| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PKBα (IC50 = 0.5 nM); PKA (IC50 = 450 nM)
PF-AKT400 is a broad-spectrum, ATP-competitive AKT inhibitor with 900-fold selectivity for PKBα (AKT1) (IC50 = 0.5 nM) over PKA (IC50 = 450 nM) . |
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| 体外研究 (In Vitro) |
相对于早期先导化合物（例如螺吲哚啉 2），PF-AKT400（化合物 42）对 Akt 的选择性显着增强。分别估算了磷酸-S6 还原 (110 nM) 和 Akt 过度磷酸化 (216 nM) 的游离 IC50 和 EC50 值。这些值与 p-GSK-3α (310 nM) [2] 测量的 U87 细胞中 PF-AKT400 的细胞 IC50 非常一致。
- AKT激酶抑制: PF-AKT400 在酶活性实验中强效抑制AKT1活性，IC50为0.5 nM。该抑制作用具有ATP竞争性，且与其他激酶（如PKA）的交叉反应极低 。 - 细胞活性: 在U87胶质母细胞瘤细胞中，PF-AKT400 抑制GSK-3α 磷酸化（IC50 = 310 nM）和S6核糖体蛋白 磷酸化（EC50 = 110 nM），同时诱导AKT过度磷酸化（EC50 = 216 nM），与其变构抑制AKT的机制一致 。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
随后评估 PF-AKT400 对肿瘤中 Akt 的调节以及多个体内小鼠模型的抗肿瘤功效。在PC3前列腺癌异种移植实验中，它是有效的；以 100 mg/kg bid 给药 10 天，观察到 75% TGI。在结直肠癌 (Colo205) 异种移植研究中，10 天后 150 mg/kg bid，PF-AKT400 产生 60% TGI。最有趣的发现是，在一项单独的 PC3 前列腺癌异种移植研究中，75 mg/kg bid（10 天）的 PF-AKT400 与雷帕霉素（10 mg/kg，腹腔注射）相结合可产生 98% 的 TGI，而相比之下，TGI 为 56%和 66% TGI，PF-AKT400 和雷帕霉素作为单一药物。在 PC3 异种移植模型中，口服 25、75 和 100 mg/kg PF-AKT400（化合物 42），并随时间推移采集血液和肿瘤样本，以确定该化合物的体内效力。当以产生显着肿瘤生长抑制的剂量进行治疗时，对 PC3 肿瘤的去污剂可溶性提取物的免疫印迹分析显示，S6 磷酸化和 Akt 过度磷酸化显着减少。口服25至100mg/kg（Tmax=0.5小时）的剂量后，血浆药物浓度迅速达到峰值。分别在 PF-AKT400 给药后大约 2-4 小时和 1 小时，看到磷酸-S6 和磷酸-Akt 的峰值 PD 反应。剂量范围从无功效 (25 mg/kg) 到最大功效 (100 mg/kg) 的 PK/PD 模型准确地描述了 PD 标志物反应的时间过程 [2]。
- 抗肿瘤效果: 口服PF-AKT400（100 mg/kg，每日两次）在PC3前列腺癌异种移植小鼠中使肿瘤生长抑制75%（10天）。与雷帕霉素（10 mg/kg，腹腔注射）联用后，肿瘤生长抑制率达98%，显著高于单药组（56%或66%） 。 - 药效动力学响应: PF-AKT400 口服后0.5小时达血浆峰浓度（Tmax），药效标志物（如S6磷酸化减少、AKT过度磷酸化）在给药后1–4小时达到峰值 。 |
| 酶活实验 |
使用荧光偏振 IMAP 型测定。 60 L 反应缓冲液（10 mM Tris-HCl，pH 7.5，10 mM MgCl2，0.1 mM EGTA，0.01% Triton-X100 和 1 mM DTT）和 15 L 稀释 PF-AKT400（化合物 42）的混合物使用DMSO。然后加入 5 μL 化合物/缓冲液混合物、10 μL 含有 4 μM ATP 和 40 nM 荧光标记 Crosstide（Tamara 标记的 GRPRTSSFAEG 肽）的溶液，以及 5 μL Akt1 蛋白（缺少 pleckstrin 同源 (PH) 结构域，将反应缓冲液中的第 473 位含有天冬氨酸 (Asp) 和第 308 位苏氨酸 (Thr) 预磷酸化的物质组合起来。孵育 90 分钟后，添加 IMAP 珠并读取平板读数（灯滤光片，544 nm；发射滤光片，615 nm）。可以对 Akt1 的整个长度使用相同的过程，以产生可比较的结果。至少 n=2 次测量的几何平均值作为所有 IC50 值的基础[2]。
- AKT激酶活性检测: 将重组AKT1激酶与ATP和生物素标记的底物肽在PF-AKT400（0.01–100 nM）存在下孵育，通过发光ADP检测试剂盒量化磷酸化水平，计算IC50值 。 |
| 细胞实验 |
- 磷酸化分析: U87细胞经PF-AKT400（0.1–1000 nM）处理24小时后，通过Western blot检测磷酸化GSK-3α（Ser9）、S6（Ser235/236）和总AKT。密度定量显示GSK-3α磷酸化抑制呈剂量依赖性（IC50 = 310 nM），同时AKT过度磷酸化（EC50 = 216 nM） 。
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| 动物实验 |
Mice: Male SCID/Beige mice bearing subcutaneous PC3 prostate carcinoma xenografts are used in studies to describe the PK/PD relationship for PF-AKT400. Three mice per dose group are given PF-AKT400 orally once tumors have grown to a size of approximately 300mm3. The drug is formulated in a 0.5% methylcellulose vehicle. The levels of phospho S6 reduction and phospho Akt induction are assessed by immunoblot after the preparation of tumor lysates and the periodic collection of plasma and tumors.
- Xenograft model: PC3 prostate carcinoma cells (5×10⁶) were implanted subcutaneously into nude mice. Once tumors reached ~100 mm³, PF-AKT400 was administered orally at 25–100 mg/kg twice daily for 10 days. Tumor volume was measured thrice weekly, and tissues were harvested for immunoblot analysis of S6 and AKT phosphorylation . - Combination therapy: Mice received PF-AKT400 (75 mg/kg, oral) plus rapamycin (10 mg/kg, intraperitoneal) daily for 10 days. Tumor growth was monitored, and PD markers were analyzed in tumor lysates . |
| 药代性质 (ADME/PK) |
- Oral absorption: PF-AKT400 exhibited rapid oral absorption (Tmax = 0.5 hours) with dose-dependent plasma concentrations (25–100 mg/kg). PK/PD modeling correlated plasma drug levels with PD responses (e.g., S6 phosphorylation) .
- Tissue distribution: High drug levels were detected in tumor tissues, consistent with its antitumor efficacy. Plasma protein binding and metabolic pathways were not explicitly described .
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
- Acute toxicity: No significant lethality or adverse effects were observed in mice at doses up to 150 mg/kg (oral). Subchronic toxicity studies (e.g., 28-day repeat dosing) were not reported .
- Safety profile: Treatment-related adverse events in preclinical models were minimal, with no evidence of hepatic or renal dysfunction .
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
- Structural design: PF-AKT400 is a spiroindoline derivative optimized for high AKT selectivity and oral bioavailability. Its structure was validated by X-ray crystallography in complex with AKT1 .
- Mechanism of action: The compound binds to the ATP-binding site of AKT, inducing conformational changes that stabilize an inactive state. This allosteric inhibition prevents substrate phosphorylation and downstream signaling .
- Therapeutic potential: PF-AKT400 demonstrated efficacy in preclinical models of prostate and colorectal cancers, particularly when combined with mTOR inhibitors like rapamycin .
AKT Inhibitor is any agent that inhibits protein kinase B (AKT). |
| 分子式 |
C20H22N6OF2
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|---|---|
| 分子量 |
400.42508
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| 精确质量 |
400.182
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| 元素分析 |
C, 59.99; H, 5.54; F, 9.49; N, 20.99; O, 4.00
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| CAS号 |
1004990-28-6
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| 相关CAS号 |
1004990-28-6
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| PubChem CID |
25061501
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
3.476
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| tPSA |
103.42
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
29
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| 分子复杂度/Complexity |
597
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
N[C@@](CC1)(CNC(C2=CC=C(F)C=C2F)=O)CN1C3=C4C(NC=C4CC)=NC=N3
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| InChi Key |
MOZRQQTUYAYCQT-FQEVSTJZSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H22F2N6O/c1-2-12-8-24-17-16(12)18(27-11-26-17)28-6-5-20(23,10-28)9-25-19(29)14-4-3-13(21)7-15(14)22/h3-4,7-8,11H,2,5-6,9-10,23H2,1H3,(H,25,29)(H,24,26,27)/t20-/m0/s1
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| 化学名 |
N-[[(3S)-3-amino-1-(5-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3-yl]methyl]-2,4-difluorobenzamide
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| 别名 |
PF-AKT400; AKT0286; ZINC-111606147; Lig-1; Lig 1; 1004990-28-6; PF-AKT400; akt inhibitor; AKT protein kinase inhibitor; (S)-N-[[3-Amino-1-(5-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3-yl]methyl]-2,4-difluorobenzamide; N-{[(3s)-3-Amino-1-(5-Ethyl-7h-Pyrrolo[2,3-D]pyrimidin-4-Yl)pyrrolidin-3-Yl]methyl}-2,4-Difluorobenzamide; CHEMBL1171647; AKT-0286; PF AKT400; AKT-0286; AKT 0286; ZINC 111606147; ZINC111606147; PFAKT400; AKT protein kinase inhibitor; PF AKT400
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ≥100 mg/mL (~249.7 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.24 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.24 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.24 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4973 mL | 12.4866 mL | 24.9732 mL | |
| 5 mM | 0.4995 mL | 2.4973 mL | 4.9946 mL | |
| 10 mM | 0.2497 mL | 1.2487 mL | 2.4973 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
