| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| Other Sizes |
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描述：MYCi361 (NUCC0196361) 是一种新型高效的 MYC 抑制剂 (Kd = 3.2 μM)，具有潜在的抗癌活性，但其治疗指数较窄。MYCi361 可使细胞内的 MYC 磷酸化，破坏 MYC/MAX 二聚体，并降低 MYC 刺激的转录。此外，它还能增加 MYC 在苏氨酸 58 位点的磷酸化，从而促进蛋白酶体对 MYC 的降解。 MYCi361 能够增强抗 PD-1 免疫疗法的疗效并抑制肿瘤生长。
| 靶点 |
MYC (Kd = 3.2 μM)
MYCi361 (NUCC-0196361) targets MYC (Kd = 3.2 μM for MYC binding as determined by fluorescence polarization competition assay) and disrupts MYC/MAX interaction. It does not inhibit 468 kinases (including GSK3β) in a kinome screen, nor does it inhibit phosphatases in a 10-dose screening panel up to 100 μM. [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
MYCi361抑制MYC驱动的基因表达，分解MYC/MAX二聚体，并激活细胞内的MYC。MYCi361增加MYC在苏氨酸58位的磷酸化，进而促进蛋白酶体对MYC的降解。[1]
MYCi361 (NUCC-0196361)对MYC依赖性癌细胞（包括前列腺癌（MycCaP、LNCaP、PC3）、白血病（MV4-11）、淋巴瘤（HL-60、P493-6）和神经母细胞瘤（SK-N-B2））表现出低微摩尔级的IC50值，而对MYC/MAX非依赖性PC12细胞几乎没有影响。[1] 它降低MYC和MYCN蛋白水平，但不影响MAX蛋白水平，且不改变MYC mRNA水平。蛋白酶体抑制剂MG132可逆转MYC蛋白的减少，环己酰亚胺追踪实验表明，在PC3细胞中，MYC蛋白的半衰期从66分钟缩短至28分钟。[1] 它选择性地增加MYC T58位点的磷酸化，而非S62位点，且这种磷酸化先于MYC蛋白的减少。MYC T58A突变体对降解具有抵抗力，体外激酶实验证实MYCi361可直接增强GSK3β介导的MYC pT58磷酸化。[1] 共免疫沉淀和邻位连接分析(PLA)实验表明，在6 μM浓度下处理1小时后，MYCi361可破坏MYC/MAX相互作用。 [1] 它抑制MYC靶基因（例如CDC25A、MYB）的表达，并通过下调CDC25、细胞周期蛋白、E2F、CDK、Skp2以及上调p21、p15、p16来阻碍细胞周期进程，且不诱导γ-H2AX的产生。[1] 在4 μM浓度下处理72小时，它可诱导MycCaP细胞发生免疫原性细胞死亡，表现为细胞表面钙网蛋白增加、HMGB1释放和ATP释放。[1] 在6 μM浓度下处理48小时，它可增加裂解型caspase-3的表达。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
MYCi361 可上调肿瘤细胞上的 PD-L1 表达，增强肿瘤免疫细胞浸润，抑制小鼠体内肿瘤生长，并使肿瘤对 PD-1 抗体免疫疗法更敏感。[1]
MYCi361 (NUCC-0196361) 以 100 mg/kg/天的剂量腹腔注射可使携带已建立的 MycCaP 同种异体移植瘤的 FVB 小鼠的肿瘤消退，但平均体重下降 10%。重新以 70 mg/kg/天的剂量给药可控制肿瘤生长，且不会导致进一步的体重下降。[1] 在 MYC 表达水平较低的前列腺 PDX 模型 (TM00298) 中，MYCi361 也显示出抗肿瘤疗效。肿瘤组织中 Ki67 增殖标志物减少，而 MYC pT58 水平升高。 [1] 与免疫缺陷的NSG小鼠相比，在免疫功能正常的FVB小鼠中，该药物表现出更强的肿瘤抑制作用（50 mg/kg/天，连续4天），表明其疗效依赖于完整的免疫系统。[1] 该药物可增强CD3+ T细胞向肿瘤的浸润，上调肿瘤细胞上的PD-L1表达，增加CD4+和CD8+ T细胞、表达IFNγ的T细胞、树突状细胞和NK细胞的数量，并有降低Treg细胞数量的趋势。[1] 该药物与抗PD-1免疫疗法具有协同作用：交替使用MYCi361 50 mg/kg/天，连续2天，以及抗PD-1 100 μg/天，连续2天（4个疗程），可协同抑制MycCaP同种异体移植瘤的生长。[1] |
| 酶活实验 |
采用电泳迁移率变动分析 (EMSA) 评估了 MYCi361 (NUCC-0196361) 对 MYC/MAX/DNA 复合物形成的影响。结合反应缓冲液包含 0.005% IGEPAL CA-630、5% 甘油和 1 mM EDTA，溶于 1× PBS 缓冲液中。将 MYC（氨基酸残基 353-439，60 nM）与化合物在室温下孵育 1 小时，然后与 MAX(S) (60 nM) 和 E-box 寡核苷酸 (20 nM) 混合 15 分钟，之后进行非变性凝胶电泳。[1]
采用荧光偏振竞争实验测定结合亲和力。纯化了人 MYC bHLHZip 结构域（氨基酸残基 353-439）。在 10 μM MYC 存在下，对 3-25 μM 的非荧光 MYCi361 与 10 μM 的 10074-G5 进行竞争实验。测量在激发波长 470 nm 和发射波长 560 nm 下进行。使用“单一位点 - Fit Ki”分析法分析数据，得出 Kd 值为 3.2 μM。[1] 体外激酶活性测定：首先用活化的重组 ERK2 对重组 MYC 的 S62 位点进行磷酸化，然后与 GSK3β 激酶和 6 μM 的 MYCi361 或其非活性类似物孵育。反应在 1× 激酶缓冲液（25 mM Tris-HCl pH 7.5、5 mM β-甘油磷酸钠、2 mM DTT、0.1 mM 钒酸钠、10 mM MgCl2）中于室温下进行 2 小时，然后加入 Laemmli 缓冲液并煮沸终止反应。Western blot 检测 pT58 水平。[1] |
| 细胞实验 |
将 MycCaP 细胞用 4 μM MYCi361 处理 72 小时后，收集上清液。进行细胞计数以定量高迁移率族蛋白 B1 (HMGB1) 和分泌的 ATP。将细胞与兔抗钙网蛋白抗体孵育 60 分钟后，使用 Alexa Fluor 488 标记的抗兔二抗进行流式细胞术分析，以检测细胞表面钙网蛋白的存在。
MYCi361 (NUCC-0196361) 的细胞活力检测采用 MTS 试剂盒或活细胞计数法。将细胞（96 孔板中每孔 1000-5000 个细胞）处理 2-7 天，然后加入 MTS 试剂，并在 490 nm 处测量吸光度。 [1] 细胞热位移分析 (CETSA)：用MYCi361 (4-10 μM) 或 DMSO 处理 PC3 细胞 30 分钟后收集细胞，悬浮于含蛋白酶/磷酸酶抑制剂的 PBS 缓冲液中，分装至 PCR 管中，在指定温度下加热 2 分钟，冷却，冻融，离心，并将裂解液进行 Western blot 分析。[1] 生物素下拉实验：将 Biotin-361 (5-10 μM) 与核提取物或重组 MYC 蛋白孵育，用链霉亲和素磁珠捕获，洗涤，洗脱，并通过 Western blot 分析。竞争实验使用过量的 Phosphate-361、G5 或 JKY-2-169。 [1] 共免疫沉淀：用MYCi361（6 μM，1 小时）处理细胞后裂解，通过酶切释放核蛋白，取 1 mg 蛋白与预先包被 MYC 抗体的磁珠在 4°C 下孵育过夜，然后洗涤并洗脱。[1] 邻位连接分析 (PLA)：将 PC3 细胞培养于腔室载玻片上，用MYCi361（6 μM，1-2 小时）处理，固定、透化后与抗 MYC 和抗 MAX 抗体孵育，然后使用 Duolink 试剂盒。定量每个细胞的 PLA 信号。 [1] RNA测序：将PC3细胞用6 μM MYCi361处理24小时，每个处理重复三次。提取RNA，使用TruSeq RNA Access文库制备试剂盒构建文库，并在HiSeq4000上进行测序。进行GSEA和GO分析。[1] 免疫原性细胞死亡检测：将MycCaP细胞用4 μM MYCi361处理72小时，收集上清液用于ATP（生物发光法）和HMGB1（ELISA法）检测；通过流式细胞术检测细胞表面钙网蛋白。[1] |
| 动物实验 |
6-8周龄FVB小鼠、前列腺PDX模型小鼠、NSG小鼠、C57BL/6小鼠、CB17/Icr-Prkdcscid/IcrIcoCrl小鼠、CD-1小鼠
55 mg/kg，50 mg/kg 腹腔注射，灌胃 为了评估体内疗效，将1×10^6个MycCaP细胞悬浮于Matrigel中，皮下注射到6-8周龄、体重约25 g的FVB或NSG雄性小鼠体内。当肿瘤体积达到150-200 mm³时，将小鼠分组。MYCi361溶解于含10% DMSO和20% TWEEN80的PBS缓冲液中。为了快速筛选，先以低剂量（30-50 mg/kg/天）腹腔注射化合物3天，然后以高剂量（100-200 mg/kg/天）腹腔注射3天，直至小鼠耐受。 [1] 在疗效研究中，MYCi361的给药剂量为100 mg/kg/天，连续2天（50 mg/kg，每日两次），然后暂停给药直至肿瘤恢复至原大小，之后以70 mg/kg/天的剂量给药，连续9天。[1] 在短期治疗（4天）中，MYCi361以50 mg/kg/天的剂量腹腔注射给药，并在治疗前后测量肿瘤体积。[1] 在与抗PD-1抗体联合治疗中，MYCi361以50 mg/kg/天的剂量给药，连续2天，与抗PD-1抗体（100 μg/天）或IgG2a同型对照抗体交替给药，连续2天，共4个周期（16天）。 [1] 为了进行肿瘤免疫表型分析，将携带 MycCaP 同种异体移植瘤的小鼠用 MYCi361 50 mg/kg/天 治疗，连续用药 2 天/停药 2 天，共治疗 2 个疗程，然后用流式细胞术分析肿瘤和淋巴结。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在C57BL/6小鼠腹腔注射（ip）或口服（po）50 mg/kg剂量的MYCi361后进行药代动力学分析，结果显示血浆半衰期分别为44小时（ip）和20小时（po）。最大血浆浓度（Cmax）分别为：ip组27200 ng/ml（46 μM），po组13867 ng/ml（23 μM）。给药后24小时，血浆浓度分别为：ip组12733 ng/ml（21 μM），po组5283 ng/ml（9 μM）[1]。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
MYCi361 (NUCC-0196361) 的治疗指数较窄。急性毒性研究表明，最大耐受剂量 (MTD) 为 240 mg/kg/天（口服）。主要器官的组织病理学分析显示脾脏白髓受到抑制，肝细胞肥大。在 100 mg/kg/天的疗效研究中，小鼠平均体重下降 10%；停药后体重恢复。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
MYCi361 (NUCC-0196361) 是一种小分子，可直接与 MYC（氨基酸 366-378 区域，与 G5 和 JKY-2-169 相同）结合，并破坏 MYC/MAX 异二聚体的形成。它通过增强苏氨酸 58 (T58) 的磷酸化来促进 MYC 降解，从而导致蛋白酶体介导的降解。该化合物具有双重作用机制：既能抑制 MYC/MAX 复合物的形成，又能独立于其对 MYC 稳定性的影响。由于其治疗窗口较窄，因此开发了一种耐受性更好的改良类似物 MYCi975 (NUCC-0200975)。[1]
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| 分子式 |
C26H16CLF9N2O2
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|---|---|
| 分子量 |
594.8561
|
| 精确质量 |
594.075
|
| 元素分析 |
C, 52.50; H, 2.71; Cl, 5.96; F, 28.74; N, 4.71; O, 5.38
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| CAS号 |
2289690-31-7
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| 相关CAS号 |
2289690-31-7;
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| PubChem CID |
139600319
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
7.9
|
| tPSA |
47.3
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
12
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
40
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| 分子复杂度/Complexity |
813
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CN1C(=CC(=N1)C(F)(F)F)C2=C(C(=C(C=C2)OCC3=CC=C(C=C3)Cl)C4=CC(=CC(=C4)C(F)(F)F)C(F)(F)F)O
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| InChi Key |
CKLCWLSEYDDTCN-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H16ClF9N2O2/c1-38-19(11-21(37-38)26(34,35)36)18-6-7-20(40-12-13-2-4-17(27)5-3-13)22(23(18)39)14-8-15(24(28,29)30)10-16(9-14)25(31,32)33/h2-11,39H,12H2,1H3
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| 化学名 |
2-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]-3-[(4-chlorophenyl)methoxy]-6-[2-methyl-5-(trifluoromethyl)pyrazol-3-yl]phenol
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| 别名 |
NUCC-0196361; NUCC0196361; NUCC 0196361; MYC i361; MYCi361; MYC-i361
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~100 mg/mL (~168.1 mM)
Ethanol: ~14 mg/mL (~23.5 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6811 mL | 8.4053 mL | 16.8107 mL | |
| 5 mM | 0.3362 mL | 1.6811 mL | 3.3621 mL | |
| 10 mM | 0.1681 mL | 0.8405 mL | 1.6811 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
HIT211504993
Methylcarbamyl PAF C-8
Y-99
PROTAC MTP3 degrader-1
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