| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MAP4K2 (IC50 = 21.7 nM); TAK1 (IC50 = 149 nM); LYN (IC50 = 12.9 nM); GSK (IC50 = 56.4 nM); ABL,ARG (IC50 = 75.2 nM); FER (IC50 = 82.3 nM); SRC (IC50 = 113 nM); Eph B2 (IC50 = 672 nM); ZAK (IC50 = 698 nM); Eph A2 (IC50 = 773 nM); Eph B4 (IC50 = 999 nM); ZC1/HGK (IC50 = 3250 nM); RAF1 (IC50 = 7590 nM)
NG25 is a potent dual TAK1 and MAP4K2 inhibitor, with IC50s of 149 nM and 21.7 nM, respectively. Additionally, NG25 effectively inhibits a number of kinases, including LYN, CSK, FER, p38α, ABL, ARG, and SRC, with respective IC50 values of 12.9, 56.4, 82.3, 102, 75.2, and 113 nM[1]. NG25 completely inhibits the secretion of IFNα and IFNβ when stimulated by CL097 or CpG B or A, respectively[2]. All tested breast cancer cell lines experience a dose-dependent reduction in cell viability after NG25 treatment. The cytotoxic effect of Dox on breast cancer cells is enhanced by NG25 (2 μM)[3]. NG-25 (also referred to as compound 1) is a type II kinase inhibitor. Its primary targets are Transforming Growth Factor β-Activated Kinase 1 (TAK1, MAP3K7) with an IC₅₀ of 149 nM and Mitogen-Activated Protein Kinase Kinase Kinase Kinase 2 (MAP4K2, GCK) with an IC₅₀ of 21.7 nM. It also inhibits p38α (MAPK14) and ABL kinase. Other kinases showing inhibition in profiling include ZAK, LYN, SRC, FER, FES, and EPH-family kinases. [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
NG25 是一种有效的 TAK1 和 MAP4K2 双重抑制剂，IC50 分别为 149 nM 和 21.7 nM。此外，NG25 还能有效抑制多种激酶，包括 LYN、CSK、FER、p38α、ABL、ARG 和 SRC，IC50 值分别为 12.9、56.4、82.3、102、75.2 和 113 nM[1]。当 CL097 或 CpGB 或 A 分别刺激时，NG25 完全抑制 IFNα 和 IFNβ 的分泌[2]。所有测试的乳腺癌细胞系在 NG25 处理后都会出现剂量依赖性细胞活力下降。 NG25 (2 μM) 增强了 Dox 对乳腺癌细胞的细胞毒作用[3]。
在小鼠 L929 细胞中，100 nM 的 NG-25 (1) 能有效降低 TNFα 诱导的 IKKα/β 磷酸化并抑制 IκB-α 降解，效果与不可逆 TAK1 抑制剂 37 (5Z-7-oxozeaenol) 相当。[1] 在 IL-1α 刺激的 293 IL-1R 细胞和小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）中，NG-25 (1) 以剂量依赖性方式抑制下游 p105、p38 和 JNK1/2 的磷酸化。[1] 在 LPS 刺激的小鼠 RAW 细胞中，NG-25 (1) 抑制 p105、p38 和 JNK1/2 的磷酸化。[1] 在 TLR7 激动剂 CL097 刺激的人 Gen2.2 细胞中，1 µM 的 NG-25 (1) 阻断了信号传导。[1] NG-25 (1) 对 BCR-ABL 依赖的 Ba/F3 细胞具有抗增殖活性。[1] |
| 酶活实验 |
IRF7 在大肠杆菌中作为与谷胱甘肽 S-转移酶 (GST) 的融合蛋白产生，后者被 PreScission 蛋白酶分解。通过 PreScission 蛋白酶消化，IRF7 从 GST 和谷胱甘肽-Sepharose 中释放出来，GST-IRF7 被谷胱甘肽-Sepharose 捕获。昆虫 Sf21 细胞表达 His6 标记形式的 IKKβ 和 TBK1，这些形式已被磷酸化而变得有活性，然后将这些纯化形式用于次氮基三乙酸镍-琼脂糖亲和层析。 Millipore 公司销售活性 GST-IKKα，然后进行测试。
NG-25 对多种激酶的抑制活性通过生化酶活实验测定。对于 TAK1 和 MAP4K2，IC₅₀ 值使用商业激酶谱分析服务（SelectScreen）测定。该实验测量化合物对激酶酶活性的抑制。[1] 此外，使用体外 ATP 位点竞争结合实验（KinomeScan）在 10 µM 或 1 µM 浓度下对超过 420 种激酶进行了全激酶组选择性谱分析。[1] |
| 细胞实验 |
在 96 孔板中，将 3.5×105 Gen 2.2 细胞或 Flt3-DC 在不加或加指定浓度抑制剂的情况下孵育 1 小时。然后用 1 M CpG（A 型或 B 型）、1 μg/mL CL097 或 1 μg/mL R848 刺激它们。 5 或 12 小时后收集细胞培养物上清液，通过离心澄清，并储存在 80°C 等待细胞因子水平分析。将未刺激的细胞在不存在或存在抑制剂的情况下孵育 12 小时，以进行细胞活力测定。细胞固定后，使用流式细胞术测定活细胞的百分比。
用于基于细胞的激酶抑制谱分析时，用 5 µM 和 0.5 µM 的 NG-25 处理 A375 黑色素瘤细胞，裂解后使用 KINativ 技术进行探针标记。该方法测量化合物在细胞裂解物中保护激酶免于被赖氨酸反应性 ATP 或 ADP-生物素探针标记的能力，表明其在细胞环境中的靶点结合。[1] 为评估对下游信号的抑制，L929 细胞用化合物（例如 100 nM）预处理 30 分钟，然后用 TNFα 刺激 5 分钟。裂解细胞后，通过 Western blot 分析 IKKα/β 的磷酸化和 IκB-α 的水平。[1] 类似地，293 IL-1R 细胞、MEFs 和 RAW 细胞用不同浓度的 NG-25 预处理 1 小时，然后用 IL-1α 或 LPS 刺激 30 分钟。通过 Western blot 分析 p105、p38 和 JNK1/2 的磷酸化。[1] Gen2.2 细胞用化合物（1 µM）预处理 1 小时，然后用 CL097 刺激 30 分钟，随后进行 Western blot 分析。[1] 在 Ba/F3 细胞（BCR-ABL 依赖型和亲本型）中评估抗增殖活性。细胞与系列稀释的化合物共培养 48 小时，使用发光细胞活力测定法测量细胞活力。[1] |
| 动物实验 |
Male Swiss albino mice
1 mg/kg i.v. or o.g. Pharmacokinetic studies were performed in male Swiss albino mice. For intravenous (IV) administration, NG-25 was formulated as a solution in 20% (v/v) hydroxypropyl β-cyclodextrin in 25 mM sodium phosphate buffer and administered via tail vein at a dose of 1 mg/kg. For oral (PO) administration, NG-25 was formulated as a suspension in 0.5% (w/v) sodium carboxymethyl cellulose (Na CMC) with 0.1% (v/v) Tween-80 in water and administered via oral gavage at a dose of 10 mg/kg. Blood samples were collected at various time points post-dose (e.g., 0.083, 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 6, 8, 12, 24 h). Plasma was separated and stored for bioanalysis by LC/MS/MS. [1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
In mice following a 1 mg/kg IV dose, NG-25 had a half-life (T₁/₂) of 2.03 h, a clearance (CL) of 80.8 mL min⁻¹ kg⁻¹, and a volume of distribution at steady state (Vₛₛ) of 11.9 L/kg.
Following a 10 mg/kg oral dose, the maximum plasma concentration (Cmax) was 316 ng/mL at 0.5 h (Tmax), and the area under the concentration-time curve (AUC) was 1369 h·ng/mL. The oral bioavailability (F) was 70.2%. [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
At the concentrations used in cellular assays (up to 400 nM for cytokine secretion, 2 μM for Western blot), NG-25 did not affect the viability of Gen2.2 cells, as determined in control experiments. [2]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
NG-25 was discovered using a pharmacophore model for type II inhibitors and kinome-wide profiling.
It binds to the DFG-out conformation of TAK1, as confirmed by a 2.4 Å cocrystal structure (PDB: 4O91). The binding involves hydrogen bonds with the hinge region (Ala107), the linker amide with Glu77 and Asp175 backbone, and the piperazinyl tail with carbonyls of Ile153 and His154 on the activation loop. It serves as a pharmacological probe for TAK1 due to its reversible inhibition mode and distinct off-target profile compared to the covalent inhibitor 5Z-7-oxozeaenol. Structural modifications led to analogs with improved selectivity for MAP4K2 (e.g., compound 17) or p38α (e.g., compound 11). [1] |
| 分子式 |
C29H30F3N5O2
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|---|---|
| 分子量 |
537.5760
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| 精确质量 |
537.235
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| 元素分析 |
C, 64.79; H, 5.63; F, 10.60; N, 13.03; O, 5.95
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| CAS号 |
1315355-93-1
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| 相关CAS号 |
NG25 trihydrochloride;2108554-00-1
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| PubChem CID |
53340664
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
6.332
|
| tPSA |
76.98
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
| 重原子数目 |
39
|
| 分子复杂度/Complexity |
808
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
FC(C1C([H])=C(C([H])=C([H])C=1C([H])([H])N1C([H])([H])C([H])([H])N(C([H])([H])C([H])([H])[H])C([H])([H])C1([H])[H])N([H])C(C1C([H])=C([H])C(C([H])([H])[H])=C(C=1[H])OC1C([H])=C([H])N=C2C=1C([H])=C([H])N2[H])=O)(F)F
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| InChi Key |
SMPGEBOIKULBCT-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C29H30F3N5O2/c1-3-36-12-14-37(15-13-36)18-21-6-7-22(17-24(21)29(30,31)32)35-28(38)20-5-4-19(2)26(16-20)39-25-9-11-34-27-23(25)8-10-33-27/h4-11,16-17H,3,12-15,18H2,1-2H3,(H,33,34)(H,35,38)
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| 化学名 |
N-[4-[(4-ethylpiperazin-1-yl)methyl]-3-(trifluoromethyl)phenyl]-4-methyl-3-(1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-4-yloxy)benzamide
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| 别名 |
NG25; NG-25; NG 25
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 16.7~25 mg/mL (31.0~46.1 mM)
Ethanol: ~3 mg/mL (~5.6 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.65 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (4.65 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.65 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8602 mL | 9.3009 mL | 18.6019 mL | |
| 5 mM | 0.3720 mL | 1.8602 mL | 3.7204 mL | |
| 10 mM | 0.1860 mL | 0.9301 mL | 1.8602 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
HPK1-IN-56
PF-07265028
HPK1-IN-55
HPK1-IN-54
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
