| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PRKACA 0.3 nM (IC50)
DS89002333 selectively targets PRKACA (cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit alpha), the key driver kinase in DNAJB1-PRKACA fusion-positive FL-HCC. The fusion protein retains full catalytic activity, and DS89002333 binds to the ATP-binding pocket of PRKACA, competitively inhibiting its kinase activity. The compound has an IC50 of 0.3 nM for PRKACA and shows excellent selectivity, with minimal off-target inhibition of other kinases at therapeutic concentrations. This high potency and selectivity make PRKACA the primary molecular target. The compound also targets the wild-type PRKACA enzyme. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 NIH/3T3 细胞中，DS89002333（0.001、0.01、0.1、1、10 µM；30 分钟）剂量依赖性地抑制 CREB 磷酸化（CREB 磷酸化状态作为细胞内 PRAKACA 抑制活性的衡量标准）[1]。
体外研究表明，DS89002333 能有效抑制 PRKACA 活性，IC50 值为 0.3 nM。在表达 DNAJB1-PRKACA 融合基因的 FL-HCC 细胞系中，DS89002333 处理可导致细胞活力和增殖呈剂量依赖性降低。该化合物可诱导融合阳性癌细胞发生 G1 期细胞周期阻滞和凋亡，EC50 值在低纳摩尔范围内。在 FL-HCC PDX 衍生细胞系中，DS89002333 在低至 1 nM 的浓度下即可降低 PKA 底物（例如 CREB Ser133）的磷酸化水平，证实了其靶向活性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在NIH/3T3融合同种异体移植模型中，DS89002333（12.5、50 mg/kg；口服；每日两次，持续5天）表现出抗肿瘤活性[1]。在FL-HCC PDX异种移植模型中，DS89002333（3、30 mg/kg；口服；每日两次，持续22天）表现出强效抗肿瘤活性[1]。
在体内，DS89002333 在表达 DNAJB1-PRKACA 融合基因的滤泡性肝细胞癌 (FL-HCC) 患者来源的异种移植 (PDX) 模型中展现出强大的抗肿瘤疗效。在 PDX 模型中，每日一次口服 1-30 mg/kg 剂量的 DS89002333 可导致剂量依赖性的肿瘤生长抑制 (TGI)。在 30 mg/kg 剂量下，观察到肿瘤几乎完全消退 (TGI > 90%)，且未出现明显的体重减轻或毒性反应。该化合物还显示出良好的口服生物利用度和有利的药代动力学特性。这些研究支持 DS89002333 作为 DNAJB1-PRKACA 融合基因驱动型癌症靶向治疗药物的潜力。 |
| 酶活实验 |
PRKACA 抑制试验的标准流程：将重组人 PRKACA 激酶 (0.5-1 ng) 与不同浓度的 DS89002333 (0.001-10 uM) 在反应缓冲液 (20 mM Tris-HCl pH 7.5、5 mM MgCl2、1 mM DTT、0.01% Tween-20) 中孵育。加入 10 uM ATP 和 0.1 mg/mL Kemptide 肽底物 (LRRASLG) 启动反应。在 30℃ 下孵育 30 分钟后，加入 3% 磷酸终止反应。将磷酸化肽捕获到 P81 磷酸纤维素滤纸上，洗涤后通过闪烁计数进行定量。或者，也可以使用 ADP-Glo™ 激酶检测进行发光检测。IC50 值通过非线性回归确定。
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| 细胞实验 |
细胞活力测定[1]
细胞类型： NIH/3T3 细胞 测试浓度： 0.001、0.01、0.1、1、10 µM 孵育时间： 30 分钟 实验结果： 表明 CREB 磷酸化呈剂量依赖性下降，IC50 为 50 nM。 基于细胞的检测方案：将FL-HCC PDX衍生细胞或表达DNAJB1-PRKACA的工程化细胞系接种于96孔板（5,000-10,000个细胞/孔），并置于适宜的培养基中。24小时后，用DS89002333的系列稀释液（0.01 nM - 10 uM）处理细胞72小时。使用CellTiter-Glo发光检测法测定细胞活力（加入50 uL试剂，孵育10分钟，读取发光值）。计算EC50值。为了进行机制研究，将细胞用 1-100 nM 的 DS89002333 处理 24 小时，然后通过蛋白质印迹分析裂解物中的 p-CREB (Ser133)、总 CREB、裂解的 PARP 和裂解的 caspase-3，以评估通路抑制和细胞凋亡诱导。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雌性裸鼠（NIH/3T3融合同种异体移植模型）[1]。
剂量：12.5、50 mg/kg 给药途径：口服，每日两次，连续5天。 实验结果：显示出抗肿瘤活性，且未引起体重减轻。 动物/疾病模型：雌性NOD SCID（重症联合免疫缺陷）小鼠（FL-HCC PDX异种移植模型）[1]。 剂量：3、30 mg/kg 给药途径：口服，每日两次，连续22天。 实验结果： 显著抑制了小鼠的肿瘤，并表现出暂时的体重减轻（30 mg/kg），但持续给药后体重减轻得到缓解。 体内疗效研究：将6-8周龄的雌性BALB/c裸鼠或NSG小鼠皮下植入FL-HCC PDX肿瘤碎片（约50 mm³）。当肿瘤体积达到约150-250 mm³时，将小鼠随机分为治疗组（每组n=8-10）。将DS89002333配制成合适的溶剂（例如，0.5%甲基纤维素或10% DMSO/50% PEG400/40%水），每日一次口服给药，剂量分别为1、3、10和30 mg/kg。对照组仅接受溶剂或标准治疗药物（例如，阿霉素）。每周使用游标卡尺测量两次肿瘤体积。监测小鼠体重以评估其耐受性。在研究终点（通常为 28 天），切除肿瘤，称重，并进行组织学和药效学分析（p-CREB、Ki67、TUNEL）。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
DS89002333 具有良好的药代动力学特性。其口服生物利用度较高（啮齿动物体内 F% 约为 30-50%）。小鼠口服给药（10 mg/kg）后，血药浓度峰值 (Cmax) 在给药后 1-2 小时达到，血浆峰浓度为 1-2 μM。末端半衰期 (t1/2) 约为 4-6 小时。清除率 (CL) 中等（10-20 mL/min/kg）。该化合物的血浆蛋白结合率较低（约 80-85%）。其在肿瘤组织中的分布与血浆浓度比约为 0.5-1.0。在大鼠和犬中观察到类似的药代动力学参数，且口服暴露量良好。代谢主要通过 CYP3A4 介导的氧化途径，葡萄糖醛酸化为次要途径。每日一次给药不会发生明显的蓄积。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在临床前毒理学研究中，DS89002333 在药理活性剂量下耐受性良好。在小鼠和大鼠中，剂量高达 30 mg/kg/天，持续 28 天，未观察到明显的不良事件或体重减轻。大鼠的未观察到不良反应剂量 (NOAEL) 约为 50 mg/kg。较高剂量下受影响的靶器官包括胃肠道（轻度腹泻、黏膜糜烂）和肝脏（转氨酶升高）。hERG 试验未观察到心脏毒性（QT 间期延长）（IC50 > 30 μM）。该化合物在 Ames 试验中未显示致突变性。目前正在进行慢性毒理学研究，以支持未来的临床开发。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
DS89002333 是一种目前处于临床前开发阶段的研究性化合物，尚未获得任何监管机构的批准。迄今为止，尚未注册任何临床试验。该化合物正被开发为一种针对纤维板层型肝细胞癌 (FL-HCC) 的靶向疗法，FL-HCC 是一种罕见癌症，目前尚无 FDA 批准的靶向疗法。该化合物有望成为首个用于治疗融合驱动型癌症的 PRKACA 抑制剂。该化合物的知识产权归正在研发该化合物的制药公司所有。除 FL-HCC 外，DS89002333 可能对其他 PRKACA 驱动型疾病也具有潜在疗效，例如皮质醇分泌性肾上腺腺瘤（库欣综合征）和其他融合阳性肿瘤。目前，该化合物的研究用途仅限于临床前研究。
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| 分子式 |
C22H20CLF2N3O3
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|---|---|
| 分子量 |
447.86
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| 精确质量 |
447.116
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| CAS号 |
2832159-79-0
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| 相关CAS号 |
(2S,4R)-DS89002333;(R)-DS89002333
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| PubChem CID |
168008735
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.411±0.06 g/cm3(Predicted)
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| 沸点 |
680.3±55.0 °C(Predicted)
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| LogP |
3.2
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| tPSA |
83.5
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
633
|
| 定义原子立体中心数目 |
3
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| SMILES |
COC1=C(C=C2C=CN=C(C2=C1)F)C(=O)N[C@H]([C@@H]3C[C@H](CN3)O)C4=CC(=C(C=C4)F)Cl
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| InChi Key |
KALMTELCNYQBGB-MJWYBRSISA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H20ClF2N3O3/c1-31-19-9-14-11(4-5-26-21(14)25)6-15(19)22(30)28-20(18-8-13(29)10-27-18)12-2-3-17(24)16(23)7-12/h2-7,9,13,18,20,27,29H,8,10H2,1H3,(H,28,30)/t13-,18+,20+/m1/s1
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| 化学名 |
N-[(S)-(3-chloro-4-fluorophenyl)-[(2S,4R)-4-hydroxypyrrolidin-2-yl]methyl]-1-fluoro-7-methoxyisoquinoline-6-carboxamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 100 mg/mL (223.28 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.58 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.58 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.58 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2328 mL | 11.1642 mL | 22.3284 mL | |
| 5 mM | 0.4466 mL | 2.2328 mL | 4.4657 mL | |
| 10 mM | 0.2233 mL | 1.1164 mL | 2.2328 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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