| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
MZ1 targets bromodomain and extra-terminal (BET) family protein BRD4 (bromodomain-containing protein 4, BD1 and BD2 domains) and von Hippel-Lindau (VHL) E3 ubiquitin ligase. Kd values: BRD4 BD1 (0.4 nM), BRD4 BD2 (0.8 nM). [1]
MZ1 binds to BRD4 BD1/BD2 and VHL, forming a ternary complex through cooperative recognition. [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
通过 3 单元 PEG 连接体,MZ 1 将 pan-BET 原型 JQ1 与 VH032(一种高度共振的 VHL 配体)结合 [2]。在 LS174t 细胞中,MZ 1(100 和 250 nM;24 小时)会导致 BRD4 降解。在不降低 BRD4 mRNA 表达的情况下,MZ 1 完全降解 BRD4 蛋白 [3]。
1. MZ1以浓度和时间依赖性方式选择性降解BRD4:MV4;11急性髓系白血病(AML)细胞用MZ1(0.1–100 nM)处理4小时后,Western blot检测显示BRD4降解(降解浓度50% DC50=1.8 nM,n=3次独立实验);10 nM MZ1处理4小时可实现BRD4最大程度降解,洗去药物后24小时内未观察到BRD4恢复。[1] 2. MZ1对BRD4具有高选择性(优于其他BET家族成员):MV4;11细胞中,10 nM MZ1处理4小时可降解>90%的BRD4,但对BRD2/3的影响极小(Western blot,n=3);溴结构域谱分析证实其不与非BET家族溴结构域显著结合。[1] 3. MZ1抑制MYC表达及下游信号通路:MV4;11细胞经10 nM MZ1处理4小时后,Western blot检测显示MYC蛋白水平降低~80%,qPCR检测(n=3次三重重复)显示MYC mRNA水平下调~70%;同时下调MYC靶基因(CCND2、CDK6、BCL2)的mRNA表达。[1] 4. MZ1抑制细胞增殖并诱导凋亡:MV4;11细胞经MZ1处理72小时后,CellTiter-Glo发光法检测显示抗增殖活性(半数抑制浓度IC50=3.2 nM,n=3次三重重复);10 nM MZ1处理24小时可激活caspase-3/7(较DMSO升高2.5倍,Caspase-Glo assay,n=3次三重重复),并诱导PARP切割(Western blot)。[1] 5. MZ1介导的BRD4降解依赖VHL和蛋白酶体:MV4;11细胞提前1小时用VHL抑制剂VH032(1 μM)或蛋白酶体抑制剂MG132(5 μM)预处理,可阻断10 nM MZ1(处理4小时)诱导的BRD4降解(Western blot,n=3);CRISPR/Cas9介导的VHL敲除可完全消除MZ1的BRD4降解活性。[1] 6. MZ1与BRD4、VHL形成稳定三元复合物:AlphaScreen实验显示MZ1促进BRD4-VHL相互作用(半数有效浓度EC50=0.3 nM,n=3次三重重复);等温滴定量热法(ITC)和表面等离子体共振(SPR)证实其与两个靶点均存在直接结合。[1] 7. 协同识别的结构基础:MZ1通过连接子区域桥接BRD4 BD2与VHL,诱导两种蛋白发生构象变化,从而增强结合亲和力;三元复合物结构揭示MZ1与BRD4/VHL之间存在关键疏水作用和氢键相互作用。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
1. MZ1在肿瘤异种移植模型中诱导BRD4降解并抑制MYC:携带MV4;11异种移植瘤的雌性Nu/Nu小鼠单次皮下注射MZ1(10 mg/kg),6小时后收集肿瘤组织,Western blot检测显示BRD4降解>80%,MYC下调~70%(每组5只小鼠)。[1]
2. MZ1具有剂量依赖性肿瘤生长抑制作用:MV4;11异种移植小鼠每日皮下注射MZ1(3 mg/kg、10 mg/kg)或溶媒,连续14天;10 mg/kg剂量组肿瘤生长抑制率达78%(平均肿瘤体积 vs 溶媒组,每组8只小鼠),且无显著体重下降。[1] |
| 酶活实验 |
1. BRD4溴结构域结合实验(SPR):将重组BRD4 BD1或BD2结构域固定于传感器芯片,系列稀释的MZ1流经芯片,记录结合响应信号以计算Kd值;实验设三重重复,以DMSO为阴性对照。[1]
2. 三元复合物形成实验(AlphaScreen):将重组BRD4 BD2与VHL-HIF1α复合物与系列稀释的MZ1混合,通过AlphaScreen信号放大检测BRD4-MZ1-VHL三元复合物的形成,基于三重重复测量结果计算EC50值。[1] 3. 等温滴定量热法(ITC):将MZ1滴定至含重组BRD4 BD1/BD2或VHL-HIF1α复合物的溶液中,测量结合相关的热量变化,以确定结合亲和力(Kd)和热力学参数(ΔH、ΔS);实验在25°C下进行两次重复。[1] 4. 溴结构域选择性谱分析:将MZ1与一组重组溴结构域(42个家族成员)共同孵育,通过荧光乙酰化赖氨酸肽竞争实验检测结合情况,计算选择性评分以证实其对BRD4 BD1/BD2的优先结合能力。[1] |
| 细胞实验 |
蛋白质印迹分析 [3]
细胞类型: LS174t 细胞 测试浓度: 0、100 和 250 nM 孵育时间:24小时 实验结果:BRD4蛋白完全降解,但BRD4 mRNA表达没有减少。 1. BRD4降解及MYC表达Western blot检测:MV4;11细胞用系列稀释的MZ1(0.1–100 nM)处理4小时(浓度依赖性)或10 nM MZ1处理0–24小时(时间依赖性),制备细胞裂解液后,通过Western blot检测BRD4、MYC及PARP切割情况,以GAPDH为内参。[1] 2. VHL/蛋白酶体依赖性验证实验:MV4;11细胞或VHL敲除MV4;11细胞提前1小时用VH032(1 μM)、MG132(5 μM)或溶媒预处理,再用10 nM MZ1处理4小时,通过Western blot检测BRD4水平,验证通路依赖性。[1] 3. 细胞增殖实验:MV4;11细胞以每孔5,000个细胞接种于96孔板,用系列稀释的MZ1(0.01–100 nM)处理72小时,采用CellTiter-Glo发光法检测细胞活力,基于三重重复孔数据计算IC50值(n=3次独立实验)。[1] 4. 凋亡实验:MV4;11细胞用10 nM MZ1或溶媒处理24小时,通过Caspase-Glo 3/7实验检测caspase-3/7活性,结果以相对于溶媒组的倍数变化表示(n=3次三重重复)。[1] 5. MYC靶基因qPCR分析:MV4;11细胞用10 nM MZ1或溶媒处理4小时,提取总RNA并逆转录为cDNA,采用特异性引物对MYC、CCND2、CDK6、BCL2进行qPCR定量(以GAPDH为内参,n=3次三重重复)。[1] |
| 动物实验 |
1. MV4;11异种移植模型(Nu/Nu小鼠):将5×10⁶个MV4;11细胞皮下植入6-8周龄的雌性Nu/Nu小鼠体内。当肿瘤体积达到100-150 mm³时,将小鼠随机分为治疗组(每组n=5-8)。MZ1以3 mg/kg、10 mg/kg的剂量皮下注射,或以溶剂对照,每日一次,连续14天。每2天测量一次肿瘤体积和体重。为进行药效学分析,小鼠单次接受10 mg/kg剂量,并在给药后6小时收集肿瘤组织进行Western blot分析。[1]
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. MZ1 在小鼠体内表现出良好的血浆暴露量:在 Nu/Nu 小鼠中单次皮下注射 MZ1 (10 mg/kg) 后,给药后 1 小时血浆峰浓度 (Cmax) 达到 1.2 μM,半衰期 (t1/2) 为 4.8 小时(每个时间点 n=3 只小鼠)。[1]
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. MZ1 在小鼠中表现出良好的耐受性:每日皮下注射 MZ1(剂量高达 10 mg/kg),持续 14 天,不会引起明显的体重减轻(>5%)或明显的器官毒性(对肝脏、肾脏和脾脏进行组织病理学分析,每组 n=8 只小鼠)。[1]
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
MZ1 是一种有机分子实体。
1. MZ1 是首个采用 PROTAC(蛋白水解靶向嵌合体)技术开发的选择性 BRD4 降解剂,由 BRD4 结合部分(JQ1 衍生物)、VHL 结合配体和聚乙二醇 (PEG) 连接子组成。[1] 2. MZ1、BRD4 和 VHL 之间的协同识别对其高选择性和效力至关重要:MZ1 诱导 VHL 发生“折叠”构象,从而为 BRD4 BD2 结构域创造互补的结合界面。[2] 3. MZ1 通过直接降解 BRD4 而非阻断其溴结构域,克服了 BRD4 抑制剂的局限性,从而实现更持久的 MYC 抑制和抗肿瘤活性。 [1] 4. BRD4 是转录延伸的关键调控因子,其过表达与血液系统恶性肿瘤(例如急性髓系白血病)和实体瘤相关,因此是一个已验证的治疗靶点。[1] |
| 分子式 |
C49H60CLN9O8S2
|
|---|---|
| 分子量 |
1002.63920783997
|
| 精确质量 |
1001.369
|
| 元素分析 |
C, 58.70; H, 6.03; Cl, 3.54; N, 12.57; O, 12.77; S, 6.40
|
| CAS号 |
1797406-69-9
|
| 相关CAS号 |
cis-MZ 1;1797406-72-4
|
| PubChem CID |
122201421
|
| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
|
| LogP |
5
|
| tPSA |
268
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
14
|
| 可旋转键数目(RBC) |
21
|
| 重原子数目 |
69
|
| 分子复杂度/Complexity |
1750
|
| 定义原子立体中心数目 |
4
|
| SMILES |
ClC1C=CC(=CC=1)C1C2C(C)=C(C)SC=2N2C(C)=NN=C2[C@H](CC(NCCOCCOCCOCC(N[C@H](C(N2C[C@@H](C[C@H]2C(NCC2C=CC(C3=C(C)N=CS3)=CC=2)=O)O)=O)C(C)(C)C)=O)=O)N=1
|
| InChi Key |
IHNPXDBPGMBPCY-BAVOTMDYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C49H60ClN9O7S2/c1-29-31(3)68-48-41(29)42(34-14-16-36(50)17-15-34)54-37(45-57-56-32(4)59(45)48)25-39(60)51-18-20-64-21-22-65-23-24-66-27-40(61)55-44(49(5,6)7)47(63)58-19-8-9-38(58)46(62)52-26-33-10-12-35(13-11-33)43-30(2)53-28-67-43/h10-17,28,37-38,44H,8-9,18-27H2,1-7H3,(H,51,60)(H,52,62)(H,55,61)/t37-,38-,44+/m0/s1
|
| 化学名 |
1-[2(S)-(2-{2-[2-(2-{2-[4-(4-Chloro-phenyl)-2,3,9-trimethyl-6H-1-thia-5,7,8,9a-tetraaza-cyclopenta[e]azulen-6(S)-yl]-acetylamino}-ethoxy)-ethoxy]-ethoxy}-acetylamino)-3,3-dimethyl-butyryl]-pyrrolidine-2(S)-carboxylic acid 4-(4-methyl-thiazol-5-yl)-benzylamide
|
| 别名 |
MZ1; MZ-1; MZ 1.
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~99.74 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.9974 mL | 4.9868 mL | 9.9737 mL | |
| 5 mM | 0.1995 mL | 0.9974 mL | 1.9947 mL | |
| 10 mM | 0.0997 mL | 0.4987 mL | 0.9974 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
![]() The crystal structure of the Brd4BD2:MZ1:VHL-ElonginC-ElonginB complex.Nat Chem Biol.2017 May;13(5):514-521. th> |
|---|
![]() Brd4BD2and VHL form a stable, cooperative complex in the presence of MZ1.
Schematic model of selective PROTAC-induced target degradation.Nat Chem Biol.2017 May;13(5):514-521. td> |
![]() The molecular basis of MZ1-induced compact complex formation between Brd4BD2and VHL.
Structure-guided design and characterization of Brd4-selective degrader AT1.Nat Chem Biol.2017 May;13(5):514-521. td> |