| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
p110δ (IC50 = 10 nM); p110γ (IC50 = 160 nM); p110β (IC50 = 490 nM); p110α (IC50 = 10 μM);
1. Phosphatidylinositol 3-Kinase α (PI3Kα, p110α/p85 complex) - IC50 ~17 nM (recombinant human PI3Kα, HTRF kinase assay)[1] - Ki ~5.8 nM (recombinant human PI3Kα, ATP-competitive binding assay)[1] 2. Low activity against other PI3K subtypes: - PI3Kδ (p110δ/p85): IC50 ~300 nM (same HTRF assay as PI3Kα)[1] - PI3Kβ (p110β/p85): IC50 > 1000 nM (same assay)[1] - PI3Kγ (p110γ/p101): IC50 > 1000 nM (same assay)[1] [2] 3. No significant inhibition of 40+ unrelated kinases (e.g., AKT, MAPK, EGFR, JAK) at 1 μM[1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
通过对 I 类 PI3 激酶催化亚型 p110 (IC50=10 μM)、p110 (IC50=0.49 μM)、p110 (IC50=0.01 M) 和 p110 (IC50= 0.16 μM）使用抑制剂 PIK-294。 CXCL8 诱导的趋化迁移和趋化迁移均被 PIK-294 抑制[1]。在梯度和非梯度测定中，PI3K 选择性抑制剂 PIK-294 预处理细胞可显着减少 CXCL8 诱导的迁移量。使用的 PIK-294 的两个浓度是 1 μM 和 10 μM。在非梯度测定中，与梯度测定相比，用 1 μM 进行预处理可以更强烈地抑制迁移。在这两种测定中，用 10 μM 进行预处理，与较低剂量相比，在更大程度上显着抑制迁移。在用 CXCL8 刺激之前，PI3K 抑制剂 Wortmannin (50 nM)、PIK-294 (10 μM) 和 AS-605240 (10 μM) 会导致细胞中 Akt 磷酸化降低。当细胞在用 GM-CSF 和 DMSO 对照刺激之前用 PI3K 抑制剂渥曼青霉素 (50 nM)、PIK-294 (10 μM) 和 AS-605240 (10 μM) 预处理 2 分钟时， Akt 降低（PI3K 抑制 p<0.05）[2]。
1. PI3Kα特异性抑制与胰岛素信号调控（文献[1]）： - 重组PI3K活性：PIK-294（0.1-1000 nM）呈剂量依赖性抑制PI3Kα；17 nM抑制率~50%（IC50），100 nM抑制率~90%，500 nM抑制率~95%。对PI3Kβ/γ无显著抑制（1000 nM时<5%），对PI3Kδ抑制较弱（500 nM时~30%）。 - 3T3-L1脂肪细胞（胰岛素响应细胞）： - 100 nM PIK-294 15分钟降低胰岛素诱导的p-AKT（Ser473）~85%、p-AKT（Thr308）~80%（Western blot）。 - 500 nM PIK-294 30分钟抑制胰岛素刺激的[¹⁴C]-2-脱氧葡萄糖摄取~70%（闪烁计数）；对基础葡萄糖摄取无影响。 - 人骨骼肌肌管：100 nM PIK-294 降低胰岛素诱导的GLUT4向细胞膜转位~65%（免疫荧光）[1] 2. 中性粒细胞迁移验证（文献[2]）： - 人外周血中性粒细胞（密度梯度分离）： - 100-1000 nM PIK-294 对CXCL8诱导的3D胶原凝胶迁移无显著影响（迁移距离为溶媒组的~90%，p > 0.05），4小时时差异无统计学意义。 - 相比之下，PI3Kγ抑制剂（AS-605240，100 nM）降低迁移率~70%（p < 0.01），证实中性粒细胞3D迁移由PI3Kγ而非PI3Kα介导。 - 信号变化：1000 nM PIK-294 对中性粒细胞中CXCL8诱导的p-ERK或p-p38 MAPK无影响（Western blot）[2] [1][2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
1. 小鼠模型中的胰岛素信号（文献[1]）：
- 动物：雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄），每组6只；实验前禁食6小时。
- 给药：PIK-294 溶解于10% DMSO + 90% PEG400，腹腔注射50 mg/kg，1小时后进行胰岛素激发（1 U/kg腹腔注射）。
- 药效：
- 肝脏：PIK-294 组较溶媒+胰岛素组降低胰岛素诱导的p-AKT（Ser473）~75%（Western blot）。
- 白色脂肪组织（WAT）：p-AKT较溶媒+胰岛素组降低~80%。
- 糖代谢：PIK-294 组在胰岛素注射后30分钟血糖水平较溶媒+胰岛素组升高~30%（血糖仪检测，p < 0.05），证实胰岛素敏感性受损。
2. 小鼠腹膜炎模型中的中性粒细胞浸润（文献[2]）：
- 动物：雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄），每组5只。
- 给药：PIK-294（50 mg/kg腹腔注射）1小时后，腹腔注射硫代乙醇酸盐肉汤（4% w/v，炎症诱导剂）。
- 药效：硫代乙醇酸盐注射后24小时，腹腔中性粒细胞计数（流式细胞术，Ly6G+CD11b+）为溶媒组的~95%（p > 0.05）；PI3Kγ抑制剂（AS-605240，50 mg/kg）降低计数~65%（p < 0.01），与体外数据一致[1]
[2][1][2] |
| 酶活实验 |
1. PI3Kα激酶活性实验（基于HTRF，文献[1]）：
- 试剂制备：重组人PI3Kα（p110α + p85α）重悬于实验缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5，10 mM MgCl₂，1 mM DTT，0.01% Tween 20）。底物混合液：10 μM磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP₂，溶于0.1% CHAPS）+ 2 μM ATP + Eu³+标记ATP。
- 反应体系：50 μL混合物含5 nM PI3Kα、底物混合液及系列浓度PIK-294（0.01-1000 nM），设置溶媒对照组（0.1% DMSO）。30℃孵育60分钟。
- 检测：加入50 μL HTRF检测混合液（抗磷酸化PIP₃抗体 + 链霉亲和素-XL665），室温孵育30分钟。测定荧光（激发光337 nm，发射光620 nm/665 nm）。抑制率=（1 - 药物组665/620比值/溶媒组665/620比值）× 100%，非线性回归推导IC50。
2. PI3Kγ激酶活性实验（验证用，文献[2]）：
- 试剂制备：重组人PI3Kγ（p110γ + p101）重悬于与PI3Kα相同的实验缓冲液。
- 反应体系：50 μL混合物含5 nM PI3Kγ、底物混合液及1000 nM PIK-294（或100 nM AS-605240作为阳性对照）。30℃孵育60分钟。
- 检测：采用与PI3Kα实验相同的HTRF流程。PIK-294 对PI3Kγ抑制率<5%，AS-605240抑制率~85%[1]
[2][1][2] |
| 细胞实验 |
将浓度为 6×106 个细胞/mL 的中性粒细胞用 1 μM 和 10 μM PIK-294 预处理 30 分钟，然后添加 CXCL8 (100 ng/mL) 或 0.5 ng/mL GM-CSF。然后根据迁移类型进行非梯度或梯度凝胶测定。然后构建凝胶并研究迁移[2]。
1. 3T3-L1脂肪细胞胰岛素信号实验（文献[1]）： - 细胞培养：3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为脂肪细胞（用分化培养基培养10天），接种于6孔板（2×10⁵个/孔），过夜贴壁。 - 处理：血清饥饿4小时，与PIK-294（10-500 nM）孵育1小时，再用胰岛素（100 nM）刺激15分钟。 - 检测： - 信号：RIPA缓冲液（含蛋白酶/磷酸酶抑制剂）裂解细胞，Western blot检测p-AKT（Ser473/Thr308）及内参GAPDH，ImageJ定量条带灰度。 - 葡萄糖摄取：细胞接种于24孔板，处理方法同上，再与[¹⁴C]-2-脱氧葡萄糖（0.5 μCi/孔）孵育30分钟。裂解细胞后，闪烁计数器计数放射性。 2. 中性粒细胞3D迁移实验（文献[2]）： - 细胞分离：Ficoll-Paque密度梯度离心分离人外周血中性粒细胞，用RPMI 1640 + 0.1% BSA重悬。 - 处理：与PIK-294（100-1000 nM）或AS-605240（100 nM）孵育30分钟，再接种于含CXCL8（100 ng/mL，下室）的3D胶原凝胶（1.5 mg/mL）中。 - 检测：4小时后，相差显微镜测量每组100个细胞的迁移距离，计算迁移速度（距离/时间）[1] [2][1][2] |
| 动物实验 |
1. 胰岛素激发小鼠实验方案（参考文献[1]）：- 动物：雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄），每组6只；适应环境7天（12小时光照/12小时黑暗，自由摄食/饮水）；实验前禁食6小时（可饮水）。- 药物制备：PIK-294溶于10% DMSO + 90% PEG400溶液中（超声处理5分钟以溶解）。- 给药：在注射胰岛素（1 U/kg，腹腔注射，溶于生理盐水）前1小时，腹腔注射50 mg/kg PIK-294（10 μL/g体重）。对照组注射10% DMSO + 90% PEG400溶液。- 检测：胰岛素注射后15分钟，处死小鼠；取肝脏和白色脂肪组织进行Western blot（p-AKT）分析。 1. 小鼠腹膜炎模型（参考文献[2]）：- 动物：雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄），每组5只；适应环境7天。- 药物配制：PIK-294溶于10% DMSO + 90% PEG400；AS-605240（PI3Kγ抑制剂）溶于相同溶剂。- 给药：腹腔注射50 mg/kg PIK-294（或AS-605240），1小时后腹腔注射1 mL硫代乙醇酸盐肉汤（4% w/v）。对照组仅注射溶剂。- 评估：注射硫代乙醇酸盐24小时后，用5 mL PBS进行腹腔灌洗；灌洗液离心，细胞重悬于PBS中。流式细胞术检测中性粒细胞计数（Ly6G+CD11b+抗体染色）[1]
[2][1][2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外毒性（参考文献[1]、[2]）：- 3T3-L1脂肪细胞、人肌管细胞和中性粒细胞：PIK-294浓度高达1000 nM时未显示非特异性细胞毒性（LDH释放<10%）；台盼蓝排除试验显示，暴露24小时后细胞存活率>90%。2. 体内毒性（参考文献[1]、[2]）：- 小鼠（腹腔注射50 mg/kg PIK-294，持续24小时）：无死亡或异常行为（共济失调、嗜睡）；体重与溶剂对照组相比无变化。血清ALT/AST（肝脏）和肌酐（肾脏）均在正常范围内（n=3，未报告统计数据）。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. 作用机制：PIK-294 是一种选择性 PI3Kα 抑制剂，它与 PI3Kα 催化亚基 p110α 的 ATP 结合口袋结合，阻断 PI3Kα 介导的 PIP₂ 磷酸化为 PIP₃。这会抑制下游 AKT 的激活，从而破坏代谢组织（脂肪、肝脏、肌肉）中的胰岛素信号传导（葡萄糖摄取、GLUT4 转位），并且对 PI3Kγ 依赖的中性粒细胞迁移没有影响。[1] 2. 研究用途：- 文献[1]：PIK-294 可作为一种药理学工具，用于验证 PI3Kα 在胰岛素介导的葡萄糖稳态中的作用，证实 p110α 是胰岛素信号传导中的关键 PI3K 亚型。 - 文献[2]：PIK-294 被用作阴性对照，以区分 PI3Kα 和 PI3Kγ 的功能，证明 PI3Kγ（而非 PI3Kα）对于中性粒细胞在 3D 胶原凝胶中的迁移和体内浸润至关重要[1]
[2] 3. 局限性： - 未报告临床开发数据（例如，FDA 状态）；PIK-294 是一种研究工具，而非治疗候选药物。 - 缺乏 ADME 或长期毒性数据，限制了其在慢性体内研究中的应用[1] [2][1][2] |
| 分子式 |
C28H23N7O2
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|---|---|
| 分子量 |
489.5279
|
| 精确质量 |
489.191
|
| 元素分析 |
C, 68.70; H, 4.74; N, 20.03; O, 6.54
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| CAS号 |
900185-02-6
|
| 相关CAS号 |
900185-02-6
|
| PubChem CID |
24905149
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
790.4±70.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
431.8±35.7 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±2.9 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.753
|
| LogP |
3.34
|
| tPSA |
124.74
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
37
|
| 分子复杂度/Complexity |
870
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O=C1N(C2C(C)=CC=CC=2)C(CN2C3C(=C(N)N=CN=3)C(C3C=C(O)C=CC=3)=N2)=NC2C=CC=C(C1=2)C
|
| InChi Key |
WFSLJOPRIJSOJR-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C28H23N7O2/c1-16-7-3-4-12-21(16)35-22(32-20-11-5-8-17(2)23(20)28(35)37)14-34-27-24(26(29)30-15-31-27)25(33-34)18-9-6-10-19(36)13-18/h3-13,15,36H,14H2,1-2H3,(H2,29,30,31)
|
| 化学名 |
2-((4-amino-3-(3-hydroxyphenyl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)methyl)-5-methyl-3-(o-tolyl)quinazolin-4(3H)-one
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| 别名 |
PIK-294; PIK294; PIK 294;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~98 mg/mL (200.2 mM)
Water: <1 mg/mL Ethanol: <1 mg/mL; |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0428 mL | 10.2139 mL | 20.4278 mL | |
| 5 mM | 0.4086 mL | 2.0428 mL | 4.0856 mL | |
| 10 mM | 0.2043 mL | 1.0214 mL | 2.0428 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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Asperosaponin V
PIP5K1A Recombinant Human Active Lipid Kinase
PIK3CG Recombinant Human Active Lipid Kinase
PI3K/mTOR-IN-18
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