%氧气）维持麻醉。在前臂腹侧放置四个橡胶O形环（内径8 mm）。局部应用辣椒素（2 mg，溶于 30% 乙醇、30% Tween 20 和 40% 水中）诱导真皮血管扩张。采用激光多普勒成像仪进行定量分析。在未接受任何治疗的辣椒素基线激发试验后，依次进行三次赋形剂或 MK-3207 治疗方案的输注。赋形剂：剂量 1：静脉推注 0.5 ml 50% DMSO 和 50% 水的混合溶液，随后以 0.025 ml/min 的速度持续静脉输注 25 分钟；剂量 2：相同；剂量 3：静脉推注 0.5 ml 100% DMSO，随后以 0.025 ml/min 的速度持续静脉输注 25 分钟。 MK-3207 给药方案，目标血浆暴露量为 1-300 nM：1) 0.3 μg/kg 静脉推注 + 0.008 μg/kg/min，0.6 μg/kg 静脉推注 + 0.025 μg/kg/min，然后 2.1 μg/kg + 0.084 μg/kg/min；2) 0.6 + 0.025，2.1 + 0.084，然后 9.1 + 0.25；3) 9.1 + 0.25，21.2 + 0.84，然后 60.6 + 2.5。在应用辣椒素 20 分钟后（输注开始后 25 分钟）测量皮肤血流量。在同一时间点采集血样用于血浆浓度测定[1] 枕大池引流恒河猴脑脊液采集模型：将一根柔性硅胶导管悬挂于枕大池内，锚定于寰枕膜，经皮下隧道穿行至肩胛中部，并连接至手术植入的端口体。通过皮肤和膜上的针头采集脑脊液。口服10 mg/kg MK-3207（0.5%甲基纤维素，pH~3）后，分别于0.5、1、2、4、8和24小时采集脑脊液和血浆样本（n=3）[1] 体外P-糖蛋白转运研究：在研究前5天，将细胞以85,000个细胞/0.17 ml/孔的密度接种于96孔滤膜上。用10 mM HEPES缓冲的HBSS（pH 7.4）替换培养基，平衡30分钟后吸出。通过在接收侧加入 0.15 ml HBSS，并在供体侧加入 0.15 ml 含有 1 或 5 μM MK-3207 的 HBSS 来启动转运（A 到 B 的转运从顶端开始，B 到 A 的转运从基底外侧开始）。以 1 μM 维拉帕米作为阳性对照进行定向转运。在 37°C 下孵育 3 小时，收集样品并通过 LC/MS/MS 进行定量分析 [1]。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
MK-3207 在大鼠 (74%)、犬 (67%) 和恒河猴 (41%) 中显示出良好的口服生物利用度 [1]
在恒河猴中，清除率为 15 ml/min/kg，静脉半衰期为 1.5 小时 [1] 在经枕大池移植的恒河猴中，口服 10 mg/kg 后，脑脊液 Cmax = 20.0 ± 13.5 nM，血浆 Cmax = 979 ± 570 nM；脑脊液 AUC0-24h = 96.4 ± 41.8 nM·h，血浆 AUC0-24h = 3285 ± 1205 nM·h；脑脊液/血浆比值 = 2.0%（基于 Cmax）和 2.9%（基于 AUC）[1] 脑脊液/血浆比值约为血浆中游离分数 (9.4%) 的 30%，表明中枢和外周隔室没有自由平衡[1]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
MK-3207 是人和小鼠 P-糖蛋白 (P-gp) 的底物（在 L-MDR1 和 L-mdr1a 细胞系中，浓度为 1 μM 和 5 μM 时，B 到 A/A 到 B 的转运比率分别为 33 和 50）[1]
血浆中游离分数为 9.4% [1] 在 169 种酶和结合试验的筛选中，MK-3207 对 CGRP 受体具有高度选择性，除人降钙素受体（IC50 = 1.75 μM）外，所有试验的 IC50 均大于 5 μM [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
MK-3207 是一种强效的口服活性 CGRP 受体拮抗剂，目前正在开发用于急性治疗偏头痛。在 II 期适应性剂量范围试验中，它已显示出疗效，与安慰剂相比，给药 2 小时后可显著改善偏头痛疼痛缓解 [1]
使用 [³H]MK-3207 (0.045 nM) 对恒河猴脑切片进行体外放射自显影显示，小脑（灰质）、脑干（处理伤害性刺激的区域）和脑膜的结合密度最高；大脑皮层和尾状核壳核的结合极低 [1] MK-3207 的物种选择性主要由 RAMP1 驱动；人 RAMP1 中色氨酸 74 位突变为丙氨酸导致其效力降低 10 至 40 倍 [1] 与替卡吉泮 (t1/2 = 1.3 分钟) 相比，MK-3207 的解离动力学较慢 (t1/2 = 59 分钟)，这是由于其对 CGRP 受体的亲和力显著增强所致 [1] MK-3207 正在被评估为一种潜在的治疗偏头痛的新疗法，其优势在于没有血管收缩作用（曲坦类药物的缺点）[1] |
| 分子式 |
C31H29F2N5O3.HCL
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|---|---|---|
| 分子量 |
594.05
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| 精确质量 |
593.2
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| CAS号 |
957116-20-0
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| 相关CAS号 |
MK-3207;957118-49-9
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| PubChem CID |
49867927
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| 外观&性状 |
Off-white to pink solid powder
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| LogP |
5.052
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| tPSA |
103.43
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
42
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| 分子复杂度/Complexity |
1040
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| 定义原子立体中心数目 |
2
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| SMILES |
C1CCC2(C1)C(=O)N([C@@H](CN2)C3=CC(=CC(=C3)F)F)CC(=O)NC4=CC5=C(C[C@@]6(C5)C7=C(NC6=O)N=CC=C7)C=C4.Cl
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| InChi Key |
VWKNXYACOMQRBX-KZCKSIIFSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C31H29F2N5O3.ClH/c32-21-10-19(11-22(33)13-21)25-16-35-31(7-1-2-8-31)29(41)38(25)17-26(39)36-23-6-5-18-14-30(15-20(18)12-23)24-4-3-9-34-27(24)37-28(30)40;/h3-6,9-13,25,35H,1-2,7-8,14-17H2,(H,36,39)(H,34,37,40);1H/t25-,30+;/m0./s1
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| 化学名 |
2-[(8R)-8-(3,5-difluorophenyl)-10-oxo-6,9-diazaspiro[4.5]decan-9-yl]-N-[(2R)-2'-oxospiro[1,3-dihydroindene-2,3'-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridine]-5-yl]acetamide;hydrochloride
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.21 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.21 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.21 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 1% DMSO +30% polyethylene glycol+1% Tween 80 : 30mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6834 mL | 8.4168 mL | 16.8336 mL | |
| 5 mM | 0.3367 mL | 1.6834 mL | 3.3667 mL | |
| 10 mM | 0.1683 mL | 0.8417 mL | 1.6834 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Selected CGRP Receptor Antagonists.ACS Med Chem Lett.2010 Jan 12;1(1):24-9. |
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Model predictedvs. observed blood flow by MK-3207 plasma concentration at two capsaicin doses (300 and 1000 μg).Br J Clin Pharmacol.2015 May;79(5):831-7. |
Simulated mean response of inhibition (%) of capsaicin-induced dermal vasodilatation (CIDV) byMK-3207vs.plasma concentrations ofMK-3207.Br J Clin Pharmacol.2015 May;79(5):831-7. |
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