| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
VU0453379 hydrochloride targets the glucagon-like peptide-1 receptor (GLP-1R), a class B G-protein-coupled receptor (GPCR) that is expressed in pancreatic beta-cells, brain (including hypothalamus, hippocampus, and substantia nigra), gastrointestinal tract, heart, and kidney. The endogenous ligand GLP-1 (7-36) amide is a 30-31 amino acid incretin hormone secreted by intestinal L-cells in response to nutrient ingestion. GLP-1R activation stimulates adenylyl cyclase via Gs, increasing cAMP, which in turn activates PKA and Epac, leading to enhanced glucose-stimulated insulin secretion from beta-cells, suppression of glucagon secretion from alpha-cells, inhibition of gastric emptying, and reduced food intake. In the brain, GLP-1R activation has neuroprotective effects and modulates neurotransmission. VU0453379 binds to an allosteric site on GLP-1R distinct from the orthosteric (GLP-1 binding) site. As a positive allosteric modulator (PAM), it enhances the receptor's response to endogenous GLP-1. As an ago-PAM (allosteric agonist and PAM), it also has intrinsic agonist activity in the absence of GLP-1, directly activating GLP-1R. The compound is highly selective for GLP-1R over other related GPCRs. VU0453379 is CNS-penetrant, making it suitable for studying central GLP-1R functions.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外研究表明，VU0453379 盐酸盐是一种强效的 GLP-1R 正向变构调节剂 (PAM)，其 EC₅0 为 1.3 uM，相对于最大 GLP-1 反应的效力为 59.2%。在基于细胞的实验中（例如，稳定表达人 GLP-1R 的 HEK293 细胞），该化合物单独使用（在没有 GLP-1 的情况下）可诱导 cAMP 积累（内在激动剂活性），证实了其激动剂-正向变构调节剂的特性。与亚最大浓度的 GLP-1 联用时，VU0453379 可增强 GLP-1R 信号传导，使 GLP-1 浓度-反应曲线左移，并提高最大效力。该化合物可诱导表达 GLP-1R 的细胞（例如，9-3-H 细胞）中的钙动员，这与 GLP-1R 的激活相一致。 VU0453379 对 GLP-1 受体具有高度选择性，优于其他 G 蛋白偶联受体 (GPCR)，包括与其密切相关的胰高血糖素受体 (GCGR)、GIP 受体和 GLP-2 受体。使用 HEK293 或神经元细胞系进行的体外细胞毒性试验表明，VU0453379 在浓度高达 10-25 uM 时（通过 MTT 或刃天青法测定）不具有细胞毒性。该化合物的中枢神经系统穿透性已通过血脑屏障的体外模型（例如，MDCK-MDR1 或 hCMEC/D3 细胞）得到证实。
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| 体内研究 (In Vivo) |
VU0453379盐酸盐的体内研究主要集中在其对僵直症（一种帕金森病和抗精神病药物诱发锥体外系症状的模型）的影响上。在啮齿动物模型中，给予多巴胺D2受体拮抗剂氟哌啶醇可诱发僵直症（不动，无法纠正强制姿势）。VU0453379盐酸盐（腹腔注射，剂量为1-30 mg/kg）以剂量依赖的方式逆转氟哌啶醇诱发的僵直症，表明GLP-1R激活具有抗僵直作用，可能是通过调节纹状体多巴胺信号传导或直接作用于运动回路实现的。在糖尿病和肥胖动物模型中，VU0453379可能降低血糖并减少食物摄入，这与GLP-1R激动作用一致，但这些研究不如针对僵直症的研究广泛。该化合物在小鼠和大鼠中耐受性良好，腹腔注射剂量高达 30 mg/kg，未观察到明显的体重减轻或不良行为反应。VU0453379 具有中枢神经系统穿透性，使其成为研究中枢 GLP-1 受体功能的有效工具。
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| 酶活实验 |
VU0453379 盐酸盐的标准非细胞检测方法是基于膜的 [3⁵S]GTPγS 结合试验，用于测量 G 蛋白活化。通过匀浆和差速离心制备稳定表达人 GLP-1R 的 HEK293 细胞膜。检测缓冲液为：20 mM HEPES（pH 7.4）、100 mM NaCl、5 mM MgCl2、1 mM EDTA、1 mM DTT、0.1% BSA、30 uM GDP。将膜蛋白（5-20 ug/孔）与 VU0453379（0.1-100 uM）在 0.1 nM [3⁵S]GTPγS（比活度约为 1250 Ci/mmol）存在下于 96 孔板中 30°C 孵育 60 分钟。为评估 PAM 活性，加入亚最大浓度的 GLP-1（例如 1-10 nM）。在 10 uM 未标记的 GTPγS 存在下测定非特异性结合。反应通过 GF/B 滤膜过滤终止，然后用冰冷的缓冲液洗涤。干燥的滤膜在闪烁计数器中计数。[3⁵S]GTPγS 结合的增加反映了 G 蛋白的激活。刺激百分比是相对于基础结合（无化合物）计算的。为了直接评估变构位点的结合亲和力，可以进行放射性配体结合实验（使用标记的变构探针，如有）或与荧光标记的PAM进行竞争性结合实验。然而，这些方法并非标准方法。
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| 细胞实验 |
VU0453379盐酸盐的体外细胞实验在稳定表达人GLP-1R的HEK293细胞中进行。细胞在含有10% FBS和1%青霉素-链霉素的DMEM培养基中，于37℃、5% CO2条件下培养。为检测cAMP积累（GLP-1R的主要信号通路指标），将细胞以2 × 10⁴个/孔的密度接种于96孔白色板中，并过夜培养。细胞预先用0.5 mM IBMX（一种磷酸二酯酶抑制剂）孵育10分钟。加入VU0453379盐酸盐（0.01-100 uM），并加入或不加入亚最大浓度的GLP-1（1-3 nM）。继续在37℃孵育30分钟。随后裂解细胞，并使用均相时间分辨荧光 (HTRF) cAMP 检测试剂盒或化学发光 AlphaScreen 检测法测定 cAMP 浓度。计算内在激动剂活性和 GLP-1 反应增强的 EC₅0 值。为进行选择性测试，使用相同的 cAMP 检测方法，对表达 GCGR、GIPR 或 GLP-2R 的细胞进行化合物测试。对于钙动员（在某些系统中，钙动员是 GLP-1R 通过 Gq 偶联激活的下游效应），将细胞用钙敏感染料（例如 Fluo-4 AM 或 Cal-520 AM）孵育 60 分钟，并在加入化合物后记录荧光变化。使用 MTT 或 CellTiter-Glo 检测法评估细胞活力。
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| 动物实验 |
VU0453379盐酸盐的体内动物研究在雄性C57BL/6小鼠或Sprague-Dawley大鼠（6-8周龄，20-30 g）中进行。该化合物配制于合适的溶剂中（例如，10% DMSO + 10% Tween-80 + 80%生理盐水或0.5% CMC），并以1、3、10和30 mg/kg的剂量进行腹腔注射（IP）。对于僵直模型，动物在测试前30分钟接受腹腔注射氟哌啶醇（1 mg/kg）。VU0453379（或溶剂）在测试前15分钟进行腹腔注射。僵直症的测量方法为横杆试验：将动物的前爪放在水平金属杆上（距地面4-6厘米），记录动物保持该姿势的时间（潜伏期）（截止时间为120-180秒）。另一种方法是网格试验（将前爪放在垂直网格上）。僵直症的逆转表现为动物离开横杆的潜伏期缩短。代谢研究采用葡萄糖耐量试验（腹腔注射葡萄糖耐量试验或口服葡萄糖耐量试验）：小鼠禁食过夜后，在葡萄糖负荷试验（2克/公斤，腹腔注射或口服）前30分钟腹腔注射VU0453379（10-30毫克/公斤），并在0、15、30、60、90和120分钟时测量血糖。给药后24小时内测量食物摄入量。研究结束时，处死动物，并采集血液用于血浆胰岛素和GLP-1水平的测定。可采集脑组织样本，通过检测 cAMP 水平或通过蛋白质印迹法检测 p-CREB 来确认 GLP-1R 的激活状态。所有动物实验均需事先获得机构动物伦理委员会的批准。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
VU0453379盐酸盐的药代动力学(PK)特性已在啮齿动物临床前研究中进行了评估。在小鼠中，腹腔注射(IP)剂量为1-30 mg/kg后，该化合物被迅速吸收，血浆峰浓度(Cmax)在15-30分钟内达到(Tmax)。消除半衰期(t1/2)约为1-2小时，必要时可支持每日多次给药。该化合物可穿透中枢神经系统，其逆转氟哌啶醇诱导的僵直的能力证实了这一点。脑血浆比值尚未公开报道，但预计为中等(>0.1)。该化合物可能通过肝脏CYP450酶代谢，但尚未鉴定出具体的同工酶。血浆蛋白结合率未知。口服生物利用度尚未系统测定。该化合物可溶于二甲基亚砜 (DMSO) 和含有增溶剂（例如 Tween-80、Cremophor EL）的水性溶剂中。由于该化合物尚未进入临床开发阶段，因此尚无人体药代动力学数据。仅供研究使用；不可用于人体给药。
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| 参考文献 |
[1]. Morris LC, et al. Discovery of (S)-2-cyclopentyl-N-((1-isopropylpyrrolidin2-yl)-9-methyl-1-oxo-2,9-dihydro-1H-pyrrido[3,4-b]indole-4-carboxamide (VU0453379): a novel, CNS penetrant glucagon-like peptide 1 receptor (GLP-1R) positive allosteric modulator (PAM). J Med Chem. 2014 Dec 11;57(23):10192-7.
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| 其他信息 |
盐酸VU0453379尚未获准用于临床，也未进行临床开发。它是一种研究化合物，用于研究胰高血糖素样肽-1受体（GLP-1R）。其作用机制涉及与GLP-1R上的变构位点结合，作为正向变构调节剂（PAM）和变构激动剂（ago-PAM）发挥作用，EC₅₀为1.3 μM，GLP-1最大疗效为59.2%。该化合物对GLP-1R具有高度选择性，可穿透血脑屏障，并能逆转动物模型中由氟哌啶醇引起的僵直，提示其可能用于治疗帕金森病或抗精神病药物引起的锥体外系副作用。GLP-1R激动剂也用于治疗2型糖尿病和肥胖症，VU0453379可能在这些领域具有应用前景。该化合物尚未注册任何临床试验。仅供研究使用；不得用于人类的诊断或治疗。
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| 分子式 |
C26H35CLN4O2
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| 相关CAS号 |
VU0453379;1638646-27-1
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~212.30 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.31 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.31 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.31 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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