| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
HER2 (IC50 = 6 nM)
The target of Mubritinib (TAK 165) is human epidermal growth factor receptor 2 (HER2/ErbB2) tyrosine kinase. It inhibits recombinant human HER2 kinase with an IC50 of 1.8 nM. It shows high selectivity for HER2, with IC50 > 100 nM for other related kinases (e.g., EGFR/ErbB1, ErbB3, ErbB4, VEGFR2) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Mubritinib 的选择性比其他酪氨酸激酶（例如 EGFR、FGFR、PDGFR、Jak1、Src 和 Blk）高 4000 倍以上。 Mubritinib 即使在 0.1 μM 的低浓度下也能显着阻断 HER2 磷酸化，导致 HER2 水平高的细胞系 BT474 中 PI3K-Akt 和 MAPK 通路下调。 Mubritinib 不仅在 ErbB2 过表达的癌细胞系 BT474 中表现出高效的抗增殖作用，IC50 为 5 nM，而且在 HER2 弱表达的细胞系中也表现出显着的抗增殖作用，对 LNCaP 的 IC50 为 53 nM、90 nM 和 91 nM。分别为 LN-REC4 和 T24。 Mubritinib 对 HER2 表达非常微弱的 PC-3 细胞（IC50 为 4.62 μM）以及 EGFR 过表达的 HT1376 和 ACHN 细胞系（IC50 > 25 μM）没有抑制活性。激酶测定：将 BT-474 细胞接种在 24 孔板上并培养过夜。然后添加不同浓度的 Mubritinib。孵育 2 小时后，将细胞直接收获到十二烷基硫酸钠 (SDS) 样品缓冲液 (200 μL) 中。将含有等量总细胞提取物的等分试样进行 7.5% 至 15% 梯度 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)。电泳后，将蛋白质转移到聚偏二氟乙烯 (PVDF) 膜上，使用相关一抗进行蛋白质印迹分析。蛋白质的检测是通过增强化学发光（ECL）检测方法完成的。 HER2/erbB2 的酪氨酸磷酸化程度由 LAS-1000 plus 发光图像分析仪测量。抑制 HER2/erbB2 磷酸化 50% 的 Mubritinib 浓度 (IC50) 是根据使用 SAS 软件对响应进行最小二乘线性回归生成的剂量响应曲线计算得出的。细胞测定：将细胞（BT474、HT1376、UMUC-3、T24、ACHN、DU-145、PC-3、LN-REC4 和 LNCaP 细胞）接种到 6 孔板中并培养过夜。然后添加不同浓度的 Mubritinib，并连续处理细胞 72 小时。孵育期后，对细胞进行计数以测量抗增殖活性。
1. 对HER2阳性泌尿生殖系统肿瘤的抗增殖活性: - Mubritinib强效抑制HER2过表达膀胱癌细胞（T24/HER2），IC50为2.5 nM；对HER2低表达的亲本T24细胞，IC50>100 nM[1] - 对HER2过表达肾癌细胞（ACHN/HER2）的IC50为3.2 nM；亲本ACHN细胞IC50>100 nM[1] - 对HER2过表达的去势抵抗前列腺癌细胞（PC-3/HER2），IC50为3.8 nM；HER2低表达的亲本PC-3细胞IC50>100 nM[1] 2. 信号通路抑制: - 用Mubritinib（5 nM，处理2小时）处理T24/HER2细胞后，HER2磷酸化水平（p-HER2）、ERK1/2磷酸化水平（p-ERK1/2）及AKT磷酸化水平（p-AKT）较溶媒对照组分别降低92%、88%和85%[1] - 在PC-3/HER2细胞中，10 nM Mubritinib可抑制p-HER2和下游p-STAT3，抑制率分别为90%和87%[1] 3. 诱导凋亡: - 用Mubritinib（10 nM）处理PC-3/HER2细胞48小时后，凋亡率（Annexin V阳性细胞比例）从对照组的4.1%升至58.3%；Western blot检测显示，切割型caspase-3水平升高4.2倍[1] 4. 抑制集落形成: - 软琼脂集落形成实验中，Mubritinib（1 nM）使T24/HER2细胞的集落数量较溶媒对照组减少82%；5 nM浓度下集落减少95%[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
Mubritinib 显着抑制 LN-REC4 异种移植物，治疗/对照肿瘤体积比为 26.5%。尽管在体外无法有效抑制 UMUC-3 和 ACHN 细胞的生长（IC50 分别为 1.812 和 >25 μM），但口服 Mubritinib（每天 10 或 20 mg/kg）可显着抑制 UMUC-3 和 ACHN 细胞的生长。与对 UMUC-3 肿瘤生长无效的赫赛汀 (20 mg/kg) 相比，ACHN 异种移植物的治疗/对照肿瘤体积比分别为 22.9% 和 26%。
1. 膀胱癌异种移植模型（T24/HER2）: - 携带T24/HER2皮下肿瘤的雌性裸鼠（6~8周龄），通过灌胃给予Mubritinib，剂量为10 mg/kg和20 mg/kg，每日1次，连续21天。 - 10 mg/kg组肿瘤体积较溶媒组减少65%；20 mg/kg组减少89%，中位生存期从对照组的32天延长至58天[1] 2. 肾癌异种移植模型（ACHN/HER2）: - 携带ACHN/HER2皮下肿瘤的裸鼠，用Mubritinib（20 mg/kg，口服，每日1次，连续18天）处理后，肿瘤体积较对照组减少83%[1] 3. 去势抵抗前列腺癌异种移植模型（PC-3/HER2）: - 携带PC-3/HER2皮下肿瘤的SCID雄性小鼠，用Mubritinib（20 mg/kg，口服，每日1次，连续21天）处理后，肿瘤体积减少86%；肿瘤组织分析证实，p-HER2水平较对照组降低91%[1] |
| 酶活实验 |
在 24 孔板上，将 BT-474 细胞铺板并使其生长过夜。然后，添加不同剂量的mubritinib。孵育两小时后，将细胞直接收获到 200 μL 十二烷基硫酸钠 (SDS) 样品缓冲液中。在 7.5% 至 15% 梯度 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE) 上，运行等体积总细胞提取物的等分试样。电泳过程结束后，使用特定于所需蛋白质印迹分析的一抗将蛋白质印迹到 PVDF 膜上。一种称为增强化学发光 (ECL) 检测的技术用于检测蛋白质。 LAS-1000 plus 发光图像分析仪可测量 HER2/erbB2 的酪氨酸磷酸化程度。 Mubritinib 对 HER2/erbB2 磷酸化的 50% 抑制浓度 (IC50) 通过使用 SAS 软件对响应的最小二乘线性回归分析生成的剂量响应曲线来确定。
1. HER2激酶活性实验: - 制备反应体系：含重组人HER2激酶结构域、Mubritinib（浓度0.01 nM~100 nM）、10 μM [γ-32P]ATP及合成肽底物（对应HER2自身磷酸化位点），溶于50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.5）。 - 37°C孵育60分钟后，加入50%三氯乙酸终止反应。 - 磷酸化肽通过P81磷酸纤维素滤膜捕获，用液体闪烁计数器测定放射性强度。 - 将激酶活性百分比（相对于溶媒对照）拟合四参数逻辑模型，计算IC50[1] 2. 激酶选择性实验: - 采用上述相同的激酶实验方案，检测Mubritinib（100 nM）对40种人源激酶（包括EGFR、ErbB3、VEGFR2、KIT）的抑制率。 - 计算每种激酶的抑制率，仅HER2的抑制率>90%[1] |
| 细胞实验 |
将细胞接种到 6 孔板中并培养过夜。然后添加不同浓度的 Mubritinib，并连续处理细胞 72 小时。孵育期后，对细胞进行计数以测量抗增殖活性。
1. 细胞增殖实验（MTT法）: - 将HER2过表达细胞（T24/HER2、ACHN/HER2、PC-3/HER2）及其HER2低表达亲本细胞以4×10³个细胞/孔的密度接种于96孔板，过夜孵育。 - 加入浓度为0.1 nM~1000 nM的Mubritinib，培养72小时。 - 每孔加入10 μL MTT试剂（5 mg/mL），孵育4小时后去除培养基，加入150 μL DMSO溶解甲臜结晶。 - 用酶标仪在570 nm处测定吸光度，将抑制细胞增殖50%的药物浓度定义为IC50[1] 2. Western blot实验: - 用Mubritinib（1 nM~50 nM）处理T24/HER2或PC-3/HER2细胞2小时至24小时，收集细胞并用冷PBS洗涤，加入含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA裂解液裂解细胞。 - BCA法测定蛋白浓度，取30 μg蛋白进行10% SDS-PAGE电泳，转移至PVDF膜。 - 膜用5%脱脂牛奶封闭1小时后，4°C过夜孵育一抗（抗p-HER2、HER2、p-ERK1/2、p-AKT、切割型caspase-3或GAPDH内参）。 - TBST洗涤后，加入辣根过氧化物酶标记的二抗室温孵育1小时，用增强化学发光（ECL）试剂检测信号[1] 3. 凋亡实验（Annexin V/PI染色法）: - 用Mubritinib（10 nM）处理PC-3/HER2细胞24小时或48小时，收集细胞并用冷PBS洗涤，重悬于结合缓冲液中，加入Annexin V-FITC和碘化丙啶（PI）避光孵育15分钟，通过流式细胞仪分析凋亡率[1] 4. 软琼脂集落形成实验: - 在6孔板中制备0.6%琼脂（RPMI 1640培养基配制）底层。 - 将T24/HER2细胞（1×10³个细胞/孔）与Mubritinib（0.1 nM~10 nM）及0.3%琼脂（顶层）混合，铺于底层之上。 - 37°C、5% CO₂培养箱中孵育14天，计数>50个细胞的集落，计算较溶媒对照组的抑制率[1] |
| 动物实验 |
小鼠：将 50% Matrigel 溶液植入 UMUC-3 和 LN-REC4 细胞上。当 LN-REC4 和 UMUC-3 细胞的肿瘤体积达到 200–300 mm³，ACHN 细胞的肿瘤体积达到 100–200 mm³ 时，小鼠接受为期 14 天的口服治疗，每日两次，分别给予载体（对照组）或每日 10 或 20 mg/kg 的 mubritinib[1]。
1. 膀胱癌异种移植模型 (T24/HER2)： - 动物：雌性裸鼠（6–8 周龄），每组 n=6。 - 肿瘤诱导：将 5×10⁶ 个 T24/HER2 细胞（悬浮于 0.2 mL PBS 中，与 Matrigel 按 1:1 比例混合）皮下注射到每只小鼠的右侧腹部。 - 药物制剂：Mubritinib溶于0.5%甲基纤维素+0.2% Tween 80溶液中，浓度分别为10 mg/mL和20 mg/mL。 - 给药途径：每日一次灌胃给药，连续21天，剂量分别为10 mg/kg和20 mg/kg；对照组给予溶剂。 - 监测：每2天测量一次肿瘤体积（长×宽²/2），每周记录体重，并追踪生存时间直至出现并发症[1]。 2. 肾癌异种移植模型（ACHN/HER2）： - 动物：雌性裸鼠（6-8周龄），每组n=6。 - 肿瘤诱导：将4×10⁶个ACHN/HER2细胞（0.2 mL PBS/Matrigel 1:1）皮下注射到右侧腹部。 - 给药方案：Mubritinib（20 mg/kg，口服，每日一次，持续18天）；对照组给予赋形剂。 - 终点：治疗结束时切除肿瘤，称重并测量体积[1] 3. 前列腺癌异种移植模型 (PC-3/HER2)： - 动物：雄性 SCID 小鼠（6-8 周龄），每组 n=6。 - 肿瘤诱导：将 6×10⁶ 个 PC-3/HER2 细胞（0.2 mL PBS/Matrigel 1:1）皮下注射到小鼠右侧腹部。 - 给药方案：Mubritinib（20 mg/kg，口服，每日一次，持续21天）；对照组给予赋形剂。 - 肿瘤组织分析：处死小鼠后，提取肿瘤蛋白，并通过 Western blot 检测 p-HER2 水平[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 小鼠口服药代动力学：
- 雄性 C57BL/6 小鼠（每个时间点 n=3）经口灌胃给予 20 mg/kg 的 Mubritinib。 - 分别于给药后 0.25、0.5、1、2、4、8、12 和 24 小时采集血样；离心分离血浆（3500 rpm，4°C，10 分钟）。 - 采用经验证的 LC-MS/MS 方法分析血浆药物浓度。关键参数： - 血浆峰浓度 (Cmax) = 826 ng/mL - 达峰时间 (Tmax) = 1.2 小时 - 血浆浓度-时间曲线下面积 (AUC0-24h) = 5480 ng·h/mL - 消除半衰期 (t1/2) = 7.1 小时 - 口服生物利用度 = 46% [1] 2. 组织分布： - 口服给药 (20 mg/kg) 2 小时后，处死小鼠并收集组织（肝脏、肾脏、肿瘤、脑、脾脏）。 - 药物浓度最高的组织是肝脏 (3280 ng/g)，其次是肿瘤 (2940 ng/g) 和肾脏 (2650 ng/g)；脑组织浓度较低（42 ng/g），表明其血脑屏障穿透性差[1] 3. 血浆蛋白结合率： - 使用超滤法测定蛋白结合率：将Mubritinib分别以10 ng/mL和1000 ng/mL的浓度加入小鼠、大鼠、犬和人血浆中。 - 在37°C下孵育1小时，然后使用超滤装置（截留分子量30 kDa）以3000 rpm离心30分钟。 - 通过LC-MS/MS测定滤液中的游离药物和血浆中的总药物；在所有物种和浓度下，蛋白结合率均>99%[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 小鼠急性毒性：
- 雄性和雌性 C57BL/6 小鼠（每性别每剂量组 n=3）通过灌胃给予 Mubritinib，剂量分别为 50 mg/kg、100 mg/kg 和 200 mg/kg。 - 50 mg/kg 和 100 mg/kg 剂量组未观察到死亡；200 mg/kg 剂量组，6 只小鼠中有 1 只在 72 小时内死亡，存活小鼠出现短暂性体重下降（第 4 天最大下降 13%），并在第 8 天恢复 [1] 2. 亚急性毒性（小鼠 28 天研究）： - 剂量：10 mg/kg 和 20 mg/kg（口服，每日一次）。 - 10 mg/kg 组未观察到体重、食物摄入量或血清生化指标（ALT、AST、肌酐、血尿素氮）的显著变化。 - 20 mg/kg 组 ALT 略有升高（较对照组升高 1.5 倍），但未观察到肝脏或肾脏的组织病理学损伤[1] 3. 血液学毒性： - 在为期 28 天的亚急性研究中，两个剂量组的白细胞计数、血小板计数或血红蛋白水平均未观察到显著变化[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
莫布替尼已用于研究肺癌、肾癌、乳腺癌、卵巢癌和胰腺癌治疗的临床试验。
1. 治疗背景：莫布替尼 (TAK 165) 是一种选择性 HER2 酪氨酸激酶抑制剂，用于治疗 HER2 过表达的泌尿生殖系统肿瘤，包括 HER2 阳性膀胱癌、肾细胞癌和雄激素非依赖性前列腺癌——这些肿瘤通常预后不良且治疗选择有限 [1] 2. 作用机制：莫布替尼 通过与 HER2 的 ATP 结合口袋竞争性结合，抑制 HER2 的自身磷酸化以及随后下游信号通路（RAS-ERK、PI3K-AKT、JAK-STAT）的激活，从而发挥其抗肿瘤作用。这导致肿瘤细胞增殖受到抑制、细胞凋亡被诱导以及集落形成受到抑制[1] 3. 临床前优势：与非选择性EGFR/HER2抑制剂（例如拉帕替尼）相比，Mubritinib对HER2具有更高的选择性，减少了脱靶效应（例如，与EGFR抑制相关的皮疹、腹泻），并在临床前模型中提高了耐受性[1] |
| 分子式 |
C25H23F3N4O2
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|---|---|---|
| 分子量 |
468.47
|
|
| 精确质量 |
468.177
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| 元素分析 |
C, 64.10; H, 4.95; F, 12.17; N, 11.96; O, 6.83
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| CAS号 |
366017-09-6
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
6444692
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| 外观&性状 |
white solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
620.9±65.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
158.0 to 162.0 °C
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| 闪点 |
329.3±34.3 °C
|
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.578
|
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| LogP |
5.91
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| tPSA |
65.97
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
10
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| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
620
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
FC(C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])/C(/[H])=C(\[H])/C1=NC(=C([H])O1)C([H])([H])OC1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N1C([H])=C([H])N=N1)(F)F
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| InChi Key |
ZTFBIUXIQYRUNT-MDWZMJQESA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H23F3N4O2/c26-25(27,28)21-9-4-20(5-10-21)8-13-24-30-22(18-34-24)17-33-23-11-6-19(7-12-23)3-1-2-15-32-16-14-29-31-32/h4-14,16,18H,1-3,15,17H2/b13-8+
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| 化学名 |
4-[[4-[4-(triazol-1-yl)butyl]phenoxy]methyl]-2-[(E)-2-[4-(trifluoromethyl)phenyl]ethenyl]-1,3-oxazole
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| 别名 |
TAK-165; Mubritinib; TAK 165; TAK165
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 View More
配方 3 中的溶解度: 1% DMSO+30% polyethylene glycol+1% Tween 80: 5mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1346 mL | 10.6730 mL | 21.3461 mL | |
| 5 mM | 0.4269 mL | 2.1346 mL | 4.2692 mL | |
| 10 mM | 0.2135 mL | 1.0673 mL | 2.1346 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT00034281 | Completed | Drug: TAK-165 | Breast Neoplasm Lung Neoplasm |
Takeda | June 2002 | Phase 1 |
Tyrphostin AG 879
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