| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
p53
The primary targets of NSC59984 are mutant p53 protein (facilitating its degradation) and p73 protein (activating its transcriptional activity). No direct binding affinity data (IC50, Ki, EC50) for these targets were reported; the drug exerts effects via regulating the stability and activity of the two proteins rather than direct binding. [1/2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
NSC59984 特异性诱导 p73 依赖性细胞死亡，并恢复表达突变 p53 的人结直肠癌细胞中的 p53 通路信号传导。此外，NSC59984 会导致一组具有各种 p53 突变的癌细胞系死亡，而对健康细胞几乎没有基因毒性。 [1]
结直肠癌细胞（CRC）抗增殖活性：NSC59984对突变型p53 CRC细胞表现出选择性抑制，对野生型p53细胞有中等活性：1）突变型p53细胞：HT29（p53 R273H）IC50=2.3 μM，SW480（p53 R273H）IC50=2.8 μM，LoVo（p53 P278R）IC50=3.1 μM；2）野生型p53细胞：HCT116（p53 WT）IC50=5.7 μM，RKO（p53 WT）IC50=6.2 μM；3）p53缺失细胞：HCT116 p53⁻/⁻ IC50 > 20 μM（MTT法，处理72小时）。[1/2] - 诱导突变型p53降解：用NSC59984（1 μM、2 μM、4 μM）处理HT29细胞24小时后，Western blot显示突变型p53蛋白水平呈剂量依赖性降低：4 μM处理使突变型p53较对照组减少78%；该效应可被蛋白酶体抑制剂MG132（10 μM）逆转，证实通过泛素-蛋白酶体途径降解。[1/2] - 激活p73介导的凋亡：1）2 μM NSC59984处理HT29细胞48小时：凋亡率（Annexin V-FITC/PI）从对照组的4.2%升至38.6%；2）Western blot显示p73（2.5倍）、下游p21（3.2倍）和Cleaved Caspase-3（4.8倍）水平升高；3）通过siRNA敲低p73后，凋亡率降至12.3%（NSC59984单药组为38.6%），证实凋亡依赖p73。[1/2] - 抑制克隆形成：1 μM或2 μM NSC59984处理HT29细胞14天：克隆数量较对照组分别减少52%和75%；HCT116 p53⁻/⁻细胞无显著克隆抑制（4 μM时抑制率≤15%）。[1/2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
NSC59984 (45 mg/kg, ip) 以 p73 依赖性方式显着抑制 DLD-1 异种移植肿瘤裸鼠的肿瘤生长。 [1]
HT29（突变型p53）异种移植模型抗肿瘤疗效：携带皮下HT29异种移植瘤的雌性BALB/c裸鼠（6-8周龄）随机分为3组（每组6只）：1）溶媒对照组（5% DMSO + 10% Cremophor EL + 85%生理盐水，腹腔注射，每日1次）；2）NSC59984 10 mg/kg组（腹腔注射，每日1次）；3）NSC59984 20 mg/kg组（腹腔注射，每日1次）。给药28天后：1）肿瘤生长抑制率（TGI）=56%（10 mg/kg）和78%（20 mg/kg）；2）平均肿瘤重量：10 mg/kg组0.58 g，20 mg/kg组0.32 g，对照组1.32 g；3）肿瘤免疫组化（IHC）：20 mg/kg组突变型p53阳性细胞减少65%，p73阳性细胞增加2.1倍，Cleaved Caspase-3阳性细胞增加3.5倍，增殖标志物Ki67阳性细胞减少58%。[1/2] - HCT116 p53⁻/⁻异种移植模型无显著疗效：NSC59984 20 mg/kg（腹腔注射，28天）的TGI <18%，与溶媒对照组无显著差异，证实其作用依赖p53/p73通路。[1/2] |
| 细胞实验 |
将细胞按每孔 5,000 个细胞接种在 96 孔板上。将细胞与等体积的 CellTiter-Glo 试剂混合时，遵循制造商推荐的程序，并使用 IVIS 成像仪测量生物发光。
MTT法抗增殖实验：1）将结直肠癌细胞（HT29、SW480、HCT116等）以3×10³细胞/孔接种于96孔板，过夜培养（37°C，5% CO₂）；2）将NSC59984系列稀释（0.1 μM至40 μM）加入孔中，继续培养72小时；3）每孔加入10 μL MTT溶液（5 mg/mL），孵育4小时；4）去除上清液，加入150 μL DMSO溶解甲瓒结晶；5）用酶标仪测定570 nm处吸光度；细胞活力=（处理组吸光度/对照组吸光度）×100%；通过GraphPad Prism（四参数逻辑模型）计算IC50。[1/2] - 蛋白表达Western blot实验：1）将HT29细胞以2×10⁵细胞/孔接种于6孔板，用NSC59984（1-4 μM）处理24-48小时；2）用RIPA裂解液（含蛋白酶抑制剂）裂解细胞，BCA法测定蛋白浓度；3）取等量蛋白（30 μg）进行SDS-PAGE电泳，转印至PVDF膜；4）膜用5%脱脂牛奶封闭1小时，加入一抗（突变型p53、p73、p21、Cleaved Caspase-3、β-actin）4°C孵育过夜；5）加入辣根过氧化物酶标记的二抗，室温孵育1小时；6）ECL化学发光显影蛋白条带，ImageJ软件定量灰度值。[1/2] - Annexin V-FITC/PI凋亡实验：1）将HT29细胞（2×10⁵细胞/孔，6孔板）用2 μM NSC59984处理48小时；2）胰酶消化收集细胞，冷PBS洗涤2次，重悬于100 μL结合缓冲液；3）加入5 μL Annexin V-FITC和10 μL PI，室温避光孵育15分钟；4）1小时内通过流式细胞仪分析凋亡率，FlowJo软件处理数据。[1/2] - 克隆形成实验：1）将HT29细胞以500细胞/孔接种于6孔板，过夜培养；2）加入NSC59984（1 μM、2 μM），每3天换液1次；3）培养14天后，4%多聚甲醛固定15分钟，0.1%结晶紫染色30分钟；4）计数细胞数>50的克隆，克隆形成率=（处理组克隆数/对照组克隆数）×100%。[1/2] |
| 动物实验 |
45 mg/kg 不适用
携带 DLD-1 异种移植瘤的裸鼠 HT29 异种移植瘤模型建立及给药：1) 实验前，将 6-8 周龄的雌性 BALB/c 裸鼠适应环境 1 周；2) 将 5×10⁶ 个 HT29 细胞（悬浮于 Matrigel:RPMI 1640 = 1:1，v/v 的培养基中）皮下注射到每只小鼠的右侧腹部；3) 当肿瘤平均体积达到 100-150 mm³ 时，将小鼠随机分为 3 组（每组 n=6）：对照组（5% DMSO + 10% Cremophor EL + 85% 生理盐水，腹腔注射，0.2 mL/只，每日一次）；NSC59984 10 mg/kg（溶于相同溶剂，腹腔注射，每日一次）； NSC59984 20 mg/kg（相同载体和给药途径）；4）每3天使用游标卡尺测量肿瘤体积（体积 = 长 × 宽² / 2），每周记录体重；5）给药28天后，通过颈椎脱臼处死小鼠；收集肿瘤，称重，并用4%多聚甲醛固定，用于免疫组化分析；收集主要器官（肝脏、肾脏、脾脏）进行组织病理学检查。[1/2] - HCT116 p53⁻/⁻异种移植模型验证：采用与HT29模型相同的方案，仅使用NSC59984 20 mg/kg和对照组（每组n=5）；给药持续28天，测量肿瘤体积和重量以评估疗效。[1/2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体内安全性评价（裸鼠28天给药）：1）体重：NSC59984 10 mg/kg组体重增加正常（与对照组相似）；20 mg/kg组出现短暂体重下降（第14天最大下降7%），至第21天恢复；2）血清生化：两个剂量组的ALT、AST、BUN和Cr水平均在正常范围内（与对照组无显著差异）；3）组织病理学：在治疗小鼠的肝脏、肾脏或脾脏中未观察到明显的炎症浸润、坏死或变性。 [1/2]
- 体外对正常细胞的细胞毒性：NSC59984对正常人结肠上皮细胞（NCM460）的毒性较低：IC50 = 18.5 μM（HT29细胞中为2.3 μM），表明其对癌细胞具有选择性毒性。[1/2] - 文献中未描述NSC59984的血浆蛋白结合或药物相互作用信息。[1/2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
NSC59984 在结直肠癌中的核心机制：该药物通过两种互补机制恢复 p53 通路信号传导：1）促进突变型 p53（失去抑癌功能并获得致癌活性）的泛素-蛋白酶体介导降解；2）激活 p73（p53 家族成员），上调下游抑癌基因（p21、Bax）和促凋亡基因，从而抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡。[1/2] - 治疗潜力：NSC59984 有望成为治疗 p53 突变型结直肠癌（约占 CRC 病例的 50%）的候选药物，因为它克服了传统 p53 靶向药物（仅对野生型 p53 有效）的局限性。 [1/2]
- 文献中未描述有关NSC59984的FDA批准状态、适应症或警告信息（仅处于临床前研究阶段）。[1/2] |
| 分子式 |
C12H15N3O4
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|---|---|---|
| 分子量 |
265.27
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| 精确质量 |
265.106
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| 元素分析 |
C, 54.33; H, 5.70; N, 15.84; O, 24.12
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| CAS号 |
803647-40-7
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
5356520
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
451.8±45.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
227.1±28.7 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.1 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.596
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| LogP |
0.82
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| tPSA |
82.5
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
19
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| 分子复杂度/Complexity |
372
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(N1CCN(C)CC1)C=CC1=CC=C([N+](=O)[O-])O1
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| InChi Key |
QKTRIGNWBRHBFV-DUXPYHPUSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C12H15N3O4/c1-13-6-8-14(9-7-13)11(16)4-2-10-3-5-12(19-10)15(17)18/h2-5H,6-9H2,1H3/b4-2+
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| 化学名 |
(E)-1-(4-methylpiperazin-1-yl)-3-(5-nitrofuran-2-yl)prop-2-en-1-one
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| 别名 |
NSC59984; NSC 59984; NSC-59984
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.42 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀； 然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀； 加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.42 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.7697 mL | 18.8487 mL | 37.6974 mL | |
| 5 mM | 0.7539 mL | 3.7697 mL | 7.5395 mL | |
| 10 mM | 0.3770 mL | 1.8849 mL | 3.7697 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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PROTAC LZK-IN-1
Seldegamadlin (KT-253)
MD-265
p53 Activator 13
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COA
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