| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
DCN1-UBC12[1]
DCN1 (defective in cullin neddylation 1, Ki = 12 nM) and DCN2 (Ki = 10.4 nM). DI-591 is a selective inhibitor of the DCN1-UBC12 interaction. It targets a specific step in the neddylation pathway, preventing the activation of the E3 ligase cullin 3 (CUL3). |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
DI-591（化合物 44）与 DCN3、DCN4 或 DCN5 没有明显的蛋白结合。相反，它与 DCN1 和 DCN2 结合，Ki 值分别为 12 nM 和 10.4 nM。因此，DI-591 的选择性比重组人 DCN3-5 蛋白高 1000 倍以上，并且对重组人 DCN1 和 DCN2 蛋白表现出极高的结合亲和力 [1]。DI-591（化合物 44；0–10 μM；1 小时；KYSE70 细胞）与细胞内的 DCN1 和 DCN2 蛋白结合，并阻止 DCN1 和 UBC12 蛋白相互结合 [1]。用 DI-591（化合物 44；10 μM）处理 THLE2 细胞 24 小时后，NQO1 和 HO1 mRNA 水平显著升高，进而导致细胞上调 HO1 蛋白表达。有趣的是，DI-591 对 NRF2 mRNA 水平没有影响 [1]。DI-591 通过特异性阻断 cuLlin 3 的泛素化修饰，导致 NRF2 蛋白积累并激活其转录。基因敲低研究表明，cuLlin 3 的泛素化修饰主要受 DCN1 调控，而非 DCN2，也不受其他 cuLlin 蛋白调控。因此，DI-591 是一种极佳的探针化合物，可用于研究 cuLlin 3 CRL（CuLlin-RING E3 泛素连接酶）在生物过程和人类疾病中的功能 [1]。
DI-591 与 DCN1 和 DCN2 的结合 Ki 值分别为 12 nM 和 10.4 nM，对 DCN3-5 的选择性超过 1000 倍。它选择性抑制 CUL3 的 NEDDylation 修饰，而不影响其他 cullin 蛋白。在 KYSE70 食管癌细胞中，DI-591（浓度范围为 0-30 uM）可破坏 DCN1-UBC12 的结合，并提高 NQO1 和 HO1 的 mRNA 表达，进而导致 HO1 蛋白表达增加。DI-591 是一种用于研究 NRF2 通路的化学探针。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在皮下KYSE70异种移植小鼠模型中，DI-591（0.6 mg/kg或1.4 mg/kg，腹腔注射，每日一次，连续21天）可抑制肿瘤生长。尽管DI-591对肿瘤的初始生长速度没有影响，但它能降低最终肿瘤的体积和重量，并抑制肿瘤细胞增殖（通过Ki-67染色检测）。此外，DI-591还能显著提高肿瘤中NRF2蛋白的表达。
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| 酶活实验 |
DCN1 的活性通过其促进 NEDD8 从 E2 酶 UBC12 转移至 cullin 蛋白的能力来测定。将重组 DCN1 与 UBC12 在 NEDD8 和 ATP 存在下孵育。加入不同浓度（1-1000 nM）的 DI-591。终止反应后，使用针对 NEDD8 修饰的 cullin 蛋白的特异性抗体，通过蛋白质印迹法检测 NEDD8-cullin 复合物的形成。定量分析条带强度即可得到 IC50 或 Ki 值。
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| 细胞实验 |
Western Blot 分析[1]
细胞类型： KYSE70 细胞 测试浓度： 0 μM、1 μM、3 μM 或 10 μM 孵育时间： 1 小时 实验结果： 能有效结合细胞 DCN1 和 DCN2 蛋白。以剂量依赖的方式增强 DCN1 和 DCN2 蛋白的稳定性。RT-PCR[1] 细胞类型： THLE2 细胞 测试浓度： 10 μM 孵育时间： 24 小时 实验结果： 能显著提高 NQO1 和 HO1 的 mRNA 水平。 将 KYSE70 细胞用 DI-591（0-30 uM）处理 24 小时。收集细胞，并通过 Western blot 检测 neddylated CUL3 和总 CUL3 的水平，以确认靶点结合情况。采用 qPCR 和 Western blot 检测 NRF2 及其靶基因（HO1 和 NQO1）的表达水平。采用 MTT 法检测细胞增殖。使用荧光探针 DCFH-DA 检测 DI-591 对细胞内 ROS 水平的影响。 |
| 动物实验 |
在体内疗效研究中，DI-591 配制成含有 10% DMSO、40% PEG300、5% Tween-80 和 45% 生理盐水的溶剂。将 DI-591 腹腔注射给携带皮下 KYSE70 异种移植瘤的小鼠（0.6 mg/kg 或 1.4 mg/kg，每日一次，连续 21 天）。使用游标卡尺测量肿瘤体积。研究结束时，收集肿瘤组织，进行 Neddylated cullin 和 NRF2 靶蛋白的 Western blot 分析，以及免疫组织化学染色以评估细胞增殖（Ki-67）。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
DI-591 可透过细胞膜。文献中未提供详细的药代动力学参数（半衰期、Cmax、AUC）。体外研究通常将其溶解于二甲基亚砜 (DMSO) 中。体内给药时，其配制于 10% DMSO、40% PEG300、5% Tween-80 和 45% 生理盐水的混合溶液中。该化合物的分子量为 585.80 g/mol，分子式为 C31H47N5O4S。它以固体形式储存于 -20℃。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无详细的毒理学数据。在KYSE70异种移植研究中，剂量为0.6 mg/kg和1.4 mg/kg时，未报告明显的全身毒性或体重减轻，表明这些剂量下具有良好的安全性。作为研究用化学品，应遵循标准安全预防措施。本品不适用于人体。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
DI-591 是一种用于研究 NRF2 信号通路的化学探针，该通路在氧化应激反应中被激活。DI-591 通过特异性抑制 CUL3 的 NEDDylation 修饰，稳定 NRF2 并上调其靶基因的表达。该化合物是研究 NRF2 通路发挥保护作用的癌症、炎症和神经退行性疾病的重要工具。它并非 FDA 批准的药物。
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| 分子式 |
C31H47N5O4S
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|---|---|
| 分子量 |
585.800986528397
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| 精确质量 |
585.334
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| CAS号 |
2245887-38-9
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| PubChem CID |
131750123
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
4.3
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| tPSA |
141
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
13
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| 重原子数目 |
41
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| 分子复杂度/Complexity |
848
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| 定义原子立体中心数目 |
2
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| SMILES |
S1C2C=C(C=CC=2N=C1C[C@H](C(N[C@@H](CNC(CCN1CCOCC1)=O)C1CCCCC1)=O)NC(CC)=O)C(C)C
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| InChi Key |
CNJKDQGPBAWNRY-IZZNHLLZSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C31H47N5O4S/c1-4-28(37)33-25(19-30-34-24-11-10-23(21(2)3)18-27(24)41-30)31(39)35-26(22-8-6-5-7-9-22)20-32-29(38)12-13-36-14-16-40-17-15-36/h10-11,18,21-22,25-26H,4-9,12-17,19-20H2,1-3H3,(H,32,38)(H,33,37)(H,35,39)/t25-,26+/m0/s1
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| 化学名 |
(2S)-N-[(1S)-1-cyclohexyl-2-(3-morpholin-4-ylpropanoylamino)ethyl]-2-(propanoylamino)-3-(6-propan-2-yl-1,3-benzothiazol-2-yl)propanamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 12.5 mg/mL (21.34 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (2.13 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 12.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (2.13 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 12.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (2.13 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7071 mL | 8.5353 mL | 17.0707 mL | |
| 5 mM | 0.3414 mL | 1.7071 mL | 3.4141 mL | |
| 10 mM | 0.1707 mL | 0.8535 mL | 1.7071 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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