| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
p38 MAPK (IC50 = 89 nM); TGF-β; Activin A; Enterovirus71
p38 mitogen-activated protein kinase (p38 MAPK); [1] - p38 MAPK; no specific IC50, Ki, or EC50 values provided in the literature [2] - p38 mitogen-activated protein kinase (p38 MAPK); [3] - p38 mitogen-activated protein kinase (p38 MAPK); [4] - p38 mitogen-activated protein kinase (p38 MAPK); [5] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
PD169316 (10 μM) 抑制 CaOV3 细胞中的 TGFβ 和激活素 A 信号传导，但不抑制 BMP4 信号传导。在 CaOV3 细胞中，PD169316 (0.2–20 μM) 抑制 TGFβ 诱导的 Smad2 核转位、Smad7 mRNA 诱导和报告基因活性 [1]。在 Nestin 敲低细胞中，PD169316 (10 μM) 表现出明显更高的增殖率，并且它可以在没有 EGF 的情况下逆转 Nestin 敲低对细胞活力的影响 [2]。在 PC12 细胞中，PD169316 显着降低 p38 MAP 激酶活性，同时对 ERK 活性没有影响。在分化的 PC12 细胞中，PD169316 (10 μM) 抑制因营养因子去除而引起的细胞凋亡[3]。在不阻止上游激酶磷酸化 p38 的情况下，PD169316（10 μM，30 分钟）选择性抑制磷酸化 p38 的激酶活性。 PD169316 存在时磷酸化 p-38 水平升高很可能是由 MAPK 磷酸酶阻断 p38 MAPK 去磷酸化的负反馈环引起的[4]。
1. 在人卵巢癌细胞中，使用浓度为5 μM或更高的PD169316可呈剂量依赖性地抑制转化生长因子β（TGFβ）诱导的Smad信号通路。这种抑制作用具体表现为Smad2和Smad3的磷酸化水平降低、Smad蛋白的核转位减少以及TGFβ靶基因Smad7的表达下调。值得注意的是，PD169316还能阻断激活素A（Activin A）诱导的信号通路，但对骨形态发生蛋白4（BMP4）诱导的信号通路无影响。经证实，PD169316对TGFβ信号通路的抑制并非源于对p38 MAPK活性的阻断，因为用p38 MAPK的显性负性突变体阻断p38 MAPK活性并不会影响TGFβ/Smad信号通路 [1] 2. 在Nestin基因敲降（导致细胞周期停滞和增殖能力下降）的小鼠神经祖细胞（mNPCs）中，加入PD169316可逆转细胞周期停滞。具体而言，PD169316能提高Nestin敲降mNPCs的活力，使其生长曲线与对照组细胞相似。此外，在球形成实验中，PD169316可显著增加Nestin敲降mNPCs形成神经球的数量。即使在缺乏表皮生长因子（EGF）的条件下，PD169316也能挽救由Nestin敲降引起的细胞活力降低 [2] 3. 在血清剥夺（导致p38活性升高和凋亡增加）的Rat-1成纤维细胞以及神经生长因子（NGF）剥夺（同样导致p38活性升高和凋亡增加）的分化PC12细胞中，PD169316可使p38酶活性降低约80%，同时将细胞凋亡率抑制约80%。相比之下，MAP激酶激酶抑制剂PD98059对Rat-1成纤维细胞的凋亡无影响，仅能部分阻断PC12细胞的凋亡 [3] 4. 在稳定表达孕激素受体A（PRA）的Ishikawa细胞中，用10 μM的PD169316预处理可削弱MAPK激酶激酶1（MEKK1）诱导的PRA稳定性。这种效应通过免疫印迹分析得以观察，结果显示与对照组细胞相比，PD169316可降低MEKK1转染所导致的PRA水平升高倍数 [4] 5. 在感染肠道病毒71型（EV71）的细胞模型中，PD169316通过抑制EV71的复制表现出显著的抗病毒活性。此外，PD169316还能减少EV71感染细胞中由病毒诱导的凋亡 [5] |
| 体内研究 (In Vivo) |
PD169316 PD169316（1 mg/kg，每天肌内注射，连续 14 天）在乳鼠模型中表现出抗病毒活性[5]。
1. 在感染EV71的乳鼠模型中，给予PD169316可抑制EV71的复制、减轻组织损伤（通过对受影响组织的病理分析观察到）并抑制炎症细胞因子的释放。这些作用共同缓解了EV71感染给乳鼠带来的严重疾病症状 [5] |
| 酶活实验 |
从 Rat-1 成纤维细胞中去除血清或从分化的 PC12 细胞中去除 NGF 后十六小时，将细胞在不存在或存在胰岛素 (50 ng/mL) 的情况下在 37°C 下孵育 15 分钟。然后将细胞溶解在 400 μL 冰冷的免疫沉淀缓冲液中，其中含有 10 mM Tris，pH 7.4，1% Triton X-100，0.5% Nonidet P-40，150 mM NaCl，1 mM EDTA，1 mM EGTA， 0.2 mM 原钒酸钠和 0.2 mM 苯甲基磺酰氟。离心细胞裂解物以除去不溶物质，将 200 g 上清蛋白（400 μL，总体积）与 1 μg 抗 p38 抗体在 4°C 下孵育 1 小时，然后与 30 μL Protein G 一起孵育加/蛋白 A-琼脂糖一小时。将免疫复合物沉淀，在免疫沉淀缓冲液中洗涤 3 次，然后在激酶 ish 缓冲液（50 mM β-甘油磷酸、1 mM EGTA、20 mM MgCl2 和 100 μM 原钒酸钠）中洗涤一次。通过添加 20 μL 2× 反应缓冲液（50 mMβ-磷酸甘油、1 mM EGTA、20 mM MgCl2、100 μM 原钒酸钠、0.1 mg/mL ATF-2（N 端一半）、将 50 μg/mL IP20（c-AMP 依赖性蛋白激酶的肽抑制剂）、200 μM ATP 和 0.9 mCi/mL [32P]ATP）加入到 20 μL 免疫复合物中。反应在 30 摄氏度下运行 10 分钟，然后通过添加 2× LaemmLi 样品缓冲液停止。然后使用 12% 丙烯酰胺凝胶和 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检查该反应。将凝胶干燥，然后在电泳后进行磷酸成像。
1. Rat-1成纤维细胞和PC12细胞中p38 MAPK活性检测实验：首先将细胞用适当浓度的PD169316处理，然后制备细胞裂解液，进行免疫复合物实验。在该实验中，使用抗p38 MAPK的特异性抗体从裂解液中免疫沉淀p38 MAPK。随后，将免疫沉淀得到的p38 MAPK与特定底物（如肽底物）以及ATP在反应缓冲液中共同孵育。经过一定时间的孵育后，采用闪烁计数或使用磷酸化特异性抗体进行蛋白质印迹等技术，检测磷酸化底物的量，从而确定p38 MAPK的活性。该实验表明PD169316可抑制p38酶活性 [3] |
| 细胞实验 |
KBU 细胞单独接受 12 ppm G. pps 处理，或与 P38 抑制剂 PD169316 预暴露 1 小时相结合，观察其增殖 (MTT)、凋亡 (Ann V) 以及蛋白质修饰程度的变化。评估 SAPK/JNK 和 P38 信号通路。
1. 人卵巢癌细胞TGFβ诱导Smad信号通路实验：将人卵巢癌细胞接种到合适的培养板中，培养至所需汇合度。随后将细胞分为不同组：对照组（不处理）、TGFβ处理组以及TGFβ + PD169316（浓度为5 μM或更高）处理组。孵育特定时间后收集细胞。为检测Smad2和Smad3的磷酸化水平，提取细胞裂解液，使用针对Smad2和Smad3的磷酸化特异性抗体进行蛋白质印迹分析。为分析Smad蛋白的核转位，进行免疫荧光染色：将细胞固定、透化后，加入Smad特异性抗体孵育，再加入荧光标记的二抗，最后在荧光显微镜下观察。为检测Smad7基因的表达，采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）或实时定量聚合酶链反应（qPCR）检测Smad7的mRNA水平 [1] 2. 小鼠神经祖细胞（mNPCs）实验：分离mNPCs，在含有EGF和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的培养基中培养以维持其干细胞特性。通过用Nestin shRNA腺病毒感染mNPCs（以 scramble病毒感染细胞和未感染细胞作为对照）实现Nestin基因敲降。感染72小时后，向Nestin敲降组的培养基中加入PD169316。为分析细胞活力，在特定时间点采用MTT或CCK-8实验检测吸光度值，以此反映细胞活力。为进行球形成实验，将mNPCs以低密度接种到低吸附培养板中，培养特定时间后，计数神经球数量并测量其大小。为分析细胞周期，采用流式细胞术：收集细胞、固定后用碘化丙啶（PI）染色，随后进行分析以确定G1、S和G2期细胞的百分比 [2] 3. Rat-1成纤维细胞和PC12细胞凋亡实验：将Rat-1成纤维细胞在含血清的培养基中培养，随后去除血清以诱导凋亡。将分化的PC12细胞在含NGF的培养基中培养，随后去除NGF以诱导凋亡。向去除血清的Rat-1成纤维细胞和去除NGF的PC12细胞的培养基中加入PD169316。孵育16小时后，采用流式细胞术（Annexin V-FITC/PI双染色）或TUNEL实验等方法检测凋亡，计数凋亡细胞数量 [3] 4. Ishikawa细胞PRA稳定性实验：将稳定表达PRA的Ishikawa细胞分别转染空对照载体或MEKK1表达载体。转染24小时后，向培养基中加入10 μM的PD169316。孵育特定时间后收集细胞，提取细胞裂解液，使用PRA特异性抗体进行蛋白质印迹分析以检测PRA的表达水平。对条带强度进行定量分析，从而研究PD169316对MEKK1诱导的PRA稳定性的影响 [4] 5. EV71感染细胞实验：将细胞（如Vero细胞）接种到培养板中，培养至汇合。以特定的感染复数（MOI）向细胞中加入EV71，孵育特定时间以允许病毒感染。随后向培养基中加入适当浓度的PD169316。孵育特定时间后，采用空斑实验检测细胞上清液中的病毒滴度：将上清液进行系列稀释后加入到汇合的Vero细胞中，覆盖琼脂糖，孵育后计数空斑数量以计算病毒滴度。为检测EV71诱导的凋亡，采用流式细胞术（Annexin V-FITC/PI双染色） [5] |
| 动物实验 |
EV71感染的乳鼠模型（7日龄昆明小鼠）[5]。
1 mg/kg。 连续14天，每日肌注。 1. EV71感染的乳鼠模型：使用乳鼠（例如，1日龄或3日龄BALB/c小鼠）。通过腹腔注射或脑内注射将特定病毒剂量的EV71接种到乳鼠体内，以建立EV71感染模型。PD169316的制备方法为：将其溶解于合适的溶剂（例如，二甲基亚砜（DMSO）中，然后用生理盐水稀释至合适的浓度）。将药物以特定剂量和频率（例如，连续数天，每日一次）通过腹腔注射给予感染的乳鼠。实验过程中，观察并记录小鼠的一般状况（如活动、摄食和死亡率）。实验结束后，对小鼠实施安乐死，并收集组织（如脑、心脏和四肢）。制备组织病理切片，并用苏木精-伊红 (HE) 染色以观察组织损伤情况。采用 RT-PCR 或病毒分离等方法检测组织中的病毒载量。采用酶联免疫吸附试验 (ELISA) 检测血清或组织匀浆中炎症细胞因子（如 TNF-α、IL-6）的水平 [5] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
4-[4-(4-氟苯基)-2-(4-硝基苯基)-1H-咪唑-5-基]吡啶是咪唑类化合物。
PD-169316 是一种 p38 MAP 激酶抑制剂。 1. PD169316 属于吡啶基咪唑类化合物[3]。 2. 当 PD169316 在实验中以 5 μM 或更高的浓度使用时，它可以阻断 TGFβ 信号通路活性。因此，在使用该抑制剂时，必须谨慎地将细胞活动完全归因于p38 MAPK信号通路[1]。 3. 在Nestin介导的mNPC增殖调控中，PD169316通过靶向p38-MAPK通路发挥作用，该通路参与Nestin促进mNPC增殖和自我更新的机制[2]。 4. 在胰岛素介导的细胞存活研究中，PD169316和胰岛素在阻断p38活性和细胞凋亡方面具有相似的作用，支持了胰岛素至少部分通过抑制p38通路促进细胞存活的假设[3]。 5. PD169316（靶向p38 MAPK）对PRA/PRB稳定性的调控与PR丝氨酸294磷酸化无关，而PR丝氨酸294磷酸化此前被认为是PR的主要传感器。下调[4] 6. PD169316 对 EV71 的抗病毒活性与其对 p38-MAPK 信号通路的调控有关，该通路可能参与 EV71 感染引起的炎症反应[5] |
| 分子式 |
C20H13FN4O2
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|---|---|---|
| 分子量 |
360.34
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| 精确质量 |
360.102
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| 元素分析 |
C, 66.66; H, 3.64; F, 5.27; N, 15.55; O, 8.88
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| CAS号 |
152121-53-4
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
4712
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| 外观&性状 |
white solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
583.1±50.0 °C at 760 mmHg
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|
| 闪点 |
306.4±30.1 °C
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|
| 蒸汽压 |
0.0±1.6 mmHg at 25°C
|
|
| 折射率 |
1.651
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|
| LogP |
5.32
|
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| tPSA |
87.39
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
27
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| 分子复杂度/Complexity |
495
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
FC(C=C1)=CC=C1C2=C(C3=CC=NC=C3)NC(C4=CC=C([N+]([O-])=O)C=C4)=N2
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| InChi Key |
BGIYKDUASORTBB-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H13FN4O2/c21-16-5-1-13(2-6-16)18-19(14-9-11-22-12-10-14)24-20(23-18)15-3-7-17(8-4-15)25(26)27/h1-12H,(H,23,24)
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| 化学名 |
4-[4-(4-fluorophenyl)-2-(4-nitrophenyl)-1H-imidazol-5-yl]pyridine
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~14 mg/mL ( ~38.6 mM)
Water: Insoluble Ethanol: Insoluble |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 1.25 mg/mL (3.47 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 12.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 1.25 mg/mL (3.47 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 12.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (3.47 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 5%DMSO+40%PEG300+5%Tween 80+ 50%ddH2O: 0.7mg/ml (1.94mM) 配方 5 中的溶解度: 5 mg/mL (13.88 mM) in 50% PEG300 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7752 mL | 13.8758 mL | 27.7516 mL | |
| 5 mM | 0.5550 mL | 2.7752 mL | 5.5503 mL | |
| 10 mM | 0.2775 mL | 1.3876 mL | 2.7752 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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BChE/p38-α MAPK-IN-1
p38 Kinase-IN-9
MKK6 SDTD Recombinant Human Active Protein Kinase
BMS-626531
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