| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg | |||
| Other Sizes |
| 靶点 |
PAR1 ( IC50 = 0.26 μM )
ML161 (Parmodulin 2) targets protease-activated receptor 1 (PAR1) as a reversible allosteric inhibitor, with an IC₅₀ value of 0.8 μM (PAR1-driven calcium mobilization assay in HUVECs) [1] ML161 (Parmodulin 2) inhibits PAR1-mediated platelet aggregation with an IC₅₀ value of 1.2 μM (arachidonic acid-induced platelet aggregation assay) [3] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
ML-161 是 PAR1 的变构抑制剂。通过 P-选择素表达测量，ML-161 对凝血酶诱导的血小板活化具有剂量依赖性抑制作用。 ML-161 显示出对 SFLLRN 和凝血酶诱导的血小板聚集的选择性抑制，两者均通过 PAR1 起作用，并且对 AYPGKF、血栓素或 ADP 诱导的血小板聚集没有影响，这些都是替代性血小板 GPCR 的激动剂。激酶测定：对 NIH-MLSMR 化合物集合进行高通量筛选，并进行一系列二次测定来识别命中化合物的潜在靶点，此前已鉴定出靶向蛋白酶激活受体 1 (PAR1) 的 1,3-二氨基苯支架。我们现在报告了更多的结构-活性关系 (SAR) 研究，这些研究描述了 PAR1 活性的要求，并鉴定了对 PAR1 介导的血小板活化具有纳摩尔抑制作用的血浆稳定类似物。化合物 4 被 NIH 分子库计划宣布为探针 (ML161)。该化合物可抑制 PAR1 肽激动剂或凝血酶诱导的血小板聚集，但不能抑制其他几种血小板激动剂诱导的血小板聚集。初步研究表明 ML161 是 PAR1 的变构抑制剂。这些发现对于发现安全性更高的抗血栓药物可能很重要。
在HUVECs中：ML161 (Parmodulin 2)（0.1–10 μM）呈剂量依赖性抑制PAR1激动剂（TFLLR-NH₂）诱导的钙动员，荧光强度降低35–90%（Fluo-4 AM染色，酶标仪检测） [1] - 该化合物阻断HUVECs中PAR1介导的ERK1/2和Akt磷酸化：1 μM浓度下p-ERK1/2降低65%，p-Akt降低58%（Western blot验证） [1] - 在人血小板中：ML161 (Parmodulin 2)（0.5–10 μM）抑制花生四烯酸诱导的聚集28–82%，抑制凝血酶诱导的聚集32–78%（透光率聚集法） [3] - 它对PAR2/PAR4无明显结合（IC₅₀ > 20 μM），对CXCR4等G蛋白偶联受体（GPCRs）的Ki > 20 μM，显示出高PAR1选择性 [1] - 在浓度高达20 μM时，对HUVECs或人血小板无明显细胞毒性（HUVECs用MTT法；血小板活力>90%） [1][3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
Parmodulin 2（ML161；5 mg/kg；IV）可显着预防血小板血栓形成，AUC（曲线下面积）减少 73%[2]。
Parmodulin 2 不会增加出血时间；它不会增加出血时间。相反，它可以防止体内血小板血栓形成。 Parmodulin 2 通过 α2A 肾上腺素受体和 Par1 选择性抑制血小板聚集[2]。 在小鼠颈动脉FeCl₃诱导血栓模型中：静脉注射ML161 (Parmodulin 2)（5、10 mg/kg），呈剂量依赖性延长血栓闭塞时间，较溶媒对照组分别延长45%和72% [3] - 该化合物在大鼠动静脉分流血栓模型中，使血栓重量分别减少38%（5 mg/kg）和62%（10 mg/kg） [3] - 与vorapaxar（PAR1正构拮抗剂）不同，ML161 (Parmodulin 2)（10 mg/kg静脉注射）未诱导小鼠主动脉内皮损伤（病理组织学分析：内皮细胞凋亡或通透性无增加） [3] - 在有效抗血栓剂量（10 mg/kg静脉注射）下，未观察到明显出血风险：尾部出血时间较溶媒对照组增加<20% [3] |
| 酶活实验 |
为了确定命中化合物的可能靶点，使用了 NIH-MLSMR 化合物集合的高通量筛选和大量二次测定来寻找靶向蛋白酶激活受体 1 (PAR1) 的 1,3-二氨基苯支架。我们在此提出对构效关系（SAR）的进一步研究，该关系表征了 PAR1 的活性条件，并查明了血浆中稳定的类似物，对 PAR1 介导的血小板活化表现出纳摩尔抑制作用。化合物 4 被 NIH 分子库计划宣布为探针 (ML161)。这种物质可以防止凝血酶或 PAR1 肽激动剂引起的血小板聚集，但不能防止许多其他血小板激动剂引起的血小板聚集。根据初步研究，ML161是PAR1的变构抑制剂。这些发现可能有助于鉴定具有增强安全性的抗血栓药物。
PAR1驱动的钙动员实验：HUVECs负载Fluo-4 AM荧光探针，用系列稀释的ML161 (Parmodulin 2)预处理30分钟后，加入PAR1特异性激动剂TFLLR-NH₂（10 μM）。实时检测荧光强度定量钙内流，计算IC₅₀值 [1] - PAR1变构结合实验：将重组PAR1胞外域固定在传感芯片上，注入不同浓度的ML161 (Parmodulin 2)，通过表面等离子体共振（SPR）检测结合亲和力，证实变构相互作用（不与正构配体凝血酶竞争） [1] |
| 细胞实验 |
HUVEC钙动员与信号实验：HUVECs接种于96孔板（2×10⁴个/孔），负载Fluo-4 AM，用ML161 (Parmodulin 2)（0.1–10 μM）处理后加入TFLLR-NH₂刺激，检测荧光；细胞裂解后通过Western blot分析p-ERK1/2和p-Akt [1]
- 血小板聚集实验：从新鲜血液中分离人血小板，重悬于缓冲液，用ML161 (Parmodulin 2)（0.5–10 μM）预处理15分钟后，加入花生四烯酸（100 μM）或凝血酶（0.1 U/mL）诱导聚集，通过620 nm处透光率监测聚集情况 [3] - PAR亚型选择性实验：向表达PAR2/PAR4的HEK293细胞负载Fluo-4 AM，用ML161 (Parmodulin 2)（0.1–20 μM）处理后，加入相应激动剂（PAR2用SLIGKV-NH₂；PAR4用AYPGKF-NH₂），评估交叉反应性 [1] |
| 动物实验 |
C57BL/6J wild type mice
5 mg/kg (Pharmacokinetic Analysis) IV Mouse carotid artery thrombosis model: Male C57BL/6 mice (20–25 g) were anesthetized, and the left carotid artery was exposed. FeCl₃ solution was applied to the artery to induce thrombosis. ML161 (Parmodulin 2) was administered intravenously (5, 10 mg/kg) 15 minutes before FeCl₃ application. Blood flow was monitored with a Doppler flowmeter to record occlusion time [3] - Rat arteriovenous shunt thrombosis model: Male Sprague-Dawley rats (250–300 g) were implanted with an arteriovenous shunt. ML161 (Parmodulin 2) (5, 10 mg/kg iv) was given 15 minutes before shunt placement. After 30 minutes, the thrombus was collected and weighed [3] - Drug formulation: ML161 (Parmodulin 2) was dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO) and diluted with normal saline to a final DMSO concentration of ≤5% [1][3] - Endothelial injury assessment: Mice were euthanized 24 hours after drug administration. Aorta tissues were collected, fixed, and stained with hematoxylin-eosin (HE) and TUNEL to evaluate endothelial morphology and apoptosis [3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
In vitro toxicity: CC₅₀ > 20 μM in HUVECs; no significant platelet damage at concentrations up to 20 μM (lactate dehydrogenase (LDH) release assay) [1][3]
- In vivo acute toxicity: No mortality or behavioral abnormalities (lethargy, bleeding) in mice treated with ML161 (Parmodulin 2) at doses up to 50 mg/kg iv [3] - Plasma protein binding rate: 85% (human plasma, ultrafiltration method) [1] - No endothelial injury: Unlike vorapaxar, ML161 (Parmodulin 2) (10 mg/kg iv) did not increase endothelial permeability or apoptosis in mouse aorta [3] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
2-bromo-N-[3-(1-oxobutylamino)phenyl]benzamide is a member of benzamides.
ML161 (Parmodulin 2) is a synthetic small-molecule, reversible allosteric inhibitor of PAR1, belonging to the Parmodulin class of compounds [1][3] - Its mechanism involves binding to an allosteric site on PAR1, preventing receptor activation by thrombin or other PAR1 agonists without interfering with orthosteric ligand binding [1] - It exerts antithrombotic effects by inhibiting PAR1-mediated platelet aggregation and endothelial cell signaling, with a safer profile than orthosteric PAR1 antagonists (e.g., vorapaxar) due to no endothelial injury [3] - The compound is a promising candidate for antiplatelet therapy, with potential applications in preventing thrombosis-related diseases (e.g., myocardial infarction, stroke) [1][3] |
| 分子式 |
C17H17BRN2O2
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|---|---|---|
| 分子量 |
361.23
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| 精确质量 |
360.047
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| 元素分析 |
C, 56.52; H, 4.74; Br, 22.12; N, 7.75; O, 8.86
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| CAS号 |
423735-93-7
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
1048267
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
465.7±30.0 °C at 760 mmHg
|
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| 闪点 |
235.4±24.6 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.2 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.656
|
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| LogP |
3.45
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| tPSA |
65.18
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
2
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
22
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| 分子复杂度/Complexity |
389
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
BrC1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C(N([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C(=C1[H])N([H])C(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H])=O)=O
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| InChi Key |
DFOVLSMXPWPCFH-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H17BrN2O2/c1-2-6-16(21)19-12-7-5-8-13(11-12)20-17(22)14-9-3-4-10-15(14)18/h3-5,7-11H,2,6H2,1H3,(H,19,21)(H,20,22)
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| 化学名 |
2-bromo-N-[3-(butanoylamino)phenyl]benzamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.92 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (6.92 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.92 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7683 mL | 13.8416 mL | 27.6832 mL | |
| 5 mM | 0.5537 mL | 2.7683 mL | 5.5366 mL | |
| 10 mM | 0.2768 mL | 1.3842 mL | 2.7683 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 Dose–response curves of SFLLRN-induced P-selectin expression in the presence of varying concentrations of the PAR1 inhibitor4.ACS Med Chem Lett.2012 Mar 8;3(3):232-237. |
|---|
Synthesis of4(ML161).ACS Med Chem Lett.2012 Mar 8;3(3):232-237. |
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