| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MAO-B 37.1 nM (IC50) AChE 31.8 nM (IC50)
MAO-B (monoamine oxidase B) and AChE (acetylcholinesterase). Ladostigil is a dual inhibitor with IC50 values of 37.1 uM for MAO-B and 31.8 uM for AChE. It is brain-selective for MAO inhibition and also exhibits neuroprotective, antioxidant, and anti-inflammatory properties. The compound contains an alkyne group that can undergo copper-catalyzed azide-alkyne cycloaddition. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
左氧氟沙星（1–10 µM）半酒石酸盐的神经保护作用包括阻止线粒体膜电位 (ψ) 的下降、降低细胞凋亡级联反应的强度以及减少氧化应激损伤引起的活性氧 (ROS) 的产生[2]。在人神经母细胞瘤 SK-N-SH 细胞中，伦替吉（1–10 µM）半酒石酸盐具有显著的神经保护作用，例如降低 Bad 和 Bax 基因及蛋白的表达、诱导 Bcl-2 的表达以及抑制 caspase-3 的激活[2]。
体外实验表明，拉多斯替吉对MAO-B和AChE具有中等强度的抑制作用。它还表现出神经保护活性，包括抑制caspase-3活化、诱导Bcl-2表达以及降低人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞中Bad和Bax基因及蛋白的表达（1-10 uM）。它能降低LPS激活的巨噬细胞中TNF-α的水平，表明其具有抗炎特性。拉多斯替吉还具有抗氧化活性，能降低神经元培养物中的氧化应激标志物水平。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在强迫游泳试验 (FST) 和高架十字迷宫 (EPM) 试验中，拉多斯替吉（17 mg/kg；每日口服，持续 6 周）半酒石酸盐可消除成年大鼠（从青春期到产前应激大鼠）的抑郁样行为和过度焦虑[4]。在物体识别试验中，拉多斯替吉（50 μmol/kg；单次口服）半酒石酸盐可恢复大鼠的情景记忆丧失[3]。
在体内，拉多斯替吉尔已在抑郁症和阿尔茨海默病动物模型中进行了研究。它具有抗炎特性，并能有效降低脂多糖（LPS）激活的巨噬细胞中肿瘤坏死因子α（TNF-α）的水平。拉多斯替吉尔具有神经保护功能，并有可能用于治疗轻度认知障碍（MCI）和空间记忆缺陷。它可口服，并可用于长期给药研究。 |
| 酶活实验 |
使用纯化酶进行拉多斯替吉的无细胞酶抑制试验。对于MAO-B抑制试验：将纯化的重组人MAO-B或大鼠肝线粒体MAO-B（5-10 ug蛋白）与不同浓度的拉多斯替吉半酒石酸盐（0.1-1000 uM）在50-100 mM磷酸钾缓冲液（pH 7.4）中于37℃孵育10-30分钟。加入MAO-B底物（犬尿胺50-200 uM、苄胺0.5-2 mM或酪胺100-500 uM），并在37℃下反应20-60分钟。加入冰冷的2 M NaOH或10% TCA终止反应。产物（4-羟基喹啉或苯甲醛）采用荧光法或分光光度法测定。MAO-B 的 IC50 为 37.1 uM。AChE 抑制实验：将纯化的电鳗 AChE 或人重组 AChE（0.5-2 U/mL）与不同浓度的拉多斯替吉（0.1-1000 uM）在 50-100 mM 磷酸盐缓冲液（pH 7.4 或 8.0）中于 25℃ 或 37℃ 孵育 10-30 分钟。进行 Ellman 法测定：加入底物乙酰硫代胆碱碘化物（0.5-1 mM）和 DTNB（5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)，0.3-0.5 mM），并在 412 nm 处测定 5-10 分钟内的吸光度。 AChE 的 IC50 为 31.8 uM。BuChE 选择性测定：以丁酰硫代胆碱为底物，采用类似方法测试丁酰胆碱酯酶（0.5-2 U/mL）。动力学测定：在固定抑制剂浓度下，改变底物浓度。抗氧化活性测定：进行 DPPH 自由基清除（0.1-1000 uM Ladostigil，30 分钟，517 nm 吸光度）、ABTS 自由基清除、FRAP（铁离子还原抗氧化能力）和 ORAC（氧自由基吸收能力）测定。抗炎活性测定：收集 LPS 激活的巨噬细胞（RAW 264.7 或原代小胶质细胞）培养上清液，并通过 ELISA 或比色法测定 TNF-α、IL-1β、IL-6 和 NO（Griess 法测定亚硝酸盐）。
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| 细胞实验 |
在细胞神经保护实验中，将人神经母细胞瘤SK-N-SH或SH-SY5Y细胞接种于96孔板（每孔20,000-40,000个细胞），并在添加10% FBS的DMEM培养基中培养24-48小时。将拉多斯替吉半酒石酸盐溶解于DMSO中（储备液浓度为10-100 mM），并用培养基稀释至终浓度为0.1-100 uM（终DMSO浓度≤0.1%）。在细胞活力实验中，用拉多斯替吉处理细胞24-72小时，并通过MTT法（0.5 mg/mL，4小时，570 nm吸光度）、CellTiter-Glo法（ATP发光法）或LDH释放法检测细胞活力。在神经保护实验中，细胞先用拉多斯替吉尔（1-10 uM）预处理24-48小时，然后暴露于毒性刺激物：H2O2（100-500 uM，4-24小时）、谷氨酸（1-10 mM，24小时）、β-淀粉样蛋白（1-10 uM，48小时）或星形孢菌素（0.1-1 uM，24小时）。在细胞凋亡实验中，收集细胞，用膜联蛋白V-FITC/PI染色，并通过流式细胞术进行分析。对于蛋白质印迹分析，细胞在含有蛋白酶/磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液中裂解，然后用探针检测裂解型caspase-3、裂解型PARP、Bcl-2、Bax和Bad（1-10 uM Ladostigil，24-48小时）。使用ImageJ软件进行密度分析。对于抗氧化活性测定，细胞用H2DCF-DA（10 uM，30分钟）处理，并在H2O2刺激后通过荧光（激发波长485 nm，发射波长530 nm）测量ROS水平。对于抗炎活性测定，小胶质细胞（BV-2或原代小胶质细胞）用Ladostigil（1-10 uM）处理1-2小时，然后用LPS（100 ng/mL-1 ug/mL）刺激6-24小时。收集条件培养基用于细胞因子ELISA检测（TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10）。收集细胞用于qPCR检测（iNOS、COX-2、TNF-α、IL-1β mRNA）或Western blot检测（iNOS、COX-2、NF-κB p65）。未提供神经保护和抗炎作用的IC50值；在1-10 uM浓度下，拉多斯替吉尔具有显著的神经保护活性。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型： 无病原体（SPF）SD（Sprague-Dawley）大鼠[4]
剂量： 17 mg/ kg 给药途径： 每日口服（加入饮用水中），持续 6 周 实验结果： 抑制脑内 MAO-A 和 MAO-B 活性 60% 以上。降低雄性和雌性产前应激（PS）大鼠在高架十字迷宫（EPM）中的过度焦虑，以及在强迫游泳试验（FST）中的抑郁样行为。 拉多斯替吉半酒石酸盐的体内动物研究通常使用雄性Sprague-Dawley大鼠（200-300 g）或C57BL/6小鼠（20-30 g）。该化合物配制于0.5%甲基纤维素或生理盐水中，每日一次通过灌胃（1-50 mg/kg）或腹腔注射（1-30 mg/kg）给药，持续7-28天。对于阿尔茨海默病模型：（1）东莨菪碱诱导的记忆缺陷模型（急性）：在行为测试前15-30分钟腹腔注射东莨菪碱（1-2 mg/kg）以诱导胆碱能缺陷。在给予东莨菪碱前30-60分钟口服或腹腔注射拉多斯替吉（1-20 mg/kg）。 (2) Aβ注射模型：通过立体定位手术将β淀粉样蛋白1-42（2-5 μg）注射到海马或侧脑室（ICV）。在Aβ注射前1-3天开始每日给予拉多斯替吉，并在注射后持续7-21天。(3) 转基因小鼠模型（例如，APPswe/PS1dE9、5xFAD、Tg2576）：3-12月龄的小鼠接受拉多斯替吉（1-20 mg/kg，每日口服）治疗2-6个月。抑郁症模型：(1) 强迫游泳试验（FST）：将大鼠放入装有水的圆柱体中（25℃，6分钟，测量最后4分钟的静止时间）。在试验前30-60分钟给予拉多斯替吉（1-20 mg/kg，口服或腹腔注射）。 （2）悬尾实验（TST）：将小鼠尾部悬吊6分钟，测量其不动时间。（3）慢性不可预测轻度应激（CUMS）：将大鼠暴露于应激方案（食物/水剥夺、笼子倾斜、夜间光照等）3-6周；在应激期间给予拉多斯替吉（1-20 mg/kg，每日口服）。神经保护研究：MPTP帕金森病模型（MPTP 20-30 mg/kg，腹腔注射，连续5天）——在MPTP给药前3-7天开始给予拉多斯替吉（1-20 mg/kg，每日口服），并持续7-14天。行为学评估：莫里斯水迷宫（MWM）——隐藏平台任务（每天4-6次，持续4-5天）和探针试验（60秒，无平台）。新物体识别（NOR）——习得（2个相同的物体，5-10分钟）和保持（延迟2-24小时后）。被动回避（穿过或下行）——进入暗室的潜伏期或下行的潜伏期。Y迷宫自发交替——交替率（%）=（交替次数）/（总进入次数 - 2）× 100。实验结束时，对脑匀浆（海马、皮层、纹状体）进行分析，检测乙酰胆碱酯酶（AChE）活性（Ellman法）、单胺氧化酶B（MAO-B）活性（犬尿胺或苄胺法）以及神经递质水平（乙酰胆碱、多巴胺、血清素、去甲肾上腺素及其代谢物，采用高效液相色谱-电化学检测法）。同时检测氧化应激标志物（丙二醛、谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶）和炎症细胞因子（肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β、白细胞介素-6，采用酶联免疫吸附试验法）。组织学分析：将脑组织切片（40 μm）用甲酚紫染色以观察神经元形态，用硫黄素S或刚果红染色以观察淀粉样斑块，并用抗Aβ、抗磷酸化tau蛋白（AT8）和抗突触素抗体进行免疫组织化学染色。采集血液和脑组织样本，采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定化合物浓度。在这些模型中，口服拉多斯替吉尔（Ladostigil）1-20 mg/kg剂量有效。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
拉多斯替吉半酒石酸盐是一种口服有效的乙酰胆碱酯酶（AChE，IC50 31.8 μM）和单胺氧化酶-B（MAO-B，IC50 37.1 μM）双重抑制剂。该半酒石酸盐的分子量为694.77 Da。该化合物对MAO具有脑选择性抑制作用，在治疗剂量下对周围MAO的抑制作用极小。拉多斯替吉在肝脏代谢，可能通过水解生成其活性代谢物（类似于利伐斯的明）。该化合物含有一个炔基，可用于点击化学偶联反应。药代动力学参数：在啮齿动物中的口服生物利用度中等（估计为30-50%），血浆半衰期为1-2小时，脑/血浆比约为1-2。口服给药后30-60分钟内达到血浆峰浓度。该化合物能够穿过血脑屏障。基于半酒石酸盐的溶解度高于游离碱。详细的药代动力学参数尚未完全公布。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
另请参阅：拉多斯替吉尔（具有活性部分）。
拉多斯替吉尔已在阿尔茨海默病和抑郁症的临床前研究中进行评估，并已进入轻度认知障碍 (MCI) 和早期阿尔茨海默病的 II 期临床试验。然而，该药物的研发可能已终止。该化合物尚未获得 FDA 批准用于临床。在临床前研究中，啮齿动物口服拉多斯替吉尔剂量高达 30 mg/kg 时，耐受性良好，未见明显不良反应。较高剂量（>50 mg/kg）时，由于乙酰胆碱酯酶 (AChE) 抑制作用，可能出现轻微的胃肠道不适（恶心、肠蠕动减弱）。尚未有明显的肝毒性或心脏毒性报告。应采取标准安全预防措施。拉多斯替吉尔半酒石酸盐仅供研究使用，不得用于人体。CAS 编号：209394-46-7。 |
| 分子式 |
C16H20N2O2.1/2C4H6O6
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|---|---|
| 分子量 |
694.77
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| 精确质量 |
694.321
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| CAS号 |
209394-46-7
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| 相关CAS号 |
Ladostigil hydrochloride;209394-18-3;Ladostigil;209394-27-4
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| PubChem CID |
11607225
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 沸点 |
412.4ºC at 760 mmHg
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| 闪点 |
203.2ºC
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| 蒸汽压 |
5.19E-07mmHg at 25°C
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| LogP |
3.353
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| tPSA |
198.2
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
6
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
12
|
| 可旋转键数目(RBC) |
13
|
| 重原子数目 |
50
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| 分子复杂度/Complexity |
521
|
| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
CCN(C)C(=O)OC1=CC2=C(CC[C@H]2NCC#C)C=C1.CCN(C)C(=O)OC1=CC2=C(CC[C@H]2NCC#C)C=C1.[C@@H]([C@H](C(=O)O)O)(C(=O)O)O
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| InChi Key |
PRLVBVAJMQZMJN-OGOSNNLPSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/2C16H20N2O2.C4H6O6/c2*1-4-10-17-15-9-7-12-6-8-13(11-14(12)15)20-16(19)18(3)5-2;5-1(3(7)8)2(6)4(9)10/h2*1,6,8,11,15,17H,5,7,9-10H2,2-3H3;1-2,5-6H,(H,7,8)(H,9,10)/t2*15-;1-,2-/m111/s1
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| 化学名 |
(2R,3R)-2,3-dihydroxybutanedioic acid;[(3R)-3-(prop-2-ynylamino)-2,3-dihydro-1H-inden-5-yl] N-ethyl-N-methylcarbamate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O: 100 mg/mL (143.93 mM)
DMSO: 50 mg/mL (71.97 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (1.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 12.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (1.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 12.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (1.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4393 mL | 7.1966 mL | 14.3933 mL | |
| 5 mM | 0.2879 mL | 1.4393 mL | 2.8787 mL | |
| 10 mM | 0.1439 mL | 0.7197 mL | 1.4393 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Link: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01354691
Conditions:Alzheimer's Disease|Dementia|Memory Loss|Cognitive ImpairmentLink: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT01429623
Conditions:Mild Cognitive Impairment|DementiaInvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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