| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Acyl-coenzyme A: cholesterol O-acyltransferase 1 (ACAT1) [1].
EC₅₀: 9 nM (for human ACAT1) [1]. EC₅₀: 368 nM (for human ACAT2) [1]. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在基于细胞的荧光胆固醇酯化实验中，Nevanimibe 对人 ACAT1 的抑制具有强效和选择性，EC₅₀ 为 9 nM，而对人 ACAT2 的 EC₅₀ 为 368 nM，显示对 ACAT1 约 40 倍的选择性 [1]。
在人 H295R 肾上腺皮质癌细胞中，Nevanimibe (9 nM) 与外源性胆固醇 (45 μg/mL) 共同处理 5 小时后，细胞内游离胆固醇水平增加约 70%，胆固醇酯形成减少，与 ACAT1 抑制一致。游离胆固醇与胆固醇酯的比例从单独胆固醇处理的 1.4:1 变为 5:1。细胞内总胆固醇含量无变化 [1]。 在 H295R 细胞中，Nevanimibe (30 nM) 与胆固醇 (45 μg/mL) 共同处理 5-16 小时，诱导细胞凋亡，表现为 caspase-3/7 活性增加（约 3 倍）和 TUNEL 阳性细胞增加。在无外源性胆固醇的情况下，Nevanimibe 浓度高达 3 μM 时无毒性；仅 30 μM 浓度在 24 小时后降低约 40% 的细胞活力 [1]。 外源性胆固醇 (45-60 μg/mL) 的加入显著增强了 H295R 细胞对 Nevanimibe 的敏感性，3 nM ATR-101 与 60 μg/mL 胆固醇共同处理 24 小时后细胞活力降低约 60% [1]。 胆固醇转运抑制剂 U18666A (100 nM) 可阻止 Nevanimibe (30 nM) 诱导的 caspase-3/7 活化，表明胆固醇向内质网的转运是细胞毒性所必需的 [1]。 Nevanimibe 在 H295R 细胞中诱导未折叠蛋白反应。在处理 5 小时（30 nM ATR-101 + 45 μg/mL 胆固醇）后，观察到以下现象：XBP-1 mRNA 剪接、PERK 磷酸化（Western blot 上显示迁移变慢）以及 CHOP mRNA 表达增加（约 2.5 倍）[1]。 内质网钙释放抑制剂（Xestospongin C, 10 μM；2-APB, 100 μM）、线粒体钙摄取抑制剂（Ruthenium Red, 15 μM）和线粒体膜通透性抑制剂（Cyclosporin A, 10 μM）均能阻断 Nevanimibe 诱导的 H295R 细胞 caspase-3/7 活化 [1]。 Nevanimibe (30 nM + 胆固醇) 降低线粒体膜电位（TMRE 荧光较对照降低约 50%），该效应可被 Cyclosporin A 逆转 [1]。 通过 shRNA 敲低 HAC15 肾上腺皮质细胞中的 ACAT1 表达（ACAT1 表达降低 80%）可模拟 Nevanimibe 的效应：在外源性胆固醇 (60 μg/mL) 存在下，游离胆固醇增加（游离胆固醇:胆固醇酯比例约为 4:1，对照为 1:1），24 和 72 小时后细胞活力降低，caspase-3/7 活性增加（约 3-4 倍）。这些效应可被 U18666A、Ruthenium Red 和 Cyclosporin A 阻断 [1]。 当Nevanimibe盐酸盐（PD-132301 盐酸盐；ATR101 盐酸盐；3 nM-30 μM）和胆固醇一起耗尽时，脾脏的频率降低了 60%。结果表明，毒性以剂量依赖性方式增加，60 μg 时 Nevanimibe为 3 nM。 24 在存在胆固醇的情况下，所有剂量的 Nevanimibe (3 nM–30 μM) 都会引起细胞毒性，而在不存在 Nevanimibe 的情况下用胆固醇治疗对细胞活力没有影响。影响[1]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
犬研究（药效学和毒性）：三只雄性比格犬口服 Nevanimibe，每日一次，先以 3 mg/kg/天给药 7 天，随后以 30 mg/kg/天再给药 7 天。治疗 14 天后，肾上腺组织学检查显示皮质萎缩、空泡化、变性/坏死以及单核细胞浸润，主要影响束状带。每个代表性视野中约 60% 的皮质细胞 TUNEL 染色阳性，表明存在持续性凋亡。肾上腺髓质未见异常 [1]。
甾体激素合成抑制：在同一批犬中，与基线相比，ACTH 刺激的皮质醇水平在 3 mg/kg/天给药 7 天后降低 62%，在 30 mg/kg/天给药 14 天后降低 71%。ACTH 刺激的皮质酮、17-羟基孕酮、11-脱氧皮质醇和 11-脱氧皮质酮水平也显著降低。治疗 14 天后，ACTH 刺激前的肾上腺雄激素（雄烯二酮、DHEA-S）水平显著降低 [1]。 肾上腺胆固醇含量：治疗犬的肾上腺中胆固醇酯含量（191 μg/mg 蛋白）较未治疗犬（606 μg/mg 蛋白）显著降低，与 ACAT1 抑制一致。游离胆固醇水平无变化（37 vs. 38 μg/mg 蛋白）[1]。 |
| 酶活实验 |
ACAT1/ACAT2 荧光细胞实验：将缺乏内源性 ACAT 活性的中国仓鼠卵巢细胞（AC29）转染表达人 ACAT1 或 ACAT2 的构建体。测量荧光胆固醇类似物（22-[N-(7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑-4-基)氨基]-23,24-二去甲-5-胆烯-3-醇）的酯化程度。将细胞与递增浓度的 Nevanimibe 孵育，测定酯化程度以计算 EC₅₀ 值 [1]。
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| 细胞实验 |
细胞毒性实验 (MTT)：将 H295R 细胞接种于 96 孔板，在有或无外源性胆固醇（胆固醇-甲基-β-环糊精复合物）存在下用 Nevanimibe 处理 24 小时。加入 MTT（终浓度 0.5 mg/mL）孵育 2 小时。用 DMSO 提取甲臜染料，在 570 nm 处读取吸光度 [1]。
结晶紫染色：细胞处理同上，用 4% 多聚甲醛固定，用含 10% 乙醇的 0.4% 结晶紫染色，用 1% SDS 溶解后，在 570 nm 处读取吸光度 [1]。 Caspase-3/7 实验：细胞处理 5 小时后，使用基于发光的试剂盒测量 caspase-3/7 活性。加入检测试剂后，用发光检测仪测量发光值 [1]。 TUNEL 染色：细胞在腔室玻片上处理 16 小时，使用荧光 TUNEL 系统进行染色。细胞用 DAPI 复染，并采集图像 [1]。 线粒体膜电位测量：细胞处理 5 小时后，加入 TMRE（终浓度 2 μM）孵育 15 分钟。在酶标仪上测量活细胞的 TMRE 荧光 [1]。 游离和酯化胆固醇测量：细胞处理 5 小时后，用己烷/异丙醇（3:2）提取脂质，使用荧光测定法测量游离和总胆固醇。酯化胆固醇通过总胆固醇减去游离胆固醇计算 [1]。 定量 RT-PCR：提取 RNA，逆转录，使用 SYBR Green PCR 定量 CHOP mRNA 表达，并归一化至 GAPDH。使用跨剪接位点的引物通过 PCR 检测 XBP-1 剪接 [1]。 Western blotting：使用抗 PERK 抗体通过免疫印迹检测 PERK 磷酸化。活化的 PERK 通过迁移率上移来识别 [1]。 ACAT1 敲低：使用靶向 SOAT1（人 ACAT1）的慢病毒 shRNA 转导 HAC15 细胞。用嘌呤霉素筛选稳定敲低的细胞，并通过 qPCR 确认 ACAT1 表达（降低 80%）[1]。 细胞毒性测定 [1] 细胞类型： H295R 和 HAC 克隆 15 (HAC15) 人 ACC 细胞系 测试浓度： 3 nM-30 μM 孵育持续时间：24 小时 实验结果：3 nM-3 μM 无毒，而 30 μM 治疗可提高生存率，但生存率降低约24 小时内 40%。 |
| 动物实验 |
犬类毒理学和药效学研究：三只雄性比格犬（体重约 10-12 公斤）每日口服一次奈凡尼米贝，剂量为 3 毫克/公斤/天，持续 7 天，随后剂量增加至 30 毫克/公斤/天，再持续 7 天。该化合物配制于 0.5% 羟丙基甲基纤维素中，给药体积为 5 毫升/公斤。在第-3、1、3、7、8、10和14天，分别于ACTH刺激（5 μg/kg，静脉注射）前和刺激后1小时采集血样，用于血清皮质醇和类固醇分析。第14天，处死动物，并采集肾上腺组织进行组织学检查（H&E染色和TUNEL染色）以及游离胆固醇和酯化胆固醇分析[1]。
犬组织分布研究：三只雌性比格犬（约19月龄，7-10 kg）每日口服一次奈凡尼米贝，剂量为3 mg/kg/天，连续7天，溶于0.5%羟丙甲纤维素溶液（5 mL/kg）。最后一天，于给药后4小时采集血样，随后处死动物。收集组织（肾上腺、肾脏、肝脏、骨骼肌、皮下脂肪、卵巢和脑脊液）以通过 LC-MS/MS 测定 ATR-101 含量 [1]。 |
| 参考文献 |
| 分子式 |
C27H40CLN3O
|
|---|---|
| 分子量 |
458.079006195068
|
| 精确质量 |
457.286
|
| 元素分析 |
C, 70.79; H, 8.80; Cl, 7.74; N, 9.17; O, 3.49
|
| CAS号 |
133825-81-7
|
| 相关CAS号 |
Nevanimibe;133825-80-6
|
| PubChem CID |
131678
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 沸点 |
528.1ºC at 760 mmHg
|
| 闪点 |
273.2ºC
|
| 蒸汽压 |
3.05E-11mmHg at 25°C
|
| LogP |
7.712
|
| tPSA |
47.86
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
2
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
| 重原子数目 |
32
|
| 分子复杂度/Complexity |
543
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
Cl.O=C(NC1C(=CC=CC=1C(C)C)C(C)C)NCC1(C2C=CC(=CC=2)N(C)C)CCCC1
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| InChi Key |
SDOOGTHIDFZUNM-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C27H39N3O.ClH/c1-19(2)23-10-9-11-24(20(3)4)25(23)29-26(31)28-18-27(16-7-8-17-27)21-12-14-22(15-13-21)30(5)6;/h9-15,19-20H,7-8,16-18H2,1-6H3,(H2,28,29,31);1H
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| 化学名 |
1-[[1-[4-(dimethylamino)phenyl]cyclopentyl]methyl]-3-[2,6-di(propan-2-yl)phenyl]urea;hydrochloride
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| 别名 |
PD-132301 hydrochloride; N-(2,6-bis(1-methylethyl)phenyl)-N'-((1-(4-(dimethylamino)phenyl)cyclopentyl)methyl)urea hydrochloride; RefChem:165610; Nevanimibe hydrochloride; 133825-81-7; ATR-101 HCl; PD132301 hydrochloride; PD 132301 hydrochloride; ATR-101 hydrochloride;ATR 101 hydrochloride;ATR101 hydrochloride;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~41.67 mg/mL (~90.97 mM)
H2O : < 0.1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1830 mL | 10.9151 mL | 21.8302 mL | |
| 5 mM | 0.4366 mL | 2.1830 mL | 4.3660 mL | |
| 10 mM | 0.2183 mL | 1.0915 mL | 2.1830 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Bamirastine
戊双氟酚
PROTAC-PEG3-Amino
MT-3014
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
