| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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描述：PIK-93 是一种苯基噻唑类似物，是一种新型、高效且选择性的 PI4K (PI4KIIIβ) 抑制剂，具有抗病毒作用（抗环戊烯类病毒活性）。它对 PI4K (PI4KIIIβ) 的 IC50 为 19 nM，对 PI3Kα 的 IC50 为 39 nM。
| 靶点 |
PI4KIIIβ (IC50 = 19 nM); PI4KIIIα (IC50 = 1.1 μM); p110γ (IC50 = 16 nM); p110α (IC50 = 39 nM); p110δ (IC50 = 120 nM); p110β (IC50 = 590 nM); PI3KC2β (IC50 = 140 nM); PI3KC2α (IC50 = 16 μM); hsVPS34 (IC50 = 320 nM); DNA-PK (IC50 = 64 nM); ATM (IC50 = 490 nM); mTORC1 (IC50 = 1.38 μM); ATR (IC50 = 17 μM)
PI4KIIβ (IC50 = 19 nM) [1]; PI3Kα and PI3Kγ (isoform-selective; complete inhibition of PI3Kγ-dependent Akt phosphorylation in cells at 0.5-1 μM) [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
PIK-93 抑制 PI3Kγ 和 PI4KIIIβ，IC50 值分别为 16 nM 和 19 nM。PIK-93 也抑制其他 PI3K 家族成员，包括 PI3Kα、β 和 δ，IC50 值分别为 39 nM、0.59 μM 和 0.12 μM。即使浓度高达 10 M，PIK-93 对其他一系列激酶也没有明显的抑制作用[1]。PIK-93 (0.5 M-1 M) 可降低分化的 HL60 (dHL60) 细胞经均匀 f-Met-Leu-Phe (fMLP) 处理后形成的细胞前缘的巩固性和稳定性。PIK-93 会改变 fMLP 依赖的总 F-肌动蛋白积累，但不会改变其总量。 PIK-93 可提高细胞在 fMLP 梯度下的转向频率，同时降低趋化指数[2]。在 COS-7 细胞中，PIK-93 (250 nM) 可有效阻止 FL-Cer 和 CERT-PH 结构域在 Golgi 体中的积累。相同浓度的 PIK-93 也可显著降低内源性神经酰胺在 [3H]丝氨酸标记下转化为鞘磷脂的能力。这些结果表明，PI4KIIIβ 在鞘磷脂合成的调控以及内质网和 Golgi 体之间神经酰胺的转运中起着关键作用[3]。PIK-93 (300 nM) 可抑制 T6.11 细胞中 Ca2+ 的净内流以及卡巴胆碱诱导的 TRPC6 向质膜的转位[4]。根据最近的一项研究，PIK-93 具有抗肠道病毒特性，因为它能抑制脊髓灰质炎病毒 (PV) 和丙型肝炎病毒 (HCV) 的复制，其 EC50 值分别为 0.14 µM 和 1.9 µM [5]。在 dHL60 细胞中，用 PIK-93 (0.5-1 μM) 处理可完全抑制 fMLP 刺激的 Akt 磷酸化，Akt 是 PIP3 的下游效应分子 [2]。PIK-93 会损害细胞前缘对均匀 fMLP 的响应，导致形成多个瞬时伪足，而不是单个稳定的前沿 [2]。在使用 fMLP 梯度进行的趋化性实验中，PIK-93 显著降低了 dHL60 细胞的趋化指数 (CI)，并使细胞的转向频率增加三倍，导致细胞运动轨迹不规则，方向稳定性降低。朝向吸引源[2]。
尽管有这些影响，但PIK-93不会显著降低 fMLP 诱导的总 F-肌动蛋白积累[2]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
不适用
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| 酶活实验 |
采用标准薄层色谱（TLC）脂质激酶活性测定法计算IC50值。进行激酶反应时，需配制反应混合物，其中包含激酶、PIK-93（终浓度为2% DMSO）、缓冲液（25 mM HEPES，pH 7.4，10 mM MgCl2）和新鲜超声处理的磷脂酰肌醇（100 µg/mL）。反应起始浓度为10或100 µM，并在室温下进行20分钟。反应起始物为含有10 µCi γ-32P-ATP的ATP。反应结束后，加入105 µL 1N HCl和160 μL CHCl3:MeOH (1:1)混合溶液终止反应，以便进行TLC分析。将有机相转移至新的试管中，转移过程使用预先涂覆有氯仿（CHCl3）的凝胶上样移液器吸头，转移前需将双相混合物涡旋振荡并短暂离心。将该提取物点样于薄层色谱（TLC）板上，并用正丙醇：1M乙酸（65:35）溶液展开，展开时间为3-4小时。干燥后，将TLC板置于磷光成像仪屏幕上进行定量分析。通常，PIK-93的激酶活性评估采用10-12个浓度的稀释倍数，即从最高浓度100 μM稀释两倍。为了确定PIK-93的选择性，我们使用纯化的重组PI3K家族成员（15种酶）和其他激酶进行了体外激酶活性测定。 IC50 值是通过将激酶与不同浓度的抑制剂和 ATP 孵育，然后定量产物生成量来测定的 [1]。
PIK-93 在脂质激酶活性测定中，使用纯化的酶，发现其能有效抑制 PI4KIIβ，IC50 值为 19 nM [1]。 PIK-93 与人 p110γ 结合的晶体结构以 2.5-2.6 Å 的分辨率测定。重组人 p110γ（残基 144-1102，带有 C 端 His6 标签）从杆状病毒感染的 Sf9 细胞中纯化。晶体在 17°C 下使用悬滴气相扩散法生长，并用抑制剂浸泡。衍射数据在同步辐射装置上收集。该结构揭示了PIK-93与Val882（主链酰胺和羰基）和Asp964（侧链）之间的氢键[1]。 |
| 细胞实验 |
对于肌动蛋白染色，将dHL60细胞悬浮于PIK-93或溶剂中预孵育40分钟，在室温下以2000 rpm离心5分钟（J6-B离心机），重悬于含有相同浓度相应试剂的mHBSS缓冲液中，然后使其粘附于纤连蛋白包被的盖玻片上3分钟。罗丹明-鬼笔环肽（10单位/mL）用于对用3.7% PFA固定15分钟的细胞进行染色。dHL60细胞用DMSO分化后，悬浮于PIK-93（0.5-1 μM，DMSO储备液，最终DMSO浓度为1.0%）中，在室温下预孵育40分钟。将细胞离心后，重悬于含有相同抑制剂浓度的培养基中，使其黏附于纤连蛋白包被的盖玻片上，并用 100 nM fMLP 刺激 3 分钟。刺激后，用 3.7% 多聚甲醛固定细胞，并用罗丹明-鬼笔环肽染色以观察 F-肌动蛋白的分布 [2]。
为了进行极性活细胞成像，将表达 YFP-肌动蛋白的 dHL60 细胞用 PIK-93 (1 μM) 预孵育 40 分钟，然后接种于纤连蛋白包被的盖玻片上，并用浓度均匀的 100 nM fMLP 刺激。使用配备冷却 CCD 相机的倒置显微镜，以 1 分钟的间隔采集延时图像 [2]。 使用含有 fMLP 的微量移液器建立 fMLP 梯度进行趋化性实验。将预先用 PIK-93 (0.5 μM) 孵育的细胞置于纤连蛋白包被的盖玻片上，并追踪其迁移轨迹 25 分钟。计算趋化指数（正确方向的位移除以路径长度）和转向频率（连续 2 分钟向量之间的偏差 ≥60°）[2]。 为了评估 Akt 磷酸化，将 dHL60 细胞预先用 PIK-93 (0.5-1 μM) 孵育 40 分钟，然后用 100 nM fMLP 刺激 1 分钟。制备细胞裂解液，并使用抗磷酸化 Akt (Thr308) 抗体进行 SDS-PAGE 和 Western 印迹分析 [2]。 |
| 动物实验 |
不适用；
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
PIK-93是PI3K抑制剂组中极性最强的抑制剂之一，其计算的logP(CLogP)为1.69[1]。
X射线晶体学研究表明，PIK-93与ATP结合口袋中的p110γ结合，形成三个氢键：与Val882的骨架酰胺和羰基以及Asp964的侧链形成氢键。与PIK-39等选择性抑制剂不同，PIK-93呈扁平构象，并深入到更深的亲和力口袋中[1]。PIK-93是PI4KIIβ的强效抑制剂（IC50=19 nM），也是首个强效合成PI4激酶抑制剂，用于解析PI4-K亚型在钙信号传导中的作用[1]。在中性粒细胞趋化性中，PIK-93（与PIK-90一起）表明PI3Kγ通过激活Cdc42促进前向性（伪足稳定性）和后向性（RhoA依赖性肌动蛋白收缩），从而维持稳定的极性[2]。 |
| 分子式 |
C14H16N3O4S2CL
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|---|---|
| 分子量 |
389.87754
|
| 精确质量 |
389.027
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| 元素分析 |
C, 43.13; H, 4.14; Cl, 9.09; N, 10.78; O, 16.41; S, 16.45
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| CAS号 |
593960-11-3
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| 相关CAS号 |
593960-11-3;
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| PubChem CID |
6852167
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.48 g/cm3
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| 沸点 |
611.8ºC at 760 mmHg
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| 闪点 |
323.8ºC
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| LogP |
4.122
|
| tPSA |
148.5
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
543
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CC(NC1=NC(C)=C(S1)C2=CC=C(C(S(=O)(NCCO)=O)=C2)Cl)=O
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| InChi Key |
JFVNFXCESCXMBC-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C14H16ClN3O4S2/c1-8-13(23-14(17-8)18-9(2)20)10-3-4-11(15)12(7-10)24(21,22)16-5-6-19/h3-4,7,16,19H,5-6H2,1-2H3,(H,17,18,20)
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| 化学名 |
N-(5-(4-chloro-3-(N-(2-hydroxyethyl)sulfamoyl)phenyl)-4-methylthiazol-2-yl)acetamide
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| 别名 |
PIK-93; PIK93; PIK 93
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~78 mg/mL (200.1 mM)
Water: <1 mg/mL Ethanol: <1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 4.55 mg/mL (11.67 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 45.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 30% PEG400+0.5% Tween80+5%Propylene glycol:30mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5649 mL | 12.8245 mL | 25.6489 mL | |
| 5 mM | 0.5130 mL | 2.5649 mL | 5.1298 mL | |
| 10 mM | 0.2565 mL | 1.2824 mL | 2.5649 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Asperosaponin V
PIP5K1A Recombinant Human Active Lipid Kinase
PIK3CG Recombinant Human Active Lipid Kinase
PI3K/mTOR-IN-18
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
