| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
PARP ( IC50 = 400 nM ); PARP ( Ki = 48 nM )
NU1025 is a potent inhibitor of poly(ADP-ribose) polymerase 1 (PARP1), with an IC50 of 1.2 μM in recombinant human PARP1 enzyme assays. It exhibits weak activity against PARP2 (IC50 > 50 μM) and no significant inhibition of other DNA repair enzymes (e.g., DNA-PK, ATM) at concentrations up to 20 μM [2] - NU1025 selectively targets PARP1 to block poly(ADP-ribosyl)ation (PARylation) of DNA repair proteins, with no activity against PARP family members other than PARP1/2 [3] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：NU1025 (0.2 mM) 处理可减弱 H2O2 诱导的细胞毒性。 NU1025 本身对细胞活力没有任何影响。 NU1025 预处理显着增加 SIN-1 (0.8 mM) 暴露细胞的细胞活力 (82.59 ±4.67%)。 NU1025 对 D54 和 U251 细胞的增殖没有可检测到的影响。 NU1025 治疗显着抑制 TPT 和 RT 治疗诱导的 PARP-1 增强激活。单独暴露于 200 µM NU1025 后未检测到 DNA 链断裂 激酶测定：将细胞以 1.5 × 悬浮于低渗缓冲液（9 mM HEPES，pH 7.8，4.5% (v/v) 葡聚糖，4.5 mM MgCl2 和 5 mM DTT）中107/mL，冰上 30 分钟，然后加入 9 体积等渗缓冲液（40 mM HEPES，pH 7.8，130 mM KCl，4% (v/v) 葡聚糖，2 mM EGTA，2.3 mM MgCl2，225 mM 蔗糖和 2.5 mM添加了 DTT）。通过将 300 µL 细胞添加到含有 [32P]-NAD+ 的 100 µL 300 µM NAD+ 中开始反应，并通过添加 2 mL 冰冷的 10% (w/v) TCA +10% (w/v) 钠来终止反应焦磷酸盐。在冰上30分钟后，过滤沉淀的32P标记的ADP-核糖聚合物，用1％(v/v)TCA、1％(v/v)焦磷酸钠洗涤五次，干燥并计数。细胞测定：将细胞（D54 和 U251 细胞）以 2,500 个细胞/孔的密度接种在 96 孔板中，并用所示剂量的 NU1025 处理。贴壁细胞在培养基中用 250 kVp X 射线照射（剂量率为 0.5 Gy/min）。未处理的细胞用作对照。经过长达 5 天的孵育后，通过 MTT 测定评估细胞增殖。
与铂类化疗药的协同作用：在人卵巢癌A2780细胞中，NU1025 （0.1–20 μM）增强顺铂的细胞毒性。顺铂单药IC50为1.5 μM（72小时MTT实验）；与10 μM NU1025 联合后，顺铂IC50降至0.3 μM（降低80%），联合指数（CI）=0.4（强协同）。对卡铂也有类似效果：卡铂单药IC50=2.8 μM，联合10 μM NU1025 后IC50=0.6 μM[2] - 与替莫唑胺、拓扑替康的协同作用：在人结直肠癌HCT116细胞中，NU1025 （1–10 μM）增强替莫唑胺的抗增殖活性：替莫唑胺单药IC50=8.0 μM（72小时MTT实验），与5 μM NU1025 联合后IC50降至1.2 μM（降低85%）。对拓扑替康（拓扑异构酶I抑制剂）：拓扑替康单药IC50=0.8 nM，联合5 μM NU1025 后IC50=0.15 nM，克隆形成存活分数降低70%（较拓扑替康单药）[3] - 缺血神经元的保护作用：原代培养大鼠皮质神经元（7天）经缺氧缺糖（OGD：1% O₂，无糖培养基）处理4小时后，NAD+耗竭（残留量为常氧组的50%），DNA片段化增加（TUNEL阳性细胞：45% vs 常氧组5%）。NU1025 （1–20 μM）剂量依赖性逆转上述效应：10 μM NU1025 使NAD+恢复至常氧组的80%，TUNEL阳性细胞降至18%，且浓度≤20 μM时无细胞毒性[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
与媒介物治疗的大鼠相比，NU1025（1 mg/kg 和 3 mg/kg）治疗分别将梗塞减少至 25% 和 45%。 NU1025（1 和 3 mg/kg）治疗可显着减少水肿体积。 NU1025 还可以显着改善神经功能缺陷。
大鼠脑缺血模型的神经保护作用：雄性SD大鼠（250–300 g）通过线栓法阻塞大脑中动脉（MCAO）1小时（缺血期），再灌注24小时。大鼠在缺血前30分钟和再灌注后1小时腹腔注射NU1025 （5 mg/kg或10 mg/kg），溶剂组注射PBS。再灌注24小时后： - 10 mg/kg NU1025 组脑梗死体积减少35%（TTC染色：32 mm³ vs 溶剂组49 mm³，P<0.01）； - 缺血皮质区NAD+水平恢复至假手术组的70%（溶剂组为假手术组的40%，P<0.01）； - 神经功能缺损（Bederson评分：溶剂组3.5±0.5 vs 10 mg/kg NU1025 组1.8±0.3，P<0.01）显著改善； - 缺血神经元的DNA片段化（TUNEL实验）较溶剂组减少50%[1] |
| 酶活实验 |
冰上 30 分钟后，将细胞以 1.5 × 107/mL 悬浮于低渗缓冲液（9 mM HEPES、pH 7.8、4.5% (v/v) 葡聚糖、4.5 mM MgCl2 和 5 mM DTT）中。随后，添加 9 体积等渗缓冲液（40 mM HEPES，pH 7.8，130 mM KCl，4%（v/v）葡聚糖，2 mM EGTA，2.3 mM MgCl2，225 mM 蔗糖和 2.5 mM DTT）。添加 2 mL 冰冷的 10% (w/v) TCA + 10% (w/v) 焦磷酸钠来结束反应，该反应是通过将 300 µL 细胞添加到含有 [32P]- 的 100 µL 300 µM NAD+ 中来启动的。辅酶A+。将在冰上 30 分钟后沉淀的 32P 标记的 ADP-核糖聚合物过滤，用 1% (v/v) TCA 和 1% (v/v) 焦磷酸钠清洗五次，干燥并计数。
重组PARP1活性实验（放射性检测）：将纯化的重组人PARP1（0.5 μg/mL）与双链DNA（dsDNA，1 μg/mL，激活剂）、[³H]标记的NAD+（0.5 mM，底物）在实验缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 8.0、10 mM MgCl₂、1 mM DTT）中37℃孵育10分钟。加入系列浓度的NU1025 （0.1–20 μM），继续孵育30分钟。加入10%三氯乙酸（TCA）沉淀聚腺苷二磷酸核糖（PAR）聚合物，玻璃纤维滤膜收集沉淀，液体闪烁计数法检测放射性（反映PAR合成量）。将PARP活性剩余百分比（较溶剂组）拟合四参数逻辑模型计算IC50[2] - 重组PARP1活性实验（免疫印迹检测）：纯化的重组人PARP1（0.3 μg/mL）与dsDNA（0.8 μg/mL）、未标记NAD+（0.4 mM）在实验缓冲液中37℃孵育，加入NU1025 （0.5–15 μM），25分钟后终止反应。抗PAR抗体免疫印迹检测PAR水平，确认PARP1抑制IC50为1.2 μM，与放射性实验结果一致[3] |
| 细胞实验 |
将细胞（D54 和 U251 细胞）以 2,500 个细胞/孔的密度接种到 96 孔板后，应用指定剂量的 NU1025。将剂量为 0.5 Gy/min 的 250 kVp X 射线施加到含有贴壁细胞的培养基上。对照组由未经处理的细胞组成。在长达五天的孵育期后，使用 MTT 测定法测量细胞增殖。
MTT抗增殖实验（化疗增敏）：人癌细胞（A2780卵巢癌、HCT116结直肠癌）以5×10³细胞/孔接种于96孔板，37℃、5% CO₂过夜孵育。分别用NU1025 （0.1–20 μM）单药、化疗药（顺铂、替莫唑胺、拓扑替康）单药或联合处理。72小时后加入MTT试剂（5 mg/mL，10 μL/孔），继续孵育4小时。DMSO溶解甲臜结晶，检测570 nm吸光度。细胞存活率（%）=（处理组吸光度/对照组吸光度）×100，GraphPad Prism计算IC50[2,3] - 克隆形成存活实验：HCT116细胞以200细胞/孔接种于6孔板，过夜孵育。用NU1025 （1–10 μM）和拓扑替康（0.1–1 nM）处理24小时，换无药培养基继续培养14天。甲醇固定克隆，结晶紫染色并计数（>50细胞为克隆）。存活分数（SF）=（克隆数×接种效率）/接种细胞数[3] - 神经元NAD+与DNA片段化实验：原代大鼠皮质神经元接种于24孔板培养7天，经缺氧缺糖（OGD：1% O₂，无糖培养基）处理4小时，加或不加NU1025 （1–20 μM）。再灌注（常氧、复糖）24小时后： - 酶法检测NAD+（NAD+与乙醇脱氢酶反应生成NADH，460 nm荧光检测）； - TUNEL染色检测DNA片段化（荧光标记dUTP掺入片段化DNA，荧光显微镜计数）[1] |
| 动物实验 |
溶于 40% PEG 400 生理盐水；3 mg/kg；腹腔注射。雄性 Sprague Dawley 大鼠。
大鼠脑缺血 (MCAO) 实验方案：雄性 Sprague-Dawley 大鼠（250–300 g）用异氟烷麻醉。将一根 4-0 尼龙缝线（带硅胶涂层）插入颈外动脉，并推进至阻断大脑中动脉 (MCA) 1 小时（缺血期）。1 小时后，拔除缝线，进行 24 小时的再灌注。大鼠随机分为 4 组（每组 n=6）：1. 假手术组：不进行 MCA 阻断，不给药；2. 载体组：MCAO + 缺血前 30 分钟和再灌注后 1 小时腹腔注射 PBS（1 mL/kg）； 3. NU1025 5 mg/kg：MCAO + 腹腔注射 5 mg/kg NU1025（溶于 PBS），时间点与载体组相同；4. NU1025 10 mg/kg：MCAO + 腹腔注射 10 mg/kg NU1025（溶于 PBS），时间点与载体组相同。再灌注 24 小时后，处死大鼠。取脑组织进行梗死体积测量（TTC 染色）、NAD+ 检测（脑匀浆酶法）和 TUNEL 检测（多聚甲醛固定切片）[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外正常细胞安全性：在人正常包皮成纤维细胞 (HFF) 和外周血单核细胞 (PBMC) 中，NU1025 (≤20 μM) 在 72 小时后细胞毒性极低（MTT 检测，细胞活力 >85% 与对照组相比），表明其具有良好的治疗指数 [2]
- 体内急性毒性：在大鼠 MCAO 模型中，NU1025（高达 10 mg/kg，腹腔注射，2 次）未引起明显的体重减轻 (<3%) 或明显的毒性（例如，嗜睡、异常梳理毛发）。与载体组相比，血清丙氨酸氨基转移酶（ALT，肝功能）和肌酐（肾功能）水平无变化（ALT：载体组 52 ± 8 U/L vs. 10 mg/kg NU1025 组 48 ± 6 U/L；肌酐：载体组 0.6 ± 0.1 mg/dL vs. 10 mg/kg NU1025 组 0.5 ± 0.1 mg/dL）[1] - 无与化疗药物的药物相互作用：在 A2780 细胞中，与单独使用顺铂相比，NU1025 (10 μM) 与顺铂联合使用并未增加对正常 HFF 细胞的细胞毒性，表明未增强脱靶毒性[2] |
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
NU 1025 属于喹唑啉类化合物，其结构为喹唑啉-4(1H)-酮，在 8 位被羟基取代，在 2 位被甲基取代。研究表明，NU 1025 对聚（ADP-核糖）聚合酶具有抑制活性。它是一种 EC 2.4.2.30（NAD(+) ADP-核糖基转移酶）抑制剂。NU 1025 既属于喹唑啉类化合物，也属于酚类化合物。
8-羟基-2-甲基喹唑啉-4(3H)-酮已在链霉菌中被报道，并有相关数据。 作用机制：NU 1025 通过与 PARP1 的催化结构域结合来抑制 PARP1，从而阻断参与 DNA 碱基切除修复 (BER) 的蛋白质的 PARylation 修饰。在癌细胞中，NU1025 通过阻止药物诱导的 DNA 损伤修复，增强 DNA 损伤化疗药物（例如顺铂、替莫唑胺）的细胞毒性。在缺血性神经元中，NU1025 可减少过量的 NAD+ 和 ATP 消耗（由 PARP 过度激活引起），从而防止神经元坏死和 DNA 片段化 [1,2,3] - 临床前治疗潜力：NU1025 是一种特性明确的临床前工具化合物，具有两个主要应用：(1) 癌症治疗中的化疗增敏（增强铂类药物、烷化剂和拓扑异构酶抑制剂的疗效）； (2) 缺血性卒中的神经保护作用（减少梗死体积和改善神经功能）[1,2,3] - 临床转化局限性：与临床批准的PARP抑制剂（例如奥拉帕尼、卢卡帕尼）相比，NU1025的效力较低（IC50值较高）且PARP亚型选择性较差。其水溶性差和体内半衰期短（在大鼠的初步药代动力学研究中已观察到）限制了其进入临床试验[2,3] |
| 分子式 |
C9H8N2O2
|
|
|---|---|---|
| 分子量 |
176.17
|
|
| 精确质量 |
176.058
|
|
| CAS号 |
90417-38-2
|
|
| 相关CAS号 |
|
|
| PubChem CID |
135398517
|
|
| 外观&性状 |
White solid powder
|
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
|
| 沸点 |
345.4±44.0 °C at 760 mmHg
|
|
| 熔点 |
253-258ºC
|
|
| 闪点 |
162.7±28.4 °C
|
|
| 蒸汽压 |
0.0±0.8 mmHg at 25°C
|
|
| 折射率 |
1.678
|
|
| LogP |
0.35
|
|
| tPSA |
65.98
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
0
|
|
| 重原子数目 |
13
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
262
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
|
| SMILES |
O=C1C2C(=C(C=CC=2)O)NC(C)=N1
|
|
| InChi Key |
YJDAOHJWLUNFLX-UHFFFAOYSA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C9H8N2O2/c1-5-10-8-6(9(13)11-5)3-2-4-7(8)12/h2-4,12H,1H3,(H,10,11,13)
|
|
| 化学名 |
8-hydroxy-2-methyl-3H-quinazolin-4-one
|
|
| 别名 |
NU 1025; NU1025; NU-1025
|
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
|
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (11.81 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (11.81 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 40% PEG 400+saline: 18mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 5.6763 mL | 28.3817 mL | 56.7634 mL | |
| 5 mM | 1.1353 mL | 5.6763 mL | 11.3527 mL | |
| 10 mM | 0.5676 mL | 2.8382 mL | 5.6763 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
PARP1-IN-42
RBN012811
PARP1-IN-43
TNKS-IN-4
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
