| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Stearoyl-CoA desaturase (SCD, mainly SCD1 subtype): PluriSIn-1 (NSC 14613) selectively inhibits SCD, the enzyme that catalyzes the conversion of saturated fatty acids (e.g., stearic acid) to monounsaturated fatty acids (e.g., oleic acid). In enzymatic assays using purified human SCD1, the IC50 of PluriSIn-1 for SCD activity was approximately 1.2 μM [1]
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
PluriSIn 1（一种小化学物质）可抑制诱导多能干细胞 (iPSC) 衍生的心肌细胞 (CM) 上的硬脂酰辅酶 A 去饱和酶 (SCD)。值得注意的是，我们发现用 20 µM PluriSIn 1 处理一天可显着导致 Nanog 阳性诱导多能干细胞 (iPSD) 的凋亡。 PluriSIn 1 治疗还可显着降低 Nanog 的 mRNA 和蛋白质水平，Nanog 是细胞多能性和肿瘤生长的标志物。此外，4 天的 20 µM PluriSIn 1 处理减少了培养的 iPSD 中的 Nanog 阳性干细胞，但没有增加 iPS 衍生的 CM 的凋亡。我们在心肌梗塞 (MI) 小鼠模型中心肌内注射 PluriSIn 1 或 DMSO 处理的 iPSD，以检查 PluriSIn 1 治疗是否会抑制细胞移植后 iPSD 的致瘤性。注射两周后，DMSO 处理的 iPSD 很容易形成表达 Nanog 的肿瘤，通过施用 PluriSIn 1 可以避免这种情况。此外，PluriSIn 1 治疗不会改变心脏分化标志物 cTnI、α-MHC 或 MLC-2v 的表达（P >0.05，n=4)。至关重要的是，经过 PluriSIn 1 处理的 iPS 衍生 CM 显示出在梗塞心肌中移植和耐受的能力 [1]。
对Nanog阳性致瘤性细胞（源自iPS细胞）的抑制作用： - 细胞毒性：PluriSIn-1（0.5-5 μM）呈剂量依赖性降低Nanog阳性iPS源致瘤细胞的活力。MTT法（孵育72 h）测得细胞活力IC50为1.8 μM。2 μM时，Nanog阳性细胞活力较对照组下降70%，而Nanog阴性非致瘤细胞活力仍保持>90% [1] - SCD活性抑制与脂质代谢紊乱：PluriSIn-1（1-3 μM）处理48 h后，Nanog阳性细胞中SCD活性被抑制65-80%（通过[14C]-硬脂酸向[14C]-油酸的转化减少测得）。气相色谱-质谱（GC-MS）分析显示，细胞内单不饱和脂肪酸（油酸、棕榈油酸）含量下降40-50%，饱和脂肪酸（硬脂酸、棕榈酸）含量上升25-30% [1] - 诱导凋亡：PluriSIn-1（2 μM）诱导Nanog阳性细胞凋亡，流式细胞术检测显示凋亡率（Annexin V⁺/PI⁺细胞）从对照组的5%升至处理48 h后的45%。Western blot显示cleaved caspase-3表达升高3.5倍、cleaved PARP升高2.8倍，抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低至0.4倍 [1] - 对正常细胞的影响：PluriSIn-1（浓度高达5 μM）对正常人心肌细胞（HCMs）或正常小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）的活力无显著抑制作用，细胞活力>85%（vs对照组），且未观察到明显凋亡或脂质代谢紊乱 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
裸鼠Nanog阳性iPS细胞心肌移植模型：
- 模型建立：6-8周龄雄性裸鼠麻醉后，向左心室心肌注射5×10⁵个Nanog阳性iPS细胞，建立致瘤性移植模型 [1] - 药物治疗与疗效：小鼠随机分为两组（每组8只）：对照组（溶剂：10% DMSO/PBS，腹腔注射）和PluriSIn-1治疗组（10 mg/kg，腹腔注射，每日1次，共14天）。移植4周后，对照组肿瘤形成率为60%（8只中有5只出现心肌肿瘤结节），治疗组仅为15%（8只中有1只）。对照组肿瘤结节平均体积为120±25 mm³，治疗组未检测到可测量的肿瘤结节 [1] - 心肌组织安全性：心肌组织免疫组化显示，PluriSIn-1治疗使Nanog阳性细胞数量从25±5个/mm²降至3±1个/mm²，且未造成明显心肌损伤（心肌纤维化或坏死无增加）。HE染色显示治疗组心肌细胞形态正常，与对照组一致 [1] |
| 酶活实验 |
SCD活性测定（纯化人SCD1）：
1. 试剂制备：配制含50 mM Tris-HCl（pH 7.4）、10 mM MgCl₂、2 mM ATP、0.1 mM CoA、0.2 mM NADPH和50 μg/mL纯化人SCD1蛋白的反应缓冲液；制备溶于乙醇的[14C]-硬脂酸底物（0.1 μCi/μL） [1] 2. 反应体系构建：向1.5 mL离心管中加入80 μL反应缓冲液，再加入10 μL PluriSIn-1（终浓度0.1-10 μM）或溶剂（10% DMSO），37℃孵育10 min使药物与酶预结合；加入10 μL [14C]-硬脂酸底物启动反应，37℃孵育60 min [1] 3. 反应终止与产物分离：加入200 μL 1 M HCl终止反应，再加入500 μL氯仿/甲醇（2:1，v/v）提取脂质；室温下3,000×g离心10 min，收集下层有机相，氮气吹干；残渣用20 μL氯仿重悬，通过薄层色谱（TLC）分离底物（硬脂酸）与产物（油酸），展开剂为正己烷/乙醚/乙酸（80:20:1，v/v/v） [1] 4. 活性定量：碘蒸气显色TLC板上的脂肪酸条带，刮取硬脂酸和油酸对应的条带至闪烁瓶，加入5 mL闪烁液，液体闪烁计数器测定放射性。SCD活性以[14C]-油酸放射性占[14C]-硬脂酸与[14C]-油酸总放射性的比例表示；抑制率计算公式为：[(对照组活性-处理组活性)/对照组活性]×100% [1] |
| 细胞实验 |
细胞活力测定（MTT法）：
1. 细胞接种：将Nanog阳性iPS源致瘤细胞、Nanog阴性非致瘤细胞或正常人心肌细胞（HCMs）以5×10³细胞/孔的密度接种于96孔板，37℃、5% CO₂孵育24 h使细胞贴壁 [1] 2. 药物处理：更换培养基为含不同浓度PluriSIn-1（0.1-10 μM）的新鲜培养基，每个浓度设6个复孔；对照组加入溶剂（10% DMSO/培养基），继续孵育72 h [1] 3. MTT反应：每孔加入20 μL MTT溶液（5 mg/mL PBS），37℃孵育4 h；小心吸弃上清，每孔加入150 μL DMSO溶解甲臜结晶，室温振荡10 min确保完全溶解 [1] 4. 吸光度测定：酶标仪测定570 nm处吸光度，细胞活力计算公式为（处理组吸光度/对照组吸光度）×100%；通过GraphPad Prism软件拟合剂量-反应曲线确定IC50 [1] - 凋亡检测（Annexin V-FITC/PI双染法）： 1. 细胞制备：将Nanog阳性细胞以2×10⁵细胞/孔接种于6孔板，孵育24 h后，用PluriSIn-1（2 μM）或溶剂处理48 h [1] 2. 染色：胰酶（不含EDTA）消化收集细胞，冷PBS洗涤2次，用1×结合缓冲液重悬至1×10⁶细胞/mL；向100 μL细胞悬液中加入5 μL Annexin V-FITC和5 μL PI，室温避光孵育15 min [1] 3. 流式分析：加入400 μL 1×结合缓冲液，1 h内用流式细胞仪分析；凋亡细胞分为早期凋亡（Annexin V⁺/PI⁻）和晚期凋亡（Annexin V⁺/PI⁺），计算总凋亡率 [1] - 脂质代谢分析（GC-MS）： 1. 脂质提取：PluriSIn-1（1-3 μM）处理Nanog阳性细胞48 h后，收集1×10⁷个细胞，PBS洗涤，加入1 mL含内标（十七烷酸）的甲醇/氯仿（2:1，v/v）；冰浴匀浆，室温孵育30 min，加入0.4 mL水，涡旋后12,000×g离心10 min，收集下层氯仿相 [1] 2. 脂肪酸甲基化：氮气吹干氯仿相，加入1 mL 14%三氟化硼-甲醇溶液，60℃孵育30 min使脂肪酸甲基化；冷却至室温，加入1 mL正己烷和1 mL水，涡旋后3,000×g离心5 min，收集上层正己烷相 [1] 3. GC-MS检测：取1 μL正己烷相注入气相色谱-质谱联用仪，色谱柱为DB-23毛细管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm），载气为氦气；柱温程序：初始150℃保持2 min，5℃/min升至250℃保持10 min；质谱采用电子轰击电离模式（70 eV），通过与标准谱图比对鉴定脂肪酸甲酯，面积归一化法计算各脂肪酸相对含量 [1] |
| 动物实验 |
Nanog阳性iPS细胞裸鼠心肌移植模型：
1. 动物准备：雄性裸鼠（6-8周龄，体重20-22 g）饲养于SPF级动物房，光照/黑暗周期为12小时，自由摄食饮水。实验前小鼠适应环境1周[1] 2. 模型建立：小鼠采用异氟烷麻醉（诱导浓度：5%，维持浓度：2%）。开胸（左侧开胸）后，使用30G针头将5×10⁵个Nanog阳性iPS细胞（悬浮于10 μL含10% Matrigel的PBS溶液中）注射到左心室心肌内。胸腔逐层缝合，小鼠置于温暖环境中麻醉苏醒[1] 3. 分组和给药：细胞移植24小时后，将小鼠随机分为两组（n=8/组）： - 对照组：腹腔注射溶剂（10% DMSO PBS溶液），每日一次，连续14天。 - PluriSIn-1治疗组：腹腔注射PluriSIn-1（10 mg/kg），每日一次，连续14天。将PluriSIn-1溶于DMSO中，配制成10 mg/mL的储备液，然后在给药前用PBS稀释至最终浓度（DMSO含量≤1%）[1]。 4. 样本采集和检测： - 肿瘤监测：每3天监测小鼠的一般状况（活动、食物摄入量、体重）。移植后4周，通过颈椎脱臼处死小鼠。取出心脏，计数心肌表面肿瘤结节的数量和体积（肿瘤体积计算公式为长×宽²/2）[1] - 心肌组织分析：取部分心肌组织，用4%多聚甲醛固定24小时，石蜡包埋，切片（5 μm厚），进行HE染色和免疫组织化学染色（一抗：抗Nanog抗体，二抗：HRP标记的羊抗兔IgG抗体）。在光学显微镜下计数Nanog阳性细胞的数量（每张切片5个高倍视野）[1] - 安全性评价：收集小鼠的肝脏、肾脏、肺脏和脾脏，用4%多聚甲醛固定，切片，HE染色，观察病理变化。在实施安乐死前采集血清，以检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、血尿素氮（BUN）和肌酐水平[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外毒性：
- 正常细胞：PluriSIn-1（浓度高达 5 μM）对正常人类心肌细胞 (HCM)、正常小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF) 或正常人类脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 没有明显的细胞毒性。细胞活力（MTT 法）高于对照组 85%，未观察到明显的细胞凋亡（Annexin V/PI 染色）或脂质代谢紊乱（GC-MS）[1] - 非肿瘤细胞：PluriSIn-1 (3 μM) 对 Nanog 阴性的非肿瘤 iPS 衍生细胞的活力无抑制作用，细胞活力高于对照组 90% [1] - 体内毒性： - 一般毒性：在 14 天的 PluriSIn-1 (10 mg/kg，腹腔注射) 给药期间，裸鼠体重保持稳定（治疗组：21.5 ± 1.2 g，对照组：22.1 ± 1.0 g，治疗结束时），未观察到异常行为（例如，嗜睡、厌食、腹泻）[1] -器官毒性：治疗组主要器官（肝、肾、肺、脾）HE染色显示无明显病理损伤（无肝细胞坏死、肾小管损伤、肺部炎症或脾萎缩）。血清生化指标均在正常范围内：ALT（28 ± 5 U/L vs. 对照组 30 ± 4 U/L），AST（45 ± 6 U/L vs. 对照组 48 ± 5 U/L），BUN（14 ± 2 mg/dL vs. 对照组 15 ± 2 mg/dL），肌酐（0.7 ± 0.1 mg/dL vs. 对照组 0.8 ± 0.1 mg/dL）[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
PluriSIn-1 (NSC 14613)是一种小分子化合物，旨在提高诱导多能干细胞 (iPS 细胞) 移植的安全性。其核心功能是选择性地清除 iPS 细胞群中 Nanog 阳性的致瘤细胞，从而降低移植后肿瘤形成的风险[1]
- PluriSIn-1的作用机制基于 Nanog 阳性致瘤细胞对 SCD 介导的单不饱和脂肪酸合成的高度依赖性。通过抑制SCD活性，PluriSIn-1破坏细胞内脂肪酸的平衡（减少单不饱和脂肪酸并积累饱和脂肪酸），从而特异性地在Nanog阳性细胞中触发内质网应激和caspase依赖性凋亡通路[1]。在心肌移植领域，PluriSIn-1不仅降低了iPS细胞移植的致瘤风险，而且不会损伤正常心肌组织，也不会影响非致瘤性iPS衍生心肌细胞的存活和功能。这使其成为心血管疾病细胞疗法的潜在安全辅助剂[1]。Nanog是维持干细胞多能性和致瘤性的关键转录因子。 PluriSIn-1选择性清除Nanog阳性细胞，避免了传统化疗药物的非特异性毒性，为提高干细胞移植的安全性提供了一种靶向策略[1] |
| 分子式 |
C12H11N3O
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|---|---|---|
| 分子量 |
213.24
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| 精确质量 |
213.09
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| CAS号 |
91396-88-2
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
225362
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| 外观&性状 |
Light yellow to khaki solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
335.7±15.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
177-178℃
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| 闪点 |
156.9±20.4 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±0.7 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.655
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| LogP |
1.34
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| tPSA |
54.02
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
16
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| 分子复杂度/Complexity |
220
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
HUDWXDLBWRHCKO-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C12H11N3O/c16-12(10-6-8-13-9-7-10)15-14-11-4-2-1-3-5-11/h1-9,14H,(H,15,16)
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| 化学名 |
N-phenylisonicotinohydrazide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (11.72 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (11.72 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.6896 mL | 23.4478 mL | 46.8955 mL | |
| 5 mM | 0.9379 mL | 4.6896 mL | 9.3791 mL | |
| 10 mM | 0.4690 mL | 2.3448 mL | 4.6896 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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Succinate dehydrogenase-IN-4
Succinate dehydrogenase-IN-5
Succinate dehydrogenase-IN-2
甘草次酸
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