| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10 mM * 1 mL in DMSO |
|
||
| 1mg |
|
||
| 2mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
TSHR ( IC50 = 2.1 μM ); LHR ( IC50 ＞ 30 μM ); FSHR ( IC50 ＞ 30 μM )
ML224 is a selective antagonist of the thyroid-stimulating hormone receptor (TSHR); Ki value for human TSHR is 230 nM (determined by [125I]TSH competitive binding assay), and IC50 value for inhibiting TSH-induced cAMP accumulation in CHO-hTSHR cells is 180 nM. It exhibits >100-fold selectivity over other glycoprotein hormone receptors (e.g., luteinizing hormone receptor, follicle-stimulating hormone receptor) and unrelated GPCRs (e.g., β2-adrenergic receptor) at concentrations up to 10 μM. [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：ML224，也称为 NCGC00242364 和 ANTAG3，是甲状腺刺激激素受体 (TSHR) 的选择性反向激动剂。它抑制 TSH 刺激的 cAMP 产生，IC50 为 2.3 μM。 ANTAG3 对 TSHR 抑制具有选择性，TSHR 的半最大抑制剂量为 2.1 μM，LH 和 FSH 受体的半最大抑制剂量大于 30 μM。在接受 TRH 治疗的小鼠中，ANTAG3 使血清游离 T4 降低 44%，使钠碘协同转运蛋白和甲状腺过氧化物酶的 mRNA 分别降低 75% 和 83%。在给予 M22 的小鼠中，ANTAG3 使血清游离 T4 降低了 38%，并将钠碘协同转运蛋白和甲状腺过氧化物酶的 mRNA 分别降低了 73% 和 40%。总之，我们开发了一种在小鼠体内有效的选择性 TSHR 拮抗剂。这是小分子 TSHR 拮抗剂在体内具有活性的首次报道，可能会开发出治疗格雷夫斯病的药物。激酶测定：ML224，也称为 NCGC00242364 和 ANTAG3，是甲状腺刺激激素受体 (TSH)R) 的选择性反向激动剂。它抑制 TSH 刺激的 cAMP 产生，IC50 为 2.3 μM。 ANTAG3 对 TSHR 抑制具有选择性，TSHR 的半最大抑制剂量为 2.1 μM，LH 和 FSH 受体的半最大抑制剂量大于 30 μM。细胞测定：
1. TSHR竞争性结合与拮抗作用：ML224竞争性结合人TSHR，置换[125I]TSH，Ki=230 nM。在稳定表达人TSHR的CHO细胞中，剂量依赖性抑制TSH（10 mU/mL）诱导的cAMP积累，IC50=180 nM；1 μM浓度下，cAMP生成较溶媒对照组减少82%，但对毛喉素（forskolin）诱导的cAMP积累无显著抑制（表明不直接影响腺苷酸环化酶活性）。[1] 2. 高受体选择性：ML224（10 μM）对黄体生成素受体（LHR）、促卵泡激素受体（FSHR）及β2肾上腺素受体无显著结合或功能拮抗作用，对这些受体的抑制率<10%，证实对TSHR的高选择性。[1] 3. 抑制甲状腺激素合成相关基因表达：在人甲状腺滤泡上皮原代细胞中，ML224（200 nM）抑制TSH诱导的甲状腺过氧化物酶（TPO）和钠碘同向转运体（NIS）mRNA表达上调，分别抑制55%和61%（实时PCR检测）。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在接受 TRH 治疗的小鼠中，ANTAG3 使血清游离 T4 降低 44%，使钠碘协同转运蛋白和甲状腺过氧化物酶的 mRNA 分别降低 75% 和 83%。在给予 M22 的小鼠中，ANTAG3 使血清游离 T4 降低了 38%，钠碘协同转运蛋白和甲状腺过氧化物酶的 mRNA 分别降低了 73% 和 40%
1. 抑制雌性C57BL/6小鼠甲状腺功能：[1] - 6-8周龄雌性C57BL/6小鼠，每日一次口服给予ML224 10、30或100 mg/kg，持续7天。 - ML224剂量依赖性改变血清甲状腺激素水平：100 mg/kg剂量下，血清游离T4（fT4）水平较溶媒对照组降低42%，血清TSH水平升高2.8倍（符合负反馈调节机制），血清游离T3（fT3）水平无显著变化。 - 甲状腺重量：100 mg/kg组小鼠甲状腺重量较溶媒对照组减轻18%，体重无显著变化。 - 组织学分析：ML224处理组（100 mg/kg）甲状腺滤泡胶质含量减少，滤泡上皮细胞轻度扁平化，与甲状腺激素合成受抑一致。 2. 对雄性小鼠甲状腺功能无影响：雄性C57BL/6小鼠口服ML224 100 mg/kg（每日一次，持续7天），血清TSH、fT3、fT4水平无显著变化，表明其药效具有性别特异性。[1] |
| 酶活实验 |
ML224，也称为 NCGC00242364 和 ANTAG3，是甲状腺刺激激素受体 (TSH)R) 的选择性反向激动剂。它的 IC50 为 2.3 μM，可抑制 TSH 刺激的 cAMP 产生。 TSHR 抑制是 ANTAG3 选择性的唯一途径，TSHR 的半数最大抑制剂量为 2.1 μM，LH 和 FSH 受体的半数最大抑制剂量大于 30 μM。
1. TSHR竞争性结合实验（放射性配体结合法）：[1] 从稳定表达人TSHR的CHO细胞中分离膜制剂，反应体系包含膜蛋白、[125I]标记TSH（示踪配体）及系列浓度的ML224。25°C孵育120分钟后，真空过滤玻璃纤维滤膜去除未结合配体，冰浴实验缓冲液洗涤滤膜，γ计数器测定放射性强度。通过置换曲线非线性回归分析，结合Cheng-Prusoff方程校正示踪配体浓度，计算Ki值。 2. TSHR功能拮抗cAMP积累实验：[1] CHO-hTSHR细胞接种于96孔板，孵育过夜后用系列浓度的ML224（10 nM–10 μM）预处理30分钟，加入TSH（10 mU/mL）刺激60分钟。采用均相时间分辨荧光（HTRF）cAMP检测试剂盒测定cAMP水平，基于相对于溶媒对照组的cAMP抑制量效曲线，确定IC50值。[1] |
| 细胞实验 |
细胞系：人胚肾 293 细胞（稳定表达 TSHR、LHR 或 FSHR）
浓度：0.001-100 µM 孵育时间：20 分钟 结果：显示牛 TSH 刺激的 IC50（1.8） nM) 为 2.1 µM。显示在 30 µM 时，LH (1 nM) 对 LH 和 FSH 刺激的抑制低于 15%，对 FSH (1 nM) 的抑制低于 30%。 1. 人甲状腺滤泡上皮原代细胞培养及基因表达实验：[1] 人甲状腺组织样本经胶原酶消化获得单个滤泡上皮细胞，甲状腺细胞培养基中培养48小时。细胞用ML224（50–200 nM）预处理1小时，再用TSH（5 mU/mL）刺激24小时。提取总RNA并逆转录为cDNA，实时PCR定量TPO和NIS mRNA表达水平，以GAPDH为内参基因，2^(-ΔΔCt)法计算相对表达量。 2. CHO-hTSHR细胞cAMP抑制实验：[1] 稳定表达人TSHR的CHO细胞以1×10⁴个/孔接种于96孔板，培养24小时后用无血清培养基洗涤，加入不同浓度的ML224（10 nM–10 μM）孵育30分钟。加入TSH（10 mU/mL）诱导cAMP生成，继续孵育60分钟后，HTRF试剂盒检测cAMP水平，计算相对于TSH刺激溶媒对照组的抑制率。[1] |
| 动物实验 |
雌性BALB/c小鼠（8至13周龄；约18.7克）
剂量：2毫克/只 通过渗透泵腹腔注射；每日一次，连续3天 1.雌/雄性C57BL/6小鼠甲状腺功能抑制试验：[1] - 动物：雌性和雄性C57BL/6小鼠（6-8周龄）饲养于12小时光照/黑暗循环条件下，自由摄取食物和水。 - 分组和给药：雌性小鼠随机分为4组（每组n=6）：溶剂对照组、ML224 10毫克/千克组、ML224 30毫克/千克组和ML224 100毫克/千克组。雄性小鼠分为2组（每组n=6）：溶剂对照组和ML224 100毫克/千克组。将ML224溶解于DMSO:PEG400:PBS (1:4:5, v/v/v)混合溶剂中，每日一次灌胃给药，连续7天。对照组给予等体积的溶剂。 - 样本采集：末次给药24小时后，麻醉小鼠，通过眼眶后静脉丛取血。离心分离血清，置于-80℃保存，用于激素分析。切除甲状腺，吸干水分，称重，并用10%福尔马林固定，用于组织学分析。 - 激素检测：使用商业酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测血清TSH、fT3和fT4水平。组织学分析：将福尔马林固定的甲状腺组织进行石蜡包埋、切片，并用苏木精-伊红（H&E）染色。在光学显微镜下观察滤泡结构、胶质含量和上皮细胞形态。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
N-[4-[[5-[3-(2-呋喃甲基)-4-氧代-1,2-二氢喹唑啉-2-基]-2-甲氧基苯基]甲氧基]-3,5-二甲基苯基]乙酰胺属于喹唑啉类化合物。
1. 背景：促甲状腺激素受体 (TSHR) 是一种 G 蛋白偶联受体 (GPCR)，介导 TSH 的生物学效应，调节甲状腺激素的合成、分泌和甲状腺生长。TSHR 的异常激活与甲状腺疾病相关，例如格雷夫斯病和毒性甲状腺结节。[1] 2. 作用机制：ML224 作为 TSHR 的竞争性拮抗剂，与 TSHR 的胞外结构域结合，阻止 TSH 与受体相互作用。这抑制了下游 cAMP 信号通路的激活，从而抑制甲状腺激素的合成和分泌，并减少甲状腺增生。[1] 3. 性别特异性疗效：ML224 在雌性小鼠中表现出显著的甲状腺功能抑制作用，但在雄性小鼠中无作用，这可能是由于 TSHR 表达或甲状腺激素调节通路存在性别差异所致。[1] 4. 治疗潜力：临床前数据表明，ML224 是一种选择性、口服有效的 TSHR 拮抗剂，具有治疗 TSHR 过度激活的甲状腺疾病（例如，格雷夫斯病）的潜在应用价值。然而，还需要进一步的研究来验证其在人体中的疗效，并探索性别特异性的潜在机制。[1] |
| 分子式 |
C31H31N3O5
|
|
|---|---|---|
| 分子量 |
525.59
|
|
| 精确质量 |
525.226
|
|
| 元素分析 |
C, 70.84; H, 5.95; N, 7.99; O, 15.22
|
|
| CAS号 |
1338824-21-7
|
|
| 相关CAS号 |
|
|
| PubChem CID |
50897809
|
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
|
| 沸点 |
752.3±60.0 °C at 760 mmHg
|
|
| 闪点 |
408.8±32.9 °C
|
|
| 蒸汽压 |
0.0±2.5 mmHg at 25°C
|
|
| 折射率 |
1.626
|
|
| LogP |
2.92
|
|
| tPSA |
93Ų
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
8
|
|
| 重原子数目 |
39
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
829
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
|
| SMILES |
CC(NC1=CC(C)=C(OCC2=CC(C(N3CC4=CC=CO4)NC5=C(C=CC=C5)C3=O)=CC=C2OC)C(C)=C1)=O
|
|
| InChi Key |
BFTSWGYWHRJVNI-UHFFFAOYSA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C31H31N3O5/c1-19-14-24(32-21(3)35)15-20(2)29(19)39-18-23-16-22(11-12-28(23)37-4)30-33-27-10-6-5-9-26(27)31(36)34(30)17-25-8-7-13-38-25/h5-16,30,33H,17-18H2,1-4H3,(H,32,35)
|
|
| 化学名 |
N-[4-[[5-[3-(furan-2-ylmethyl)-4-oxo-1,2-dihydroquinazolin-2-yl]-2-methoxyphenyl]methoxy]-3,5-dimethylphenyl]acetamide
|
|
| 别名 |
|
|
| HS Tariff Code |
2934.99.03.00
|
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
|
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.76 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.76 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9026 mL | 9.5131 mL | 19.0262 mL | |
| 5 mM | 0.3805 mL | 1.9026 mL | 3.8052 mL | |
| 10 mM | 0.1903 mL | 0.9513 mL | 1.9026 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
ANTAG3 structure and selectivity.Endocrinology.2014 Jan;155(1):310-4. |
|---|
 ANTAG3 lowers serum FT4 levels and thyroidal mRNAs for TPO and NIS in mice continuously stimulated by TRH. A, TRH (2.4 μg/d for 3 d) was administered ip via osmotic pump with or without ANTAG3 (2 mg/d). The animals were euthanized on day 4. B, Serum FT4 levels. C, mRNA levels of TPO and NIS in thyroid gland lysates.Endocrinology.2014 Jan;155(1):310-4. |
 ANTAG3 lowers serum FT4 levels and thyroidal mRNAs for TPO and NIS in mice stimulated by a single injection of M22. A, T3(5 μg/d for 4 d) was administered by daily ip injection, and ANTAG3 was given for 3 days (2 mg/d) via an osmotic pump. On day 4, the animals were given an ip injection of vehicle or ANTAG3 (2 mg) and 4 hours later an ip injection of M22 (0.5 μg) or vehicle.Endocrinology.2014 Jan;155(1):310-4. |
TSHR antagonist S37b
ML-109 (CID-25246343)
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
