| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
GNE-1858 specifically targets Hematopoietic Progenitor Kinase 1 (HPK1, also known as MAP4K1). It acts as an ATP-competitive inhibitor. The compound demonstrates sub-nanomolar potency against wild-type HPK1 with an IC50 of 1.9 nM. It also potently inhibits the active mimetic mutants HPK1-TSEE (IC50 = 1.9 nM) and HPK1-SA (IC50 = 4.5 nM). HPK1 functions as a negative-feedback regulator that dampens T-cell activation.
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| 体外研究 (In Vitro) |
造血祖细胞激酶-1 (HPK1) 是一种与 Ste20 连接的蛋白激酶，仅在造血细胞区室（包括 T 细胞、B 细胞和树突状细胞）中表达。它是一种丝氨酸/苏氨酸激酶。HPK1 作为 T 细胞受体信号传导的负反馈调节因子，抑制 T 细胞增殖和效应功能[1]。
在无细胞生化分析中，GNE-1858 对野生型 HPK1 表现出强效抑制活性（IC50 = 1.9 nM）。它还能抑制活性模拟突变体 HPK1-TSEE（IC50 = 1.9 nM）和 HPK1-SA（IC50 = 4.5 nM）。这些数据证实了其 ATP 竞争性抑制机制以及对 HPK1 激酶结构域的高度选择性。该化合物对其他一系列激酶无活性，进一步凸显了其对 HPK1 家族的选择性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
标准数据库中未详细列出GNE-1858的具体体内活性数据。作为一种强效的ATP竞争性HPK1抑制剂，GNE-1858被认为能够增强体内T细胞活化和抗肿瘤免疫。通常，HPK1抑制剂有望增强TCR刺激后IL-2的产生和T细胞的增殖。GNE-1858可用于同源肿瘤模型，以评估其单药抗肿瘤疗效，或与抗PD-1等免疫检查点抑制剂联合使用。
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| 酶活实验 |
GNE-1858 的特定体外实验方案采用均相时间分辨荧光 (HTRF) 激酶活性测定法。将重组人 HPK1 蛋白与 GNE-1858 的系列稀释液（0.001 nM 至 10 uM）在含有 ATP（浓度为 Km）和生物素标记底物肽的测定缓冲液中孵育。室温孵育 60 分钟后终止反应。加入链霉亲和素-XL665 和铕隐晶标记的抗磷酸化底物抗体。孵育 60 分钟后测量 HTRF 信号，并使用非线性回归算法计算 IC50 值。
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| 细胞实验 |
对于体外细胞实验，首先使用基于磁珠的阴性选择法从健康供体外周血单核细胞 (PBMC) 中分离出原代人 CD4+ 或 CD8+ T 细胞。将 T 细胞培养于预先包被抗 CD3 抗体 (1 ug/mL) 和可溶性抗 CD28 抗体 (1 ug/mL) 的 96 孔板中。加入浓度范围为 0.1 nM 至 1 uM 的 GNE-1858。培养 72 小时后，收集细胞培养上清液，并通过 ELISA 法检测 IL-2 和 IFN-γ 的水平。在培养的最后 18 小时内，通过 [3H]-胸苷掺入法评估 T 细胞增殖情况。
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| 动物实验 |
体内疗效研究方案将采用MC38同源小鼠模型。将5×10⁵个MC38结肠癌细胞皮下植入C57BL/6小鼠体内。当肿瘤平均体积达到100-150 mm³时，将小鼠随机分为治疗组。GNE-1858以10-100 mg/kg的剂量每日两次（BID）口服给药，持续14-21天。对照组接受载体或同型抗体。每2-3天用游标卡尺测量肿瘤体积。研究结束时，收集肿瘤和脾脏进行流式细胞术分析，以评估体外再刺激后CD8⁺ T细胞浸润、活化标志物（CD44、CD69）和细胞因子产生情况。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
已发表文献中关于GNE-1858的详细药代动力学（PK）数据有限。作为一种小分子ATP竞争性HPK1抑制剂，标准PK研究将在雄性C57BL/6小鼠中进行。该化合物以10 mg/kg的剂量口服给药。在预定的时间点（给药后0.25、0.5、1、2、4、6、8、12和24小时）采集血浆样本。采用灵敏的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）方法定量GNE-1858的浓度。采用非房室模型分析确定T1/2、Cmax、Tmax、AUC和口服生物利用度，以指导体内疗效研究的给药方案。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无GNE-1858的具体毒理学数据。作为一种HPK1抑制剂，GNE-1858能够解除T细胞的负性检查点，其主要毒性是免疫介导的炎症。免疫系统过度激活可能导致细胞因子释放综合征或自身免疫性疾病。标准的探索性毒理学研究包括一项为期7天的小鼠重复给药口服毒性试验，以确定最大耐受剂量（MTD），以及一项更广泛的激酶选择性研究，以评估其对相关激酶的脱靶抑制作用。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
GNE-1858 是一种研究级化合物，尚未获准用于临床。其分子式为 C21H26F2N8，分子量为 428.48。它可溶于 DMSO（20 mg/mL）。HPK1 是癌症免疫疗法的一个潜在靶点，GNE-1858 可作为验证该疗法的工具。该化合物的结构和活性已发表于《结构》（Structure）杂志（2019）。
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| 分子式 |
C21H26F2N8
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|---|---|
| 分子量 |
428.48
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| 精确质量 |
428.224
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| CAS号 |
2680616-96-8
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| PubChem CID |
146026186
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
2.7
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| tPSA |
83.8
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
622
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1=NC(NC2C=C(C3CCNC3)N=C(N3CCC(F)(F)C3)N=2)=CC2N(C(C)C)N=CC1=2
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| InChi Key |
JKPAJCPZQIJPPS-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H26F2N8/c1-13(2)31-17-8-18(25-10-15(17)11-26-31)28-19-7-16(14-3-5-24-9-14)27-20(29-19)30-6-4-21(22,23)12-30/h7-8,10-11,13-14,24H,3-6,9,12H2,1-2H3,(H,25,27,28,29)
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| 化学名 |
N-[2-(3,3-difluoropyrrolidin-1-yl)-6-pyrrolidin-3-ylpyrimidin-4-yl]-1-propan-2-ylpyrazolo[4,3-c]pyridin-6-amine
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 20 mg/mL (46.68 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (4.67 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (4.67 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.0mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (4.67 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3338 mL | 11.6692 mL | 23.3383 mL | |
| 5 mM | 0.4668 mL | 2.3338 mL | 4.6677 mL | |
| 10 mM | 0.2334 mL | 1.1669 mL | 2.3338 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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