| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
(R,S,R)-ML334 itself is the inactive isomer and does not bind to Keap1 or activate NRF2. The active isomer, ML334 (LH601A), targets the Kelch domain of Keap1 (Kelch-like ECH-associated protein 1). Keap1 is a substrate adaptor protein for the CUL3-based E3 ubiquitin ligase that targets NRF2 for ubiquitination and proteasomal degradation. ML334 is a potent, cell-permeable inhibitor of the Keap1-NRF2 protein-protein interaction, binding to Keap1 with a Kd of 1 microM and stimulating NRF2 expression and nuclear translocation. (R,S,R)-ML334 is the isomer of ML334 and can be used as an experimental control.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，(R,S,R)-ML334 是无活性异构体，在 NRF2 激活实验中没有显著活性。ML334（活性异构体）与 Keap1 的 Kelch 结构域结合，解离常数 (Kd) 为 1 uM，可刺激 NRF2 的表达和核转位，并诱导抗氧化反应元件 (ARE) 的活性。(R,S,R)-ML334 在细胞实验中作为重要的阴性对照，用于确认观察到的 NRF2 激活及其下游效应是由 Keap1 的特异性结合引起的，而非非特异性或脱靶效应。(R,S,R)-ML334 是 ML334 的无活性异构体。
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| 体内研究 (In Vivo) |
作为非活性异构体，(R,S,R)-ML334 不具有相关的体内活性。活性 S-对映异构体 ML334 (LH601A) 已在氧化应激和炎症的动物模型中进行了研究。ML334 通过激活 NRF2，诱导抗氧化酶（如 NQO1、HO-1 和 GCL）的表达，从而提供针对氧化损伤的保护。(R,S,R)-ML334 在这些研究中用作非活性对照，以验证活性化合物的具体作用机制。该化合物是 ML334 的异构体，可用作实验对照。
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| 酶活实验 |
Keap1-NRF2相互作用的体外生化检测方法是荧光偏振（FP）竞争性结合实验。将FITC标记的NRF2肽段（含ETGE基序）与重组Keap1 Kelch结构域蛋白混合。将待测化合物进行系列稀释后加入混合物中。测量偏振度。计算半数抑制浓度（IC50）。对于(R,S,R)-ML334，预计IC50值较高（结合力弱），而活性ML334的结合亲和力较高（Kd = 1 uM）。该化合物可用作对照。
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| 细胞实验 |
NRF2激活的细胞检测方法是一种报告基因检测。将HEK293细胞与抗氧化反应元件（ARE）-荧光素酶报告质粒和对照Renilla质粒共转染。24小时后，用不同浓度的ML334（活性）或(R,S,R)-ML334（非活性对照）处理细胞16-24小时。检测荧光素酶活性。对于活性ML334，预期ARE-荧光素酶活性会增加，而(R,S,R)-ML334应显示极低的活性，这证实了Keap1结合的立体特异性。(R,S,R)-ML334可用作实验对照。
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| 动物实验 |
(R,S,R)-ML334 不适用于体内治疗。活性化合物 ML334 (LH601A) 可用于氧化应激小鼠模型的研究，例如顺铂或缺血再灌注 (I/R) 诱导的急性肾损伤 (AKI) 模型。小鼠在损伤前或损伤后接受 ML334 治疗（5-20 mg/kg，腹腔注射或口服）。(R,S,R)-ML334 用作非活性对照。终点指标包括血清肌酐和尿素氮水平（用于评估肾功能）、肾脏组织学（H&E 染色、PAS 染色）、氧化应激标志物（丙二醛、谷胱甘肽水平）以及通过 qPCR 和 Western blot 检测肾组织中 NRF2 靶基因（NQO1、HO-1、GCLC）的表达。活性化合物可保护肾脏免受损伤，而 (R,S,R)-ML334 则无此作用。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
(R,S,R)-ML334 的分子量为 446.50，分子式为 C26H26N2O5。它是一种纯度≥98.5%的固体粉末，可溶于 DMSO（例如，10 mM 储备液）。在体内研究中，活性成分 ML334 可配制成多种载体，例如 10% DMSO、40% PEG300、5% Tween-80 和 45% 生理盐水，或 0.5% CMC-Na。活性成分 ML334 的药代动力学特性（半衰期、生物利用度）已有报道；其在啮齿动物中具有良好的口服生物利用度和中等的半衰期。(R,S,R)-ML334 预计具有类似的药代动力学特性，但无疗效。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
作为NRF2激活剂的非活性异构体，(R,S,R)-ML334预计毒性低于活性化合物。活性NRF2激活剂ML334在动物研究中，治疗剂量下通常耐受性良好。由于(R,S,R)-ML334不激活NRF2，因此不太可能产生活性化合物的靶向效应，包括NRF2激活和抗氧化酶上调。应遵循处理小分子的标准安全预防措施，包括使用个人防护装备（手套、实验服、护目镜）。
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| 参考文献 |
[1]. Wen X, et al. Activation of NRF2 Signaling in HEK293 Cells by a First-in-Class Direct KEAP1-NRF2 Inhibitor. J Biochem Mol Toxicol. 2015 Jun;29(6):261-6.
[2]. Hu L, et al. Discovery of a small-molecule inhibitor and cellular probe of Keap1-Nrf2 protein-protein interaction. Bioorg Med Chem Lett. 2013 May 15;23(10):3039-43. |
| 其他信息 |
(R,S,R)-ML334 (CAS 1432065-33-2) 是 ML334 (LH601A) 的非活性立体异构体，ML334 是一种强效的、可透过细胞膜的转录因子 NRF2 激活剂。NRF2 是细胞抗氧化反应的主要调节因子，激活 NRF2 是治疗涉及氧化应激的疾病（例如慢性肾病、慢性阻塞性肺病和神经退行性疾病）的一种策略。ML334 可直接抑制 Keap1-NRF2 蛋白-蛋白相互作用，并以 1 μM 的 Kd 值与 Keap1 的 Kelch 结构域结合。这种技术（直接蛋白-蛋白相互作用抑制剂）代表了一类新型的 NRF2 激活剂，不同于萝卜硫素或巴多索隆甲酯等亲电激活剂。(R,S,R)-ML334 在研究中用作对照化合物，以验证立体选择性并确认靶向机制。它是一种严格意义上的研究用化学品，未经批准用于任何治疗用途。
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| 分子式 |
C26H26N2O5
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|---|---|
| 分子量 |
446.50
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| CAS号 |
1432065-33-2
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| 相关CAS号 |
ML334;1432500-66-7
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 100 mg/mL (223.96 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (11.20 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 50.0mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (11.20 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 50.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2396 mL | 11.1982 mL | 22.3964 mL | |
| 5 mM | 0.4479 mL | 2.2396 mL | 4.4793 mL | |
| 10 mM | 0.2240 mL | 1.1198 mL | 2.2396 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Lalistat 2
D-(-)-3-Phosphoglyceric acid disodium (3-Phospho-D-glyceric acid disodium)
STC-15
TSR-033
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