| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
AChE 31.8 μM (IC50) MAO-B 37.1 μM (IC50)
MAO-B (monoamine oxidase B) and AChE (acetylcholinesterase). Ladostigil hydrochloride is a dual inhibitor with IC50 values of 37.1 uM for MAO-B and 31.8 uM for AChE. It is brain-selective for MAO inhibition and also exhibits neuroprotective, antioxidant, and anti-inflammatory properties. The hydrochloride salt form has improved water solubility compared to the hemitartrate salt. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
盐酸拉多斯替吉（1–10 µM）的神经保护作用包括阻止线粒体膜电位（ψ）的下降、减少细胞凋亡级联反应以及限制氧化应激损伤引起的活性氧（ROS）生成[2]。盐酸拉多斯替吉（1–10 µM）的显著神经保护作用包括促进Bcl-2的表达、抑制caspase-3的激活以及降低人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞中Bad和Bax基因及蛋白的表达[2]。
体外实验表明，盐酸拉多斯替吉对MAO-B和AChE的抑制效力与半酒石酸盐相当（IC50分别为37.1 uM和31.8 uM）。它具有神经保护活性，包括抑制caspase-3活化、诱导Bcl-2表达以及降低人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞中Bad和Bax基因及蛋白的表达（1-10 uM）。它能降低LPS激活的巨噬细胞中TNF-α的水平，表明其具有抗炎特性。盐酸拉多斯替吉还具有抗氧化活性，能降低神经元培养物中的氧化应激标志物水平。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
对经历产前应激的大鼠进行高架十字迷宫（EPM）和强迫游泳试验（FST），从青春期到成年，可显著消除焦虑和类似抑郁的行为（17 mg/kg；每日口服，持续6周）[4]。在大鼠中，盐酸拉多斯替吉（50 μmol/kg；单次口服）可改善物体识别测试中丧失的情景记忆[3]。
在体内，盐酸拉多斯替吉已在抑郁症和阿尔茨海默病动物模型中进行了研究。它具有抗炎特性，并能有效降低脂多糖（LPS）激活的巨噬细胞中肿瘤坏死因子α（TNF-α）的水平。拉多斯替吉具有神经保护功能，并有可能用于治疗轻度认知障碍（MCI）和空间记忆缺陷。它可口服，并可用于长期给药研究。预计盐酸盐与半酒石酸盐具有相似的体内疗效。 |
| 酶活实验 |
拉多斯替吉盐酸盐的无细胞酶抑制试验与半酒石酸盐的试验方法类似。对于MAO-B抑制试验：将纯化的重组人MAO-B或大鼠肝线粒体MAO-B（5-10 ug蛋白）与不同浓度的拉多斯替吉盐酸盐（0.1-1000 uM）在50-100 mM磷酸钾缓冲液（pH 7.4）中于37℃孵育10-30分钟。加入MAO-B底物（犬尿胺50-200 uM、苄胺0.5-2 mM或酪胺100-500 uM），反应在37℃继续进行20-60分钟。反应通过加入冰冷的2 M NaOH或10% TCA终止。产物（4-羟基喹啉或苯甲醛）采用荧光法（激发波长 315 nm，发射波长 380 nm）或分光光度法（吸光度 250 nm）测定。MAO-B 的 IC50 为 37.1 uM。AChE 抑制实验：将纯化的电鳗 AChE 或人重组 AChE（0.5-2 U/mL）与不同浓度的盐酸拉多斯替吉（0.1-1000 uM）在 50-100 mM 磷酸盐缓冲液（pH 7.4 或 8.0）中于 25℃ 或 37℃ 孵育 10-30 分钟。进行Ellman法测定：加入底物乙酰硫代胆碱碘化物（0.5-1 mM）和DTNB（5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)，0.3-0.5 mM），并在5-10分钟内测量412 nm处的吸光度。AChE的IC50为31.8 uM。BuChE选择性测定：以丁酰硫代胆碱为底物，采用类似方法测试丁酰胆碱酯酶（0.5-2 U/mL）。动力学测定：在固定抑制剂浓度的情况下，改变底物浓度。抗氧化活性测定：进行DPPH自由基清除（0.1-1000 uM Ladostigil，30分钟，517 nm吸光度）、ABTS自由基清除、FRAP（铁离子还原抗氧化能力）和ORAC（氧自由基吸收能力）测定。对于抗炎试验：收集LPS激活的巨噬细胞（RAW 264.7或原代小胶质细胞）培养上清液，并通过ELISA或比色法测定TNF-α、IL-1β、IL-6和NO（通过Griess试验测定亚硝酸盐）。
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| 细胞实验 |
在细胞神经保护实验中，将人神经母细胞瘤SK-N-SH或SH-SY5Y细胞接种于96孔板中（每孔20,000-40,000个细胞），并在添加10% FBS的DMEM培养基中培养24-48小时。将盐酸拉多斯替吉溶于水或DMSO（10-100 mM储备液），然后用培养基稀释至终浓度为0.1-100 uM（如果使用DMSO，则终浓度≤0.1%）。在细胞活力实验中，用盐酸拉多斯替吉处理细胞24-72小时，并通过MTT法（0.5 mg/mL，4小时，570 nm吸光度）、CellTiter-Glo法（ATP发光法）或LDH释放法检测细胞活力。在神经保护实验中，细胞先用盐酸拉多斯替吉（1-10 uM）预处理24-48小时，然后暴露于毒性刺激物：H2O2（100-500 uM，4-24小时）、谷氨酸（1-10 mM，24小时）、β-淀粉样蛋白（1-10 uM，48小时）或星形孢菌素（0.1-1 uM，24小时）。在细胞凋亡实验中，收集细胞，用膜联蛋白V-FITC/PI染色，并通过流式细胞术进行分析。对于蛋白质印迹分析，细胞在含有蛋白酶/磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液中裂解，然后用1-10 uM盐酸拉多斯替吉处理24-48小时，检测裂解型caspase-3、裂解型PARP、Bcl-2、Bax和Bad蛋白。使用ImageJ软件进行密度分析。对于抗氧化活性测定，细胞用H2DCF-DA（10 uM，30分钟）处理，并在H2O2刺激后通过荧光（激发波长485 nm，发射波长530 nm）测定ROS水平。对于抗炎活性测定，小胶质细胞（BV-2或原代小胶质细胞）用1-10 uM盐酸拉多斯替吉处理1-2小时，然后用LPS（100 ng/mL-1 ug/mL）刺激6-24小时。收集条件培养基用于细胞因子ELISA检测（TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10）。收集细胞用于qPCR检测（iNOS、COX-2、TNF-α、IL-1β mRNA）或Western blot检测（iNOS、COX-2、NF-κB p65）。1-10 uM盐酸拉多斯替吉具有显著的神经保护活性。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型： 无病原体（SPF）SD（Sprague-Dawley）大鼠[4]
剂量： 17 mg/kg 给药途径： 每日口服（加入饮用水中），持续6周 实验结果： 抑制脑内MAO-A和MAO-B活性超过60%。降低雄性和雌性产前应激（PS）大鼠在EPM中的过度焦虑以及在FST中的抑郁样行为。 拉多斯替吉盐酸盐的体内动物研究采用雄性Sprague-Dawley大鼠（200-300 g）或C57BL/6小鼠（20-30 g）。该化合物溶于水、生理盐水或0.5%甲基纤维素溶液中，每日一次，通过灌胃（1-50 mg/kg）或腹腔注射（1-30 mg/kg）给药，疗程为7-28天。与半酒石酸盐相比，盐酸盐具有更高的水溶性，因此可以更简便地配制水性溶剂。行为学检测：阿尔茨海默病模型：（1）东莨菪碱诱导的记忆缺陷模型（急性）：在测试前15-30分钟腹腔注射东莨菪碱（1-2 mg/kg）；在东莨菪碱给药前30-60分钟口服或腹腔注射拉多斯替吉盐酸盐（1-20 mg/kg）。莫里斯水迷宫 (MWM) - 隐藏平台任务（每天 4-6 次试验，持续 4-5 天）和探测试验（60 秒，无平台）。新物体识别 (NOR) - 习得（2 个相同的物体，5-10 分钟）和保持（延迟 2-24 小时后）。被动回避（穿过或下行）- 进入暗室的潜伏期或下行的潜伏期。Y 型迷宫自发交替 - 交替率 = (交替次数)/(总进入次数 - 2) × 100。抑郁症模型：(1) 强迫游泳试验 (FST)：将大鼠放入装有水的圆柱体中（25℃，6 分钟，测量最后 4 分钟的静止时间）。试验前 30-60 分钟给予盐酸拉多斯替吉（1-20 mg/kg，口服或腹腔注射）。(2) 悬尾试验 (TST)：将小鼠悬尾 6 分钟，测量静止时间。实验结束时，对脑匀浆（海马、皮层、纹状体）进行生化终点分析，检测乙酰胆碱酯酶（AChE）活性（Ellman法）、单胺氧化酶B（MAO-B）活性（犬尿胺或苄胺法）以及神经递质水平（乙酰胆碱、多巴胺、血清素、去甲肾上腺素及其代谢物，采用高效液相色谱-电化学检测法HPLC-ECD）。同时检测氧化应激标志物（丙二醛、谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶）和炎症细胞因子（肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β、白细胞介素-6，采用酶联免疫吸附试验ELISA法）。组织学分析：将脑组织切片（40 μm）用甲酚紫染色以观察神经元形态，并用抗Aβ、抗磷酸化tau蛋白（AT8）和抗突触素抗体进行免疫组织化学染色。采集血液和脑组织样本，采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定化合物浓度。盐酸拉多斯替吉尔的有效剂量为 1-20 mg/kg 口服。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
盐酸拉多斯替吉（分子量 308.80 Da，分子式 C16H21ClN2O2）是拉多斯替吉的盐酸盐形式。与半酒石酸盐相比，其水溶性更佳，简化了体内研究的制剂配制。该化合物是一种口服有效的双重抑制剂，可抑制乙酰胆碱酯酶 (AChE)（IC50 31.8 μM）和单胺氧化酶-B (MAO-B)（IC50 37.1 μM）。拉多斯替吉对 MAO 具有脑选择性抑制作用，在治疗剂量下对周围 MAO 的抑制作用极小。该化合物在肝脏代谢，可能通过水解生成其活性代谢物（类似于利伐斯的明）。药代动力学参数：啮齿动物口服生物利用度中等（估计为 30-50%），血浆半衰期为 1-2 小时，脑/血浆比约为 1-2。口服给药后 30-60 分钟内达到血浆峰浓度。由于水溶性提高，其吸收可能比其他盐形式更稳定。详细的药代动力学参数尚未完全公布。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
拉多斯替吉尔已在阿尔茨海默病和抑郁症的临床前研究中进行评估，并已进入轻度认知障碍 (MCI) 和早期阿尔茨海默病的 II 期临床试验。该药物的研发可能已终止。该化合物尚未获得 FDA 批准用于临床。在临床前研究中，啮齿动物口服拉多斯替吉尔盐酸盐剂量高达 30 mg/kg 时，通常耐受性良好，未见明显不良反应。剂量较高（>50 mg/kg）时，由于乙酰胆碱酯酶 (AChE) 抑制作用，可能出现轻微的胃肠道不适（恶心、肠蠕动减弱）。尚未有明显的肝毒性或心脏毒性报告。应采取标准安全预防措施。拉多斯替吉尔盐酸盐仅供研究使用，不得用于人体。CAS 编号：209394-18-3。
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| 分子式 |
C16H21CLN2O2
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|---|---|
| 分子量 |
308.803143262863
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| 精确质量 |
308.129
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| CAS号 |
209394-18-3
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| 相关CAS号 |
Ladostigil hemitartrate;209394-46-7;Ladostigil;209394-27-4
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| PubChem CID |
23645314
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
41.6
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
21
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| 分子复杂度/Complexity |
387
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
N([C@@H]1CCC2=CC=C(OC(=O)N(C)CC)C=C12)CC#C.Cl
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| InChi Key |
PGISQOONVUOMIG-XFULWGLBSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H20N2O2.ClH/c1-4-10-17-15-9-7-12-6-8-13(11-14(12)15)20-16(19)18(3)5-2;/h1,6,8,11,15,17H,5,7,9-10H2,2-3H3;1H/t15-;/m1./s1
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| 化学名 |
[(3R)-3-(prop-2-ynylamino)-2,3-dihydro-1H-inden-5-yl] N-ethyl-N-methylcarbamate;hydrochloride
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.2383 mL | 16.1917 mL | 32.3834 mL | |
| 5 mM | 0.6477 mL | 3.2383 mL | 6.4767 mL | |
| 10 mM | 0.3238 mL | 1.6192 mL | 3.2383 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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