| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Pyruvate kinase M2 (PKM2) (allosteric activator, EC50: 73 nM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
ML202 是一种高度特异性的变构激活剂，可激活人丙酮酸激酶 M2 (hPK-M2) 的肿瘤特异性亚型，其 EC50 值为 73 nM。它能增强磷酸烯醇式丙酮酸 (PEP) 结合的协同性，而对二磷酸腺苷 (ADP) 结合的影响可忽略不计。ML202 对其他丙酮酸激酶亚型（hPK-M1、-R 和 -L 亚型）无活性，表明其对 PKM2 具有高度选择性。PKM2 是癌细胞有氧糖酵解（瓦博格效应）的关键调节因子。PKM2 的激活可使代谢从乳酸生成转向丙酮酸进入三羧酸循环 (TCA 循环)，从而可能抑制癌细胞增殖。
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| 体内研究 (In Vivo) |
目前尚无关于ML202的具体体内数据报道。作为一种具有高亚型选择性的PKM2激活剂，ML202在表达PKM2的肿瘤异种移植模型中具有潜在的体内疗效。体内PKM2激活有望降低肿瘤糖酵解，减少乳酸生成，并可能抑制肿瘤生长。体内研究将包括向荷瘤小鼠给药，评估肿瘤PKM2活性、糖酵解通量（通过¹⁸F-FDG PET成像）以及肿瘤生长抑制情况。ML202是一种用于研究PKM2生物学及其在癌症中作用的研究工具。
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| 酶活实验 |
重组人PKM2酶在大肠杆菌中表达并纯化。PKM2活性测定通过乳酸脱氢酶（LDH）偶联NADH氧化，测量磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）和ADP转化为丙酮酸和ATP的转化率。反应混合物包含Tris-HCl缓冲液（pH 7.4）、KCl、MgCl2、PEP（0.1-10 mM）、ADP（0.1-10 mM）、NADH（0.2-0.5 mM）和LDH。加入PKM2酶（10-50 ng）启动反应。在37℃下，监测340 nm处吸光度（NADH氧化）在5-10分钟内的下降。对于激活剂筛选，测试不同浓度（0.1-1000 nM）的化合物，并计算相对于对照组（DMSO溶剂）的活性倍数增加。 EC50 值由剂量反应曲线确定（ML202 的 EC50 = 73 nM）。对其他丙酮酸激酶同工酶（PKM1、PKR、PKL）的选择性采用相同的检测方法，但使用相应的重组酶同工酶进行评估。ML202 在浓度高达 10 uM 时对 PKM1、PKR 和 PKL 均无活性，表明其具有很高的同工酶选择性。
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| 细胞实验 |
表达PKM2的人类癌细胞系（例如HeLa、HCT116、A549、MCF-7）在含10%胎牛血清和抗生素的DMEM或RPMI-1640培养基中培养。将细胞接种于96孔板或6孔板中，并用ML202（0.1-1000 nM）处理24-72小时。使用上述PK活性测定方法检测细胞裂解液中的丙酮酸激酶活性；比活性以总蛋白含量（BCA法）进行标准化。使用比色法乳酸测定试剂盒检测培养上清液中的乳酸生成量。通过检测培养基中的葡萄糖水平（葡萄糖氧化酶法）来测定葡萄糖消耗量。使用Seahorse XF分析仪测定细胞外酸化率（ECAR）和耗氧率（OCR），以评估糖酵解通量和线粒体呼吸作用。细胞增殖可通过 MTT、CCK-8 或 CellTiter-Glo 检测进行评估。ML202 对代谢表型的影响可通过测量乳酸生成与葡萄糖消耗的比值来评估。细胞凋亡可通过 Annexin V/PI 染色和 caspase-3/7 活性检测进行评估。PKM2 激活的 EC50 为 73 nM；根据细胞系和检测方法的不同，通常在低纳摩尔至微摩尔浓度下即可观察到细胞效应。ML202 具有亲脂性，因此能够透过细胞膜。
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| 动物实验 |
目前尚无已发表的ML202体内动物研究。作为一种具有高亚型选择性的PKM2激活剂，ML202有望在表达PKM2的癌症异种移植模型中进行体内疗效研究。典型的研究方案包括：使用HCT116、HeLa或其他表达PKM2的癌细胞系，在免疫缺陷小鼠（例如裸鼠或NSG小鼠）中建立皮下肿瘤异种移植模型。当肿瘤体积达到100-200 mm³时，将小鼠随机分组，并用溶于合适溶剂（例如10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45%生理盐水，或10% DMSO + 90%玉米油）的ML202进行治疗。给药方式为每日一次腹腔注射（IP）或灌胃，剂量范围为1-50 mg/kg，疗程为2-4周。终点指标：使用卡尺测量肿瘤体积、尸检时测量肿瘤重量、体重、生存期。采集血浆和肿瘤组织进行药代动力学分析和药效学评估：检测肿瘤裂解液中的PKM2活性、肿瘤组织和血浆中的乳酸水平（比色法）、葡萄糖水平（比色法）以及ATP水平（生物发光法）。可通过¹⁸F-FDG PET/CT成像在体内评估糖酵解通量，该方法可测量肿瘤的葡萄糖摄取。可进行肿瘤组织学分析（H&E染色、Ki-67增殖检测、TUNEL细胞死亡检测）。可通过测量乳酸/葡萄糖比值评估对肿瘤代谢的影响。这些方案为通用方案，尚未针对ML202进行专门验证。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
ML202 的具体药代动力学数据尚不明确。根据其分子特性（分子量 387.48，LogP 3.609），该化合物具有中等亲脂性，预计口服生物利用度为中等至良好。血浆半衰期、Cmax、AUC、清除率、分布容积和蛋白结合率等数据尚未公开报道。溶解度：DMSO 中为 50 mg/mL (129.04 mM)。体内制剂：在 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD 生理盐水) 溶液中，浓度≥2.5 mg/mL (6.45 mM)（澄清溶液）。储存：粉末在 -20℃ 下可保存 3 年；溶剂在 -80℃ 下可保存 6 个月。该化合物具有细胞渗透性，可用于体内代谢研究。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
ML202 尚无具体的毒性数据。作为一种 PKM2 激活剂，其主要预期靶向效应是调节表达 PKM2 的细胞中的葡萄糖代谢。PKM2 在癌细胞中高表达，但也表达于一些正常的增殖组织（例如骨髓、肠道上皮、免疫细胞）。因此，PKM2 的激活可能影响正常细胞的增殖和代谢。在基于细胞的研究中，在相关浓度（低纳摩尔至低微摩尔）下未观察到明显的细胞毒性。体内毒性研究将评估最大耐受剂量 (MTD)、体重减轻、器官毒性（肝脏、肾脏）、血液学参数以及血糖/乳酸水平。目前尚无公开数据。仅供研究使用；操作时请采取标准实验室防护措施（手套、实验服、护目镜）。ML202 不得用于人体。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
6-[(3-甲氧基苯基)甲基]-4-甲基-2-甲基亚磺酰基-5-噻吩并[3,4]吡咯并[1,3-d]哒嗪酮是一种有机硫杂环化合物、有机氮杂环化合物和有机杂双环化合物。
ML202（CAS：1221186-52-2）是一种高度特异性的人丙酮酸激酶M2（PKM2）变构激活剂，PKM2是丙酮酸激酶的肿瘤特异性亚型。PKM2是癌细胞有氧糖酵解（瓦博格效应）的关键调节因子。ML202可增强磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）结合的协同性（EC50 = 73 nM），且对其他丙酮酸激酶亚型（PKM1、PKR、PKL）无活性。ML202是研究PKM2生物学、瓦博格效应以及癌细胞代谢重编程的重要研究工具。分子式：C18H17N3O3S2，分子量：387.48。外观：白色至类白色固体粉末。纯度：≥98%（HPLC）。溶解度：DMSO 50 mg/mL (129.04 mM)。储存：储存于 +4℃ 或 -20℃。未获准用于临床。仅供研究使用。参考文献：ML202 是一种高度特异性的人丙酮酸激酶 M2 (hPK-M2) 变构激活剂，可影响磷酸烯醇式丙酮酸 (PEP) 结合的协同性，而对二磷酸腺苷 (ADP) 结合几乎没有影响。 |
| 分子式 |
C18H17N3O3S2
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|---|---|
| 分子量 |
387.48
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| 精确质量 |
387.071
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| CAS号 |
1221186-52-2
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| PubChem CID |
44246498
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
3.609
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| tPSA |
113.57
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
26
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| 分子复杂度/Complexity |
617
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CN1C2=C(C3=C1C(=O)N(N=C3)CC4=CC(=CC=C4)OC)SC(=C2)S(=O)C
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| InChi Key |
MORBXZMIXGYQDB-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H17N3O3S2/c1-20-14-8-15(26(3)23)25-17(14)13-9-19-21(18(22)16(13)20)10-11-5-4-6-12(7-11)24-2/h4-9H,10H2,1-3H3
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| 化学名 |
10-[(3-methoxyphenyl)methyl]-7-methyl-4-methylsulfinyl-3-thia-7,10,11-triazatricyclo[6.4.0.02,6]dodeca-1(8),2(6),4,11-tetraen-9-one
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 50 mg/mL (129.04 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.45 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.45 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5808 mL | 12.9039 mL | 25.8078 mL | |
| 5 mM | 0.5162 mL | 2.5808 mL | 5.1616 mL | |
| 10 mM | 0.2581 mL | 1.2904 mL | 2.5808 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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