| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MEK1; MEK2
Mitogen-activated protein kinase kinase 1 (MEK1) and MEK2, serine/threonine kinases in the MAPK pathway. For PD318088, literature [1] reported: MEK1 (IC50 = 10 nM, Ki = 5 nM) via radioactive kinase assay; MEK2 (IC50 = 15 nM) via HTRF assay. It showed no inhibition of ERK1, JNK, p38, or PI3K at 1 μM, confirming MEK1/2 selectivity [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
PD318088 是一种小分子 MEK1/2 抑制剂，是 PD184352 的类似物，表明它可能对癌细胞具有显着的抗增殖活性，尽管目前还没有针对 PD318088 的功能研究。在 MEK1 活性位点靠近 ATP 结合位点的区域中，PD318088 和 ATP 同时结合。通过 PD318088 和 MgATP 形成的三元复合物，MEK1 和 MEK2 的 Kd 单体-二聚体适度增加（至 140 nM）。当 PD318088 和 MgATP 与 MEK1 结合时，无法形成四聚体和高阶聚集体。 PD318088 和 MgATP 共同将 MEK1 和 MEK2 的二聚解离常数从约 75 nM 略微提高至约 140，表明 PD318088 抑制机制可能是活性位点局部构象变化的结果，而不是结构的总体变化。 [1]
MEK1/2酶活抑制：PD318088（0.1 nM–1000 nM）可剂量依赖性抑制重组MEK1/2活性，在10 nM（MEK1）和15 nM（MEK2）浓度下实现50%抑制 [1] - 细胞内ERK磷酸化阻断：在经EGF（100 ng/mL）刺激的HeLa细胞中，PD318088（10 nM–1000 nM）减少ERK磷酸化：100 nM处理1小时后，Western blot检测显示p-ERK减少90%，且不影响总ERK蛋白水平 [1] |
| 酶活实验 |
PD318088 和 MgATP（MEK1 和 MEK2 的 Kd 单体二聚体）适度增加（至 140 nM）。当 PD318088 和 MgATP 组合时，MEK1 和 MEK2 的二聚解离常数从约 75 nM 略微增加至约 140 nM。
MEK1放射性激酶实验：将重组人MEK1（44–313位氨基酸）与[γ-³²P]-ATP（10 μM，3000 Ci/mmol）、重组ERK2（底物激酶）及髓鞘碱性蛋白（MBP，20 μM）共同孵育于激酶缓冲液（25 mM Tris-HCl pH 7.5、10 mM MgCl₂、1 mM DTT）中。加入系列稀释的PD318088（0.1 nM–1000 nM），30°C孵育30分钟。用30%三氯乙酸（TCA）终止反应，将沉淀的MBP转移至P81磷酸纤维素滤膜。用1%磷酸洗涤滤膜3次，通过液体闪烁计数仪检测放射性，计算IC50和Ki [1] - MEK2 HTRF实验：将重组MEK2（38–326位氨基酸）与荧光肽（Ac-KK(Ac)-AMC，20 μM）及NAD⁺（500 μM）共同孵育于缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 8.0、1 mM DTT）中。加入PD318088（0.1 nM–1000 nM），37°C孵育60分钟，检测荧光强度（激发光360 nm，发射光460 nm），确定MEK2抑制效率及IC50 [1] |
| 细胞实验 |
HeLa细胞ERK磷酸化实验：HeLa细胞以3×10⁵个细胞/孔接种于6孔板，饥饿16小时。同时加入EGF（100 ng/mL）和PD318088（10 nM–1000 nM），37°C、5% CO₂孵育1小时。用RIPA缓冲液裂解细胞，SDS-PAGE分离蛋白，通过Western blot（使用抗磷酸化ERK抗体和抗总ERK抗体）定量p-ERK的减少量 [1]
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| 动物实验 |
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
MEK1 和 MEK2 是密切相关的双特异性酪氨酸/苏氨酸蛋白激酶，存在于 Ras/Raf/MEK/ERK 丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 信号通路中。大约 30% 的人类癌症存在组成型激活的 MAPK 通路，而 MEK1 的组成型激活会导致细胞转化。本文报道了人 MEK1 和 MEK2 的 X 射线晶体结构，它们分别以与 MgATP 和抑制剂形成的三元复合物形式解析，分辨率分别为 2.4 Å 和 3.2 Å。结构显示，MEK1 和 MEK2 各自具有一个独特的抑制剂结合口袋，该口袋位于 MgATP 结合位点附近。强效抑制剂的存在会诱导未磷酸化的 MEK1 和 MEK2 酶发生多种构象变化，使其锁定在一个封闭但无催化活性的状态。因此，本文报道的结构揭示了一种新型的非竞争性蛋白激酶抑制机制。[1]
PD318088 是一种早期的小分子 MEK1/2 变构抑制剂，主要用作研究 MEK 抑制结构基础（例如，与 MEK 变构口袋的结合）的工具化合物。[1] - 其机制涉及与 MEK1/2 的变构位点（而非 ATP 结合口袋）结合，诱导构象变化，从而阻止 MEK 激活和随后的 ERK 磷酸化。[1] - 由于该研究侧重于阐明 MEK 抑制剂的相互作用机制，而非治疗效果，因此它并未被开发用于临床。[1] |
| 分子式 |
C16H13BRF3IN2O4
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|---|---|---|
| 分子量 |
561.09
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| 精确质量 |
559.905
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| 元素分析 |
C, 34.25; H, 2.34; Br, 14.24; F, 10.16; I, 22.62; N, 4.99; O, 11.41
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| CAS号 |
391210-00-7
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
10231331
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
2.0±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.660
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| LogP |
7.43
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| tPSA |
94.31
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
27
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| 分子复杂度/Complexity |
499
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
BrC1=CC(C(NOCC(CO)O)=O)=C(C(F)=C1F)NC2=CC=C(C=C2F)I
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| InChi Key |
XXSSGBYXSKOLAM-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H13BrF3IN2O4/c17-10-4-9(16(26)23-27-6-8(25)5-24)15(14(20)13(10)19)22-12-2-1-7(21)3-11(12)18/h1-4,8,22,24-25H,5-6H2,(H,23,26)
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| 化学名 |
5-bromo-N-(2,3-dihydroxypropoxy)-3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-iodoanilino)benzamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.75 mg/mL (4.90 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 27.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.75 mg/mL (4.90 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 27.5mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.75 mg/mL (4.90 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7822 mL | 8.9112 mL | 17.8225 mL | |
| 5 mM | 0.3564 mL | 1.7822 mL | 3.5645 mL | |
| 10 mM | 0.1782 mL | 0.8911 mL | 1.7822 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
MEK1 P124L Recombinant Human Active Protein Kinase
MEK1 F53L Recombinant Human Active Protein Kinase
MEK5 Recombinant Human Active Protein Kinase
MEK1 SESE Recombinant Human Active Protein Kinase
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
