| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
EAAT2
WAY-213613 hydrochloride specifically targets the excitatory amino acid transporter 2 (EAAT2, also known as GLT-1). It acts as a potent, selective, non-substrate (non-transportable) reuptake inhibitor with an IC50 of 85 nM.. It shows selectivity for EAAT2 over EAAT1 (IC50 = 5 microM) and EAAT3 (IC50 = 3.8 microM), with approximately 50-100 fold selectivity.. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
WAY-213613 盐酸盐 (0-100 μM) 对人 EAAT1、EAAT2 和 EAAT3 同工酶具有抑制活性，IC50 值分别为 5004 nM、85 nM 和 3787 nM[1]。WAY-213613 盐酸盐 (3、30 和 300 nM) 抑制突触体对 L-[3H] 谷氨酸的吸收，Ki 值分别为 15 nM、41 nM 和 55 nM[1]。当将 EAAT1、EAAT2 或 EAAT3 注射到卵母细胞中时，WAY-213613 盐酸盐 (0-100 μM) 以浓度依赖的方式阻断谷氨酸诱导的电流（IC50 值分别为 48、0.13 和 4.0 μM）[1]。 WAY-213613 盐酸盐 (0.5-50 μM) 对离子亲和受体和 EAAT2 具有很强的选择性，可抑制 NMDA 刺激反应 [1]。
体外实验表明，WAY-213613盐酸盐是一种强效的EAAT2抑制剂。其对EAAT2的IC50值为85 nM，表明其与该谷氨酸转运蛋白具有很高的结合亲和力。此外，WAY-213613对EAAT2的选择性高于EAAT3（IC50 = 3.8 uM）和EAAT1（IC50 = 5 uM），证实其是中枢神经系统主要谷氨酸转运蛋白的选择性抑制剂。WAY-213613盐酸盐的作用机制为非底物抑制剂，即它通过阻断转运蛋白本身而不发生转运。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
所提供的搜索结果中并未详细列出WAY-213613盐酸盐的具体体内活性数据。作为一种强效且选择性的EAAT2抑制剂，它被认为能够显著提高脑内细胞外谷氨酸水平。这使其成为研究谷氨酸失调相关疾病（例如癫痫、中风和兴奋性毒性神经退行性疾病）的宝贵工具。它常用于临床前模型中，以研究谷氨酸介导的机制。
|
| 酶活实验 |
评估EAAT抑制的标准体外方案是使用表达特定EAAT亚型的细胞进行放射性标记底物摄取实验。将稳定表达人EAAT2的HEK293细胞接种于24孔板中。细胞达到汇合后，在测定缓冲液中于37℃下用不同浓度的WAY-213613盐酸盐（0.01-10,000 nM）预孵育10分钟。然后，向细胞中加入[3H]-L-谷氨酸（一种放射性标记底物，例如50 nM），并孵育5-10分钟。用冰冷的PBS洗涤细胞三次以终止摄取反应。用0.2 N NaOH裂解细胞，并使用液体闪烁计数器测量裂解液中的放射性。根据抑制曲线，利用 Cheng-Prusoff 方程计算得出 IC50 为 85 nM。
|
| 细胞实验 |
WAY-213613盐酸盐的体外细胞检测采用原代大鼠皮质星形胶质细胞或人诱导多能干细胞（iPSC）衍生的星形胶质细胞，这些细胞内源性高表达EAAT2。将细胞接种于96孔黑色壁板中，培养7-14天以确保EAAT2高表达。将培养基替换为含钠的检测缓冲液。向细胞中加入荧光谷氨酸指示剂（例如，基于FRET的谷氨酸传感器或染料，如谷氨酸标记的天冬氨酸，ASP-4）。然后用不同浓度的WAY-213613盐酸盐（0.01-10,000 nM）预处理细胞10分钟。最后加入10 uM L-谷氨酸启动谷氨酸摄取。利用荧光酶标仪实时监测荧光强度的降低，该降低反映了细胞外介质中谷氨酸的清除情况。IC50值由剂量反应曲线确定。
|
| 动物实验 |
WAY-213613盐酸盐的体内实验方案包括将微透析探针植入麻醉大鼠的海马或纹状体。经过一段稳定期后，将含有该化合物（10-100 μM）的人工脑脊液（aCSF）灌注到探针中。每隔10分钟收集一次透析液样本，并使用高效液相色谱（HPLC）结合荧光检测（例如，使用邻苯二甲醛衍生化）分析谷氨酸浓度。细胞外谷氨酸水平的升高可作为药效学标志物，用于确认EAAT2抑制作用。平行实验可以评估行为学终点，例如癫痫发作（脑电图记录）或运动协调性（转棒试验），以研究谷氨酸水平升高的后果。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
未提供WAY-213613盐酸盐的详细药代动力学数据。该化合物为小分子，分子量为468.74，可能设计用于口服给药，但其带电荷的盐酸盐可能会影响吸收。它可溶于水和二甲基亚砜（DMSO）。为评估其中枢神经系统（CNS）渗透性，标准药代动力学研究包括对小鼠进行静脉（IV）给药（1 mg/kg）和腹腔（IP）给药（10 mg/kg），随后连续采集血浆和脑组织样本。采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）分析两种基质中化合物的浓度，以计算脑血浆比值（Kp）、清除率（Cl）和半衰期（T1/2）。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无WAY-213613盐酸盐的具体毒理学数据。作为一种EAAT2抑制剂，WAY-213613可阻断谷氨酸的再摄取，其在体内的主要安全隐患是谷氨酸受体过度刺激（兴奋性毒性），这可能导致神经元死亡和癫痫发作。标准的安全性评估包括小鼠急性毒性试验，以确定最大耐受剂量（MTD），并观察是否存在明显的中枢神经系统毒性症状，例如癫痫发作、震颤和死亡。此外，还将进行脑组织病理学检查，以评估是否存在神经元坏死。体外hERG（人醚-a-go-go相关基因）通道活性测定也将用于评估心脏QT间期延长的风险。
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
WAY-213613 盐酸盐是一种研究级化学品，尚未获准用于临床。它是研究中枢神经系统中 EAAT2/GLT-1 功能的高效选择性工具。由于 EAAT2 负责前脑中 90-95% 的谷氨酸摄取，因此该化合物对于理解谷氨酸转运蛋白在突触传递、可塑性和神经毒性中的作用至关重要。它广泛用于癫痫、肌萎缩侧索硬化症 (ALS)、中风和创伤性脑损伤的临床前模型中，以研究谷氨酸兴奋性毒性的病理生理机制。本品仅供研究使用。
|
| 分子式 |
C16H14BRCLF2N2O4
|
|---|---|
| 分子量 |
451.65
|
| 精确质量 |
449.979
|
| CAS号 |
2450268-84-3
|
| 相关CAS号 |
WAY-213613;868359-05-1
|
| PubChem CID |
139290995
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| tPSA |
102
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
26
|
| 分子复杂度/Complexity |
477
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
| SMILES |
C1(=CC(Br)=C(C=C1F)OC1C=CC(NC(=O)C[C@@H](C(=O)O)N)=CC=1)F.Cl
|
| InChi Key |
IBCWXGJQAQXHPZ-ZOWNYOTGSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C16H13BrF2N2O4.ClH/c17-10-5-11(18)12(19)6-14(10)25-9-3-1-8(2-4-9)21-15(22)7-13(20)16(23)24;/h1-6,13H,7,20H2,(H,21,22)(H,23,24);1H/t13-;/m0./s1
|
| 化学名 |
(2S)-2-amino-4-[4-(2-bromo-4,5-difluorophenoxy)anilino]-4-oxobutanoic acid;hydrochloride
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 50 mg/mL (110.71 mM)
H2O: < 0.1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2141 mL | 11.0705 mL | 22.1410 mL | |
| 5 mM | 0.4428 mL | 2.2141 mL | 4.4282 mL | |
| 10 mM | 0.2214 mL | 1.1071 mL | 2.2141 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
