| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
SIRT6 (IC50 = 89 μM); SIRT2 (IC50 = 751 μM); SIRT1 (IC50 = 1578 μM); HBV
OSS_128167 targets SIRT6 [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
OSS_128167（化合物 9；100 μM；0-24 小时；BxPC3 细胞）处理会提高 H3K9 的乙酰化。并且还导致 BxPC-3 细胞表达更多的 GLUT-1 [1]。 OSS_128167（化合物 9）可有效抑制培养的 BxPC-3 细胞中苯酚肉豆蔻酸酯乙酸酯 (PMA) 诱导的 TNF-α 分泌。 OSS_128167 增强细胞对葡萄糖的摄取[1]。用 100 μM OSS_128167 处理 HepG2.2.15 和 HepG2-NTCP 细胞 96 小时，显示 HBV 核心 DNA 和 3.5-Kb RNA 水平显着降低。此外，OSS_128167 处理减少了细胞裂解物中 HBsAg 的表达以及乙型肝炎表面抗原 HBsAg 和 HBeAg 的分泌 [2]。 OSS_128167 (200 μM) 对马法兰耐药 (LR-5) 和阿霉素耐药 (Dox40) 的 MM 细胞系以及原发性多发性骨髓瘤 (MM) 细胞 (NCI-H929) 进行化学增敏[3]。
1. 在HepG2.2.15和HBV感染的HepG2-NTCP细胞中，梯度浓度的OSS_128167处理可浓度依赖性地显著降低HBV核心DNA水平（实时荧光定量PCR和Southern blotting检测）和3.5-Kb HBV RNA水平（实时荧光定量PCR）；HBsAg和HBeAg的分泌水平（ELISA）及细胞内HBsAg表达（Western blot）也显著下降（P < 0.05）[2] 2. MTS实验显示，OSS_128167在测试浓度下对HepG2.2.15和HepG2-NTCP细胞无显著细胞毒性（处理3天）[2] 3. 在过表达SIRT6的HepG2.2.15和HBV感染的HepG2-NTCP细胞中，OSS_128167可阻断SIRT6对HBV转录/复制的促进作用；SIRT6介导的PPARα上调被OSS_128167逆转（实时荧光定量PCR和Western blot），且沉默PPARα可模拟OSS_128167的抗HBV效应[2] 4. 在多发性骨髓瘤（MM）细胞系（MM.1S、NCI-H929）中，OSS_128167（200 μM）可增强MM细胞对DNA损伤药物（阿霉素10-100 nM、美法仑0.3-3 μM）的敏感性；生存曲线显示，OSS_128167联合阿霉素/美法仑可显著降低细胞活力（P < 0.001）[3] 5. OSS_128167预处理（200 μM）可抑制MM细胞中DNA损伤（阿霉素1 μM、美法仑100 μM）后SIRT6向Alu序列的募集（ChIP实验，P < 0.01），并增加DNA损伤位点的H3K56乙酰化水平，损伤NHEJ/HR DNA修复机制[3] 6. MM细胞经OSS_128167处理后，MEK/ERK信号通路过度激活（通过H3K9乙酰化和ELK1介导的活性），RSK2介导的Chk1磷酸化（Ser280）被阻断，ATR/CHK1 DNA损伤检查点功能受损[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
OSS_128167（50 mg/kg；腹腔注射；每4天一次；持续12天；雄性HBV转基因小鼠）治疗显着抑制了HBV转基因小鼠的HBV DNA和3.5-Kb RNA水平[2]。
1. 在HBV转基因小鼠模型中（每组n=8），OSS_128167以50 mg/kg的剂量每4天腹腔注射一次，持续12天；血清ALT水平（比色微孔板法）无显著升高，提示无明显肝毒性；血清HBsAg、HBeAg（ELISA）和HBV DNA（实时荧光定量PCR）水平显著降低，肝内HBV DNA、总HBV RNA及3.5-Kb RNA（实时荧光定量PCR）也显著下降（P < 0.05）；肝组织中HBcAg表达（免疫组化）下调[2] 2. 在NCI-H929多发性骨髓瘤异种移植模型（CB17-SCID小鼠）中，OSS_128167（无具体剂量报道）联合阿霉素治疗可显著降低肿瘤体积（与溶媒+阿霉素组相比P = 0.011），延长小鼠中位生存期，并增加肿瘤组织中γH2AX灶（DNA损伤标志物）的形成（免疫组化/免疫荧光）；沉默SIRT6联合阿霉素也呈现类似效应，且RAD51灶（DNA修复标志物）形成减少[3] |
| 酶活实验 |
体外检测和IC50测定[1]
按照制造商的说明，使用SIRT6、SIRT1和SIRT2的商业试剂盒将鉴定的分子测试为sirtuin抑制剂。使用相同的商业试剂盒测定法测定IC50值。将所有化合物以50mM浓度溶解在DMSO中。用于测定IC50的化合物浓度范围为8μM至5 mM。IC50是根据GraphPad Prism中的对数非线性回归曲线测定的。对每种化合物进行三次独立的IC50测量 流式细胞仪GLUT-1检测[1] 为了用流式细胞术检测细胞表面的GLUT-1表达，将粘附细胞用胰蛋白酶消化并在冷PBS中洗涤。随后将5×105个细胞在−20°C的100%甲醇中固定10分钟。此后，将细胞在冷PBS中洗涤，重悬于100μL冷培养基中，并在4°C下与或不与2.5μL抗GLUT-1抗体一起孵育30分钟。随后，将细胞在冷PBS中洗涤，并在100μL冷培养基中与10μL抗小鼠IgG2a（Alessandro Poggi博士，IRCCS AOU San Martino IST，意大利热那亚国家癌症研究所的实物礼物）在4°C下孵育30分钟。最后，用冷PBS洗涤细胞两次，并使用FACS Calibur（Becton Dickinson）通过采集10000个事件/样品进行分析 TNF-αELISA[1] 将BxPC-3细胞（3×105个细胞/孔）接种在6孔板中，并使其粘附24小时。然后，将细胞与SIRT6抑制剂（100μM）或载体孵育过夜。此后，为了诱导细胞因子分泌，用25ng/mL的PMA刺激细胞24小时。最后，收集上清液并使用市售的DuoSet ELISA试剂盒测定TNF-α浓度） [14C]-2-脱氧-d-葡萄糖在BxPC-3和L6细胞中的葡萄糖摄取测定[1] 将BxPC-3、pRETROSUPER（pRS）和SIRT6沉默（SIRT6-sh210）BxPC-3和L6细胞（6×105/孔）接种在12孔板中，在完全培养基中用或不用不同化合物（200μM，终浓度）一式三份处理18小时。然后用1mL PBS缓冲液洗涤细胞两次，并通过在37°C下将0.5mM d-葡萄糖/[14C]-2-脱氧-d-葡萄糖（0.5μCi/孔）加入0.4mL KRH缓冲液（129mM NaCl、5mM NaHCO3、4.8mM KCl、1.2mM KH2PO4、1mM CaCl2、1.2m M MgSO4、10mM HEPES、0.5%牛血清白蛋白）中5分钟来测量葡萄糖转运。通过立即去除标记混合物并用冰冷的PBS洗涤细胞三次来停止葡萄糖摄取。然后用0.1%十二烷基硫酸钠（SDS）裂解细胞，并在Beta Counter LS 6500中使用每种裂解物进行闪烁计数。从每个实验值中减去在存在20μM细胞松弛素B和200μM根皮素的情况下的非特异性摄取。 1. 无OSS_128167直接作用于SIRT6的酶活性实验报道；通过检测下游生物学指标（如H3K9乙酰化、PPARα表达、HBV复制）评估其对SIRT6的抑制作用[2] 2. 在MM细胞中，采用ChIP实验检测OSS_128167处理后SIRT6与Alu序列及基因启动子的结合：细胞经甲醛交联、裂解后，染色质被剪切成片段；使用SIRT6特异性抗体进行免疫沉淀，通过实时荧光定量PCR检测靶序列的富集程度（IgG作为阴性对照）[3] 3. DNA损伤位点H3K56乙酰化实验：经OSS_128167和DNA损伤药物处理的MM细胞，用抗乙酰化H3K56抗体进行ChIP；通过实时荧光定量PCR定量DNA损伤位点乙酰化H3K56的富集水平（IgG作为对照）[3] |
| 细胞实验 |
蛋白质印迹分析[1]
细胞类型： BxPC3 细胞 测试浓度： 100 µM 孵育时间： 0 hrs（小时）、2 hrs（小时）、6 hrs（小时）、18 hrs（小时）、24 hrs（小时） 实验结果： H3K9 乙酰化增加。 RT-PCR[2] 细胞类型： HepG2.2.15 和 HepG2-牛磺胆酸钠共转运多肽 (NTCP) 细胞 测试浓度： 100 µM 孵育持续时间： 96 小时 实验结果： HBV 核心 DNA 和 3.5-Kb RNA 水平显着降低。 1. HepG2.2.15/HepG2-NTCP细胞抗HBV活性实验：将细胞接种于96/6孔板，给予梯度浓度的OSS_128167处理；3-4天后收集细胞上清液，采用ELISA检测HBsAg/HBeAg，收集细胞提取基因组DNA和总RNA，通过实时荧光定量PCR/Southern blotting检测HBV DNA，Western blot检测细胞内HBsAg（GAPDH作为内参）[2] 2. 细胞毒性实验（MTS）：将HepG2.2.15和HepG2-NTCP细胞接种于96孔板，给予系列浓度的OSS_128167处理3天；加入MTS试剂，在490 nm波长下检测吸光度值，计算细胞活力[2] 3. SIRT6过表达/沉默联合OSS_128167处理实验：将Flag-SIRT6质粒或SIRT6 shRNA（shSIRT6-1/2）+阴性对照转染至HepG2.2.15/HepG2-NTCP细胞；转染1天后加入OSS_128167；3-4天后裂解细胞，进行Western blot（检测SIRT6、PPARα、GAPDH）和实时荧光定量PCR（检测HBV RNA、PPARα mRNA）[2] 4. MM细胞生存实验：将NCI-H929细胞接种于96孔板，给予OSS_128167（200 μM）联合梯度浓度的阿霉素/美法仑处理48小时；采用比色法检测细胞活力，绘制生存曲线（三次重复实验，P < 0.001）[3] 5. SIRT6/ELK1结合ChIP实验：经OSS_128167处理的MM.1S细胞经交联、裂解后，用SIRT6/ELK1/AcH3K9抗体进行染色质免疫沉淀；通过实时荧光定量PCR定量这些蛋白与MAPK通路基因启动子的结合水平（IgG作为对照，GAPDH作为阴性参照）[3] 6. DNA修复实验（NHEJ/HR）：将NHEJ/HR报告质粒和DsRed质粒共转染至MM.1S细胞（SIRT6-WT/SIRT6-KD）；加入OSS_128167，72小时后通过流式细胞术计数GFP+/DsRed+细胞，评估修复效率（P < 0.03）[3] |
| 动物实验 |
Animal/Disease Models: Male HBV transgenic mice (6-8weeks old)[2]
Doses: 50 mg/kg Route of Administration: intraperitoneal (ip)injection; every 4 days; for 12 days Experimental Results: The level of HBV DNA and 3.5-Kb RNA were markedly suppressed in HBV transgenic mice. 1. HBV transgenic mouse model: HBV transgenic mice (n=8 per group) were randomly divided into vehicle, OSS_128167 (50 mg/kg), and ETV (0.02 mg/kg) groups; OSS_128167 was administered intraperitoneally every 4 days for 12 days, ETV was given by oral gavage every 4 days; serum was collected via tail vein at indicated time points for HBsAg/HBeAg/ALT/HBV DNA detection; mice were euthanized on day 12, liver tissues were collected for intrahepatic HBV DNA/RNA detection (real-time PCR) and HBcAg immunohistochemistry [2] 2. MM xenograft model: CB17-SCID mice were subcutaneously injected with GFP-expressing NCI-H929 scramble/SIRT6-KD cells; when tumors formed, mice were treated with vehicle + doxorubicin or OSS_128167 (no specific dose/route/frequency reported) + doxorubicin; whole-body imaging was performed to monitor tumor growth, tumor volume was measured by caliper (mean ± SD, P = 0.011); mice were euthanized, tumor tissues were collected for Western blot (SIRT6, γH2AX) and immunohistochemistry (γH2AX, RAD51) [3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外实验：在测试浓度下，OSS_128167对HepG2.2.15和HepG2-NTCP细胞未显示出明显的细胞毒性（MTS法，处理3天）[2]
2. 体内实验：在HBV转基因小鼠中，OSS_128167（50 mg/kg，每4天腹腔注射一次，持续12天）未升高血清ALT水平（肝毒性标志物），表明无明显的急性肝毒性[2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. OSS_128167 是一种具有抗 HBV 活性的选择性 SIRT6 抑制剂，它通过抑制 SIRT6 介导的 PPARα 上调和 HBV 核心启动子的激活来限制 HBV 的转录和复制 [2]
2. OSS_128167 通过抑制 SIRT6 依赖的 DNA 损伤反应，使多发性骨髓瘤细胞对 DNA 损伤剂（阿霉素、美法仑）更加敏感：SIRT6 的缺失/抑制会损害 MAPK/ERK/RSK2/Chk1 信号通路，阻断 DNA 修复（NHEJ/HR），并增强基因毒性应激诱导的细胞死亡 [3] 3. SIRT6 通过在 MAPK 通路基因启动子处对 H3K9 进行去乙酰化、下调 MAPK 信号通路和促进 DNA 修复，在维持 MM 细胞的基因组稳定性方面发挥着关键作用； OSS_128167可抑制此功能，导致MM细胞过度增殖和DNA损伤敏感性[3] 4. OSS_128167是一种潜在的HBV抗病毒药物，也是多发性骨髓瘤化疗的增敏剂[2,3] |
| 分子式 |
C19H14N2O6
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|---|---|---|
| 分子量 |
366.32
|
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| 精确质量 |
366.09
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| 元素分析 |
C, 62.30; H, 3.85; N, 7.65; O, 26.20
|
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| CAS号 |
887686-02-4
|
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
6496840
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid
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| LogP |
2.7
|
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| tPSA |
129Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
|
| 重原子数目 |
27
|
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| 分子复杂度/Complexity |
568
|
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
HTJWLEGCECXGSQ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H14N2O6/c22-15-7-6-13(10-14(15)19(25)26)20-17(23)11-3-1-4-12(9-11)21-18(24)16-5-2-8-27-16/h1-10,22H,(H,20,23)(H,21,24)(H,25,26)
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| 化学名 |
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.68 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.68 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7299 mL | 13.6493 mL | 27.2985 mL | |
| 5 mM | 0.5460 mL | 2.7299 mL | 5.4597 mL | |
| 10 mM | 0.2730 mL | 1.3649 mL | 2.7299 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
J Med Chem.2014 Jun 12;57(11):4796-804. |
|---|
SIRT6 depletion/inhibition sensitizes MM cells to genotoxic agents.Blood. 2016 Mar 3; 127(9): 1138–1150. |
SIRT6 plays multiple roles in the DDR of MM cells.Blood. 2016 Mar 3; 127(9): 1138–1150. |
SIRT1 activator 1
SIRT5 inhibitor 8
SIRT5 inhibitor 9
CypE-IN-1
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