Kaempferol 3-O-β-D-glucuronide (Kaempferol-3-glucuronide; Kaempferol-3-O-glucuronide)   中文名称: 山奈酚3葡糖苷酸

IL-1β IL-10

山奈酚-3- o- β-d-葡糖苷(K3G)对lps诱导的促炎细胞因子产生及细胞活力的影响[1]
LPS刺激RAW264.7巨噬细胞和Balb/c小鼠释放的IL-1β浓度随着K3G浓度的增加而降低。图3(A-D)显示，K3G显著降低RAW 264.7细胞中IL-1β的浓度，在10 μM时为205.7 pg/mL，在5 μM时为217.4 pg/mL。K3G不影响RAW 264.7细胞的活力(图4)。在Balb/c小鼠中，IL-1β的值为173.8 pg/mL(2 mg/kg)和73.6 pg/mL(5 mg/kg)。在LPS处理的RAW 264.7细胞和小鼠模型中，IL-10抗炎活性值随K3G浓度的升高而升高，与标准药物地塞米松的结果相当。结果表明，K3G处理在lps刺激的细胞中显著抑制IL-1β水平。10 μM时抑制作用最大。通过RT-PCR研究K3G对RAW 264.7细胞TNF-α和IL-6基因表达的抑制作用，并参考管家基因GAPDH。尽管如此，我们还是选择了1.0、5.0和10.0 μM这三种浓度进行后续检测。K3G显著抑制促炎细胞因子。

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K3G对lps诱导NO、PGE2和LTB4生成的影响[1]
在lps激活的RAW 264.7细胞中，研究了K3G对NO、PGE2和LTB4生成的抑制作用。结果表明，它们对NO、PGE2和LTB4的抑制也呈剂量依赖性，在浓度为10 μM时抑制效果最大，分别为47.2%、460.2 pg/mL和678.6 pg/mL。K3G对所有这些炎症介质的抑制作用与阳性对照药物地塞米松相当，分别为51.9%，460.2 pg/mL和541.9 pg/mL，分别对NO, PGE2和LTB4(图6A-C)。通过RT-PCR研究，K3G可显著抑制RAW 264.7细胞中与管家基因GAPDH相关的COX-2和iNOS基因表达(图5B)。

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K3G对lps诱导的NF-κB p65表达的影响[1]
RAW 264.7细胞分别用K3G(5和10 μM)预处理1 h, LPS(1 µg/mL)刺激24 h。比较地塞米松(0.5 μM)对NF-kB p65磷酸化的影响。从图9中可以清楚地看出，LPS处理增加了RAW 264.7细胞中NF-κB p65的磷酸化。然而，K3G预处理显著抑制了这种磷酸化。

K3G对体重和淋巴器官重量的影响[1]
K3G剂量在治疗动物中没有出现任何不良变化。表2显示，与对照组(生理盐水处理组)相比，脾脏和肾脏的重量变化不显著。在1和2 mg/kg剂量下，胸腺的相对器官重量略有增加，但在5 mg/kg剂量下没有影响。对于肝脏的相对器官重量，在2和5 mg/kg剂量下观察到显著增加，而在1 mg/kg剂量下则略有增加。为检查肝重量增加是否不是由于任何异常引起，行肝功能检查(LFT)，结果未见阴性体征(表3)。

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组织病理学[1]
肝脏显微镜检查显示中心静脉和正常的肝细胞结构。LPS中毒小鼠肝脏(图10)显示中央静脉被慢性炎症包围，伴局灶性肝细胞坏死。炎症浸润血管周围区淋巴细胞丰富，中性粒细胞少。浓度为2 mg/kg的K3G(图10C)显示坏死、血管连接和中性粒细胞浸润的正常化。在5 mg/kg(图10C)时，形貌几乎正常。

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卡拉胶诱导的足跖水肿及吞噬指数[1]
在2和5 mg/kg剂量下，K3G对卡拉胶诱导的足跖水肿的影响在10 h内进行了测量(图8)。在5 mg/kg剂量下，最大抑制率为48%。结果与标准药物地塞米松相当。吞噬指数(表4)也显示，吞噬能力随着K3G浓度的增加而增加，与标准药物地塞米松相比，吞噬能力显著增加。

PGE2和LTB4产生的测定[1]
K3G处理RAW 264.7细胞(2 × 105个细胞/孔)1 h, LPS(1 μg/mL)诱导24 h。测定不同浓度K3G对LPS处理的RAW 264.7细胞生成PGE2和LTB4的抑制作用。收集上清液，用ELISA法检测两种培养基的含量。PGE2和LTB4浓度使用竞争性酶免疫测定试剂盒根据制造商的说明进行定量。与对照处理相比，测定了PGE2和LTB4的抑制作用。所有的实验都是三次重复。

K3G对RAW264.7细胞细胞因子产生的影响[1]
采用小鼠酶联免疫吸附测定试剂盒(ELISA)检测K3G对IL-1β和IL-10产生的抑制作用。将RAW 264.7细胞以2 × 105个细胞/孔的密度接种于96孔板，孵育过夜。K3G处理1 h后，再添加1 μg/mL LPS处理24 h。根据制造商的方案(Invitrogen)检测上清液。实验一式三次。

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MTT法测定细胞活力[1]
MTT染色法测定细胞活力。RAW 264.7细胞(16000个细胞/孔)在96孔平板上用不同浓度的K3G处理48 h。在PBS中配制20 μL MTT溶液(2.5 mg/mL)， pH 7.4加入培养终止前4 h。在每孔中加入100 μL的100% DMSO，消除培养基，使甲醛溶解。在570 nm处，使用Synergy Mx平板阅读器测量吸光度。LPS诱导组为对照，计算细胞存活率。

Effect of K3G on cytokine production in Balb/c mice[1]
Mice were fasted overnight and drugged with K3G at different concentrations (1 mg/kg, 2 mg/kg and 5 mg/kg) for 1 h and LPS (0.5 mg/kg) was administered via i.p. Blood was obtained after 3 h from the retro-orbital plexus. The collected serum was stored at -80 degree until use for ELISA to study the inhibition of IL-1β and IL-10 cytokines using Invitrogen (Mouse) kits.

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Efficacy of K3G against carrageenan induced paw oedema[1]
30 Balb/c mice were divided in 6 groups comprising 5 animals each. Mice were fasted overnight and treated with different doses of K3G (2 mg/kg and 5 mg/kg). After 1 h 1% Carrageenan solution (100 μL) in PBS was injected at subplantar region of left hind paw of all animal groups. Volume of the injected paw was measured using plethysmometer at 1 h, 3 h, 6 h, 8 h and 10 h. The percentage inhibition of paw oedema was calculated by using the following formula: Vc — volume of paw oedema in control groupVt — volume of paw oedema in treated group.

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Macrophage phagocytosis by carbon clearance method[1]
Balb/c mice were divided into five groups of five mice each. Drugs were administered in various groups as shown in Table 4 for five days. On day six, all the groups were given 0.1 mL of carbon ink suspension through the tail vein. Blood was collected from the retro-orbital plexus at 0 and 30 min immediately after the injection of carbon suspension. Blood was lysed with 2 mL of 0.1% sodium carbonate and the absorbance was measured at 675 nm. The rate of carbon clearance, termed as phagocytic index, was calculated by using equation

[1]. Kaempferol-3-o-β-d-glucuronate exhibit potential anti-inflammatory effect in LPS stimulated RAW 264.7 cells and mice model. Int Immunopharmacol. 2018;57:62-71.

[2]. Absorption of kaempferol from endive, a source of kaempferol-3-glucuronide, in humans. Eur J Clin Nutr. 2004;58(6):947-954.

Kaempferol 3-O-glucuronide is a kaempferol O-glucuronide that is kaempferol with a beta-D-glucosiduronic acid residue attached at the 3-position. It has a role as a metabolite. It is a kaempferol O-glucuronide and a trihydroxyflavone.
Kaempferol 3-glucuronide has been reported in Myrothamnus flabellifolia, Diospyros cathayensis, and other organisms with data available.

C21H18O12

462.36

462.079

C, 54.55; H, 3.92; O, 41.52

22688-78-4

5318759

White to yellow solid powder

1.9±0.1 g/cm3

876.8±65.0 °C at 760 mmHg

189-191 °C

309.8±27.8 °C

0.0±0.3 mmHg at 25°C

1.789

2.3

207.35

7

12

4

33

790

5

FNTJVYCFNVUBOL-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C21H18O12/c22-8-3-1-7(2-4-8)17-18(13(25)12-10(24)5-9(23)6-11(12)31-17)32-21-16(28)14(26)15(27)19(33-21)20(29)30/h1-6,14-16,19,21-24,26-28H,(H,29,30)

6-[5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4-oxochromen-3-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid

22688-78-4; Kaempferol 3-glucuronide; Kaempferol-O-glucuronide; Kaempferol 3-O-; A-D-glucuronide; Kaempferol 3-O-beta-D-glucuronide; Kaempferol-3-beta-O-glucuronide; Kaempferol 3-O-glucuronide;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO: 100 mg/mL (216.28 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。