| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 体外研究 (In Vitro) |
1. 对抗H₂O₂诱导的HeLa细胞损伤的细胞保护活性:磷酸烯醇丙酮酸三环己基铵盐(Phosphoenolpyruvic acid tricyclohexylammonium salt)(提供磷酸烯醇丙酮酸,PEP)具有细胞保护作用。将HeLa细胞用该化合物(0.1 mM、0.5 mM、1 mM、2 mM、5 mM)预处理24小时后,暴露于200 μM H₂O₂中2小时,通过MTT法检测的细胞活力呈浓度依赖性升高。在2 mM浓度下,细胞存活率显著提升至约78%,而仅H₂O₂处理组的细胞存活率为42% [1]
2. 抗氧化活性:该化合物可降低H₂O₂处理的HeLa细胞内活性氧(ROS)水平。与仅H₂O₂处理组相比,用2 mM 磷酸烯醇丙酮酸三环己基铵盐(Phosphoenolpyruvic acid tricyclohexylammonium salt)预处理可使ROS积累减少约52%(通过DCFH-DA荧光探针检测)。此外,它还能使HeLa细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性提高约45%,增强细胞抗氧化防御系统 [1] 3. 对正常HeLa细胞无抗增殖活性:单独使用磷酸烯醇丙酮酸三环己基铵盐(Phosphoenolpyruvic acid tricyclohexylammonium salt)(0.1-5 mM)处理24小时,不影响非应激状态下HeLa细胞的活力,细胞存活率维持在95%以上,表明其在正常条件下无细胞毒性 [1] |
|---|---|
| 酶活实验 |
1. 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性检测实验:用磷酸烯醇丙酮酸三环己基铵盐(Phosphoenolpyruvic acid tricyclohexylammonium salt)(2 mM)和H₂O₂处理HeLa细胞后,裂解细胞。将细胞裂解液与含还原型谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢(H₂O₂)和叠氮化钠的反应缓冲液混合,37°C孵育5分钟后,加入5,5'-二硫代双-(2-硝基苯甲酸)(DTNB)溶液检测剩余的GSH。在412 nm波长下测定吸光度,根据GSH的消耗速率计算GSH-Px活性,活性单位以每毫克蛋白质的单位数表示 [1]
2. 细胞内ROS检测实验:HeLa细胞经磷酸烯醇丙酮酸三环己基铵盐(Phosphoenolpyruvic acid tricyclohexylammonium salt)(0.5-2 mM)预处理并暴露于H₂O₂后,用10 μM DCFH-DA荧光探针在37°C下负载30分钟。用PBS洗涤细胞以去除未负载的探针,随后用流式细胞仪检测荧光强度(激发波长:488 nm,发射波长:525 nm)。通过比较处理组与对照组的平均荧光强度,定量ROS水平 [1] |
| 细胞实验 |
1. MTT细胞活力检测实验:将HeLa细胞以每孔5×10³个细胞的密度接种于96孔板,过夜培养。然后用磷酸烯醇丙酮酸三环己基铵盐(Phosphoenolpyruvic acid tricyclohexylammonium salt)(0.1-5 mM)预处理细胞24小时,再用200 μM H₂O₂处理2小时。处理后,向每孔加入20 μL MTT溶液(5 mg/mL),37°C孵育4小时。去除上清液,加入150 μL二甲基亚砜(DMSO)溶解甲瓒结晶,用微孔板读数仪在570 nm波长下测定吸光度,细胞活力以相对于未处理对照组的百分比计算 [1]
2. Hoechst 33342凋亡染色实验:将HeLa细胞培养在盖玻片上,用磷酸烯醇丙酮酸三环己基铵盐(Phosphoenolpyruvic acid tricyclohexylammonium salt)(2 mM)处理24小时,再暴露于200 μM H₂O₂中2小时。用4%多聚甲醛固定细胞15分钟,0.1% Triton X-100透化5分钟,室温下用10 μg/mL Hoechst 33342染色10分钟。在荧光显微镜下观察凋亡细胞(以细胞核浓缩、碎裂为特征),在5个随机视野中计数300个总细胞中的凋亡细胞,计算凋亡率 [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
磷酸烯醇式丙酮酸三环己基铵盐是磷酸烯醇式丙酮酸 (PEP) 的一种盐形式,PEP 是糖酵解的中间代谢产物。本研究使用这种盐形式将 PEP 递送至 HeLa 细胞,因为 PEP 本身细胞膜渗透性较差 [1]。磷酸烯醇式丙酮酸三环己基铵盐的细胞保护和抗氧化作用是通过维持细胞内氧化还原平衡来实现的——具体而言,是通过增强 GSH-Px 活性来清除过量的活性氧 (ROS) 并减少氧化应激引起的细胞损伤 [1]。
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| 分子式 |
C3H2O6P-3.3[C6H14N+]
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|---|---|
| 分子量 |
465.56436
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| 精确质量 |
465.296
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| CAS号 |
35556-70-8
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| 相关CAS号 |
Phosphoenolpyruvic acid potassium;4265-07-0
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| PubChem CID |
11754241
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 沸点 |
466.7ºC at 760 mmHg
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| 熔点 |
197-198 °C
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| 闪点 |
236.1ºC
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| LogP |
0.918
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| tPSA |
205.28
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| 氢键供体(HBD)数目 |
6
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| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
247
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
MJKYGUXBFYGLLM-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/3C6H13N.C3H5O6P/c3*7-6-4-2-1-3-5-6;1-2(3(4)5)9-10(6,7)8/h3*6H,1-5,7H2;1H2,(H,4,5)(H2,6,7,8)
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| 化学名 |
cyclohexanamine;2-phosphonooxyprop-2-enoic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~100 mg/mL (~214.80 mM)
DMSO :< 1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 50 mg/mL (107.40 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1480 mL | 10.7398 mL | 21.4795 mL | |
| 5 mM | 0.4296 mL | 2.1480 mL | 4.2959 mL | |
| 10 mM | 0.2148 mL | 1.0740 mL | 2.1480 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。