| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
USP7 hydrolyzes the isopeptide bond between ubiquitin and its substrate proteins, particularly those involved in the p53‑MDM2 pathway (e.g., MDM2, p53, and PTEN). By deubiquitinating MDM2, USP7 stabilizes MDM2, which in turn ubiquitylates p53, leading to p53 degradation. Inhibition of USP7 thus destabilizes MDM2, leading to p53 stabilization and activation of pro‑apoptotic genes.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在以泛素-罗丹明110 (Ub-Rho110) 为底物的生化分析中，USP7-IN-10 盐酸盐对 USP7 酶活性的抑制作用 IC₅0 为 13.39 nM。在 100 nM 浓度下，该化合物对重组 USP7 的抑制率超过 90%。它对其他去泛素化酶（包括 USP2、USP5、USP8 和 USP10）具有良好的选择性，选择性倍数超过 100 倍。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在动物模型中，使用USP7抑制剂（例如USP7-IN-10，剂量为30-100 mg/kg，腹腔注射）治疗可抑制异种移植癌模型中的肿瘤生长。例如，在HCT-116结肠癌异种移植模型中，每日给药该化合物14天后可使肿瘤生长减少约50%。肿瘤组织中p53和MDM2蛋白水平也如预期般发生改变（p53升高，MDM2降低）。
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| 酶活实验 |
酶活性测定在384孔板中进行，使用重组人USP7（0.5 nM）和荧光底物Ub-Rho110（100 nM），反应缓冲液为50 mM Tris-HCl（pH 7.5）、0.5 mM EDTA、2 mM DTT和0.01% Triton X-100。加入浓度范围为0.01 nM至10 uM的USP7-IN-10盐酸盐。反应在25℃下孵育30-60分钟，并在激发波长485 nm和发射波长535 nm处测量荧光强度。IC₅0值采用四参数逻辑方程计算。
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| 细胞实验 |
将HCT-116（p53野生型）或其他癌细胞系接种于96孔板中，并用USP7-IN-10盐酸盐（0.1-100 uM）处理48-72小时。采用CellTiter-Glo或MTT法检测细胞活力。为进行机制研究，在处理24-48小时后裂解细胞，并通过Western blotting分析蛋白裂解液中p53、MDM2、p21和cleaved caspase-3的表达。p53和p21水平的升高以及MDM2水平的降低被解释为靶向活性。
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| 动物实验 |
将5×10⁶个HCT-116细胞皮下接种于6-8周龄的雌性BALB/c裸鼠右侧腹部。当肿瘤体积达到100-200 mm³时，将小鼠随机分为治疗组（每组n=8-10只）。USP7-IN-10盐酸盐配制于10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween-80 + 45%水中，并以50 mg/kg的剂量腹腔注射，每日一次，连续14天。每2-3天用游标卡尺测量肿瘤体积。研究结束时，切除肿瘤，称重，并进行Western blotting或免疫组织化学分析。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
USP7-IN-10 盐酸盐的药代动力学特性符合小分子抑制剂（分子量 550 g/mol）的典型特征。在小鼠体内，腹腔注射（20 mg/kg）后，血浆峰浓度（Cmax ≈ 2-5 μM）在 0.5-1 小时内达到。末端半衰期为 1.5-3 小时，口服生物利用度低（<20%）。该化合物的蛋白结合率中等（≈85-90%），主要在肝脏中通过 CYP3A4 代谢。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在重复给药小鼠毒性研究中，USP7-IN-10 盐酸盐（50 mg/kg，每日一次，连续 14 天）可导致轻度体重减轻（<10%）和肝转氨酶（ALT 和 AST）可逆性升高，最高可达正常上限的 2-3 倍。较高剂量（100 mg/kg）可观察到嗜睡、胃肠道不适和血小板减少。小鼠的未观察到不良反应剂量 (NOAEL) 约为 30 mg/kg。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
USP7-IN-10 盐酸盐（化合物 1）由学术界和工业界共同发现并优化，用作 USP7 的化学探针。它已被广泛用于验证 USP7 作为 p53 野生型癌症（包括结肠癌、前列腺癌和血液系统恶性肿瘤）的治疗靶点。与游离碱相比，盐酸盐提高了其水溶性。该化合物仅供研究使用，尚未进入临床试验阶段。
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| 分子式 |
C26H30CL2N4O3S
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| 相关CAS号 |
USP7-IN-10;2755995-01-6
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid-liquid Mixture
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~190 mg/mL (~345.76 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 4.75 mg/mL (8.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 47.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 4.75 mg/mL (8.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 47.5mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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