| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IC50: 30 nM (PACAP type I receptor), 600 nM (PACAP type II receptor VIP1), 40 nM (PACAP type II receptor VIP2)[1]
PACAP (6-38) is a high-affinity antagonist for the PAC1 receptor, which is selective for PACAP over VIP. It also has antagonist activity at the VPAC1 and VPAC2 receptors (which bind both PACAP and VIP), but with lower affinity. The IC50 values are: 30 nM for the PACAP type I receptor (PAC1), 600 nM for the PACAP type II receptor VIP1 (VPAC1), and 40 nM for the PACAP type II receptor VIP2 (VPAC2). This selectivity makes PACAP(6-38) a useful tool for distinguishing PACAP-specific effects from those mediated by VIP. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
地塞米松 (DEX) 可引起多巴胺 (DA) 含量升高（通过高效液相色谱分析）和/或 MTT 法检测细胞增殖。PACAP (6-38) 在浓度足以阻断 PACAP 1 型 (PAC1) 受体时，可抑制上述效应。1 μM DEX 引起的 DA 含量升高可被 PAC1 受体拮抗剂 PACAP (6-38) 预处理 2 小时（0.1 或 1 μM）显著抑制。MTT 实验表明，DEX 可促进细胞生长。此外，PACAP 预孵育也能抑制这种作用 (6-38)。1 μM PACAP (6-38) 处理 24 小时后，DA 含量和细胞增殖均无影响。同时有报道称，浓度为 0.3 μM 的 PACAP(6-38) 可在五天内抑制分化视网膜培养细胞中酪氨酸羟化酶 (TH) 的自发积累[2]。
在表达重组PAC1或VPAC受体的细胞系中，PACAP(6-38) (0.01-10 uM) 可竞争性抑制PACAP-38诱导的cAMP积累。在PC12细胞（内源性表达PAC1的嗜铬细胞瘤细胞）中，该拮抗剂 (1 uM) 可阻断PACAP-38刺激的神经突生长和ERK磷酸化。在平滑肌和神经元制备物中，该化合物呈剂量依赖性地使PACAP-38浓度-反应曲线右移（增加EC50），但不影响最大反应。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在NGF过表达小鼠中，膀胱内注射PAC1受体拮抗剂PACAP(6-38)可显著增加排尿量（2.5倍）和膀胱收缩间期（2.0倍）。膀胱内注射PACAP(6-38)同样可降低NGF过表达小鼠的基线膀胱压力。静脉注射PACAP(6-38) (300 nM)可显著降低NGF过表达小鼠的盆腔敏感性（p≤0.01），但对野生型小鼠无影响[3]。
在NGF过表达（NGF-OE）转基因小鼠（一种慢性膀胱过度活动症模型）中，膀胱内注射PACAP(6-38)（10 uM，100 uL）可显著增加排尿量（2.5倍）和收缩间期（2.0倍），从而减轻膀胱过度活动。这表明内源性PACAP在膀胱功能中发挥作用。在神经源性炎症的啮齿动物模型中，PACAP(6-38)可阻断PACAP诱导的血管舒张和血浆蛋白外渗。在疼痛模型中，鞘内注射PACAP(6-38)可减轻机械性和热痛觉过敏，证实PACAP在疼痛传递中发挥作用。 |
| 酶活实验 |
采用稳定表达人PAC1或VPAC2受体的CHO或HEK293细胞膜进行竞争性结合实验。将膜（10-20 ug蛋白）与50 pM ¹2⁵I-PACAP-27（放射性配体）和浓度递增（0.01 nM - 10 uM）的PACAP (6-38) TFA在结合缓冲液（20 mM HEPES，pH 7.4，100 mM NaCl，5 mM MgCl2，1 mM CaCl2，0.1% BSA，0.1 mg/mL杆菌肽）中于室温孵育60分钟。结合的放射性配体通过GF/C滤膜（预先用0.3%聚乙烯亚胺浸泡）进行快速真空过滤分离，并用冰冷的缓冲液洗涤3次。滤膜在γ计数器中计数。使用 1 uM PACAP-27 测定非特异性结合。采用单一位点竞争结合分析计算平衡解离常数 (Kd) 和结合亲和力 (Ki)。
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| 细胞实验 |
将稳定转染人PAC1受体的HeLa细胞（HeLa-PAC1）接种于96孔板中（2×10⁴个细胞/孔）。用HBSS洗涤细胞后，加入100 uM PACAP (6-38) TFA（用于拮抗剂研究），或在加入10 nM PACAP-38前15分钟加入该化合物。37℃孵育15分钟后，用0.1 M HCl裂解细胞。裂解液经中和后，通过ELISA检测细胞内cAMP水平。单独使用PACAP (6-38)（1 uM）不应升高cAMP水平（拮抗活性）。对于EC50偏移实验，在加入固定浓度的PACAP-38（例如10 nM）之前，依次加入递增浓度的PACAP (6-38)（例如0.01-10 uM）。或者，在CHO-PAC1细胞中进行Ca2+流测定。将细胞用Fluo-4 AM（2 uM，30分钟，37℃）加载，然后在不同浓度（0.001-10 uM）的PACAP（6-38）存在下，用10 nM PACAP-38刺激，每2秒记录一次荧光（激发/发射波长=485/535 nm），持续1分钟。拮抗剂IC50值通过非线性回归计算。
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| 动物实验 |
成年雌性NGF-OE转基因小鼠（8-10周龄，约25克，每组5-8只）用异氟烷麻醉。进行膀胱内注射时，将27号针头经尿道插入膀胱腔，并抽取尿液。将PACAP（6-38）、TFA（100微升，10微摩尔/升，溶于无菌生理盐水）或溶剂注入膀胱，并使其在膀胱内停留10分钟。取出后，将小鼠置于代谢笼中，连续记录60分钟的排尿行为。测量膀胱收缩间期（ICI）、排尿量和压力阈值（如果使用膀胱测压法）。在大鼠疼痛模型中：雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300克）经腰椎（L4-L5）进行鞘内插管。恢复后，鞘内注射PACAP(6-38)（0.1、1、10、30 nmol，溶于5 μL生理盐水）或溶剂对照。采用Hargreaves缩爪试验（足底试验，使用辐射热源）评估热痛觉过敏。采用von Frey纤维丝评估机械性痛觉过敏。研究者对分组情况不知情。在心血管研究中，麻醉大鼠置入动脉导管以测量血压。在PACAP-38激发前5-10分钟静脉推注PACAP(6-38)（0.1-1 mg/kg）。持续记录平均动脉压（MAP）和心率。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
PACAP(6-38) 本身的药代动力学研究尚不充分。作为一种由 33 个氨基酸组成的肽，其血浆半衰期预计非常短（<30 分钟）。静脉注射（1 mg/kg）后，血浆峰浓度可能在 5 分钟内出现，随后迅速清除（主要通过肾脏和蛋白水解清除）。鞘内注射（大鼠）后，脑脊液中的半衰期较长（可能为 30-60 分钟）。膀胱灌注后，全身吸收极少。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
未见专门的毒性研究报告。在药理有效剂量（例如，大鼠10-30 nmol，小鼠膀胱灌注10 μM）的动物实验中，未观察到明显的毒性或不良行为反应。作为一种竞争性拮抗剂，该化合物耐受性良好。主要的安全考虑因素是其可能阻断内源性PACAP信号传导，从而影响应激反应、心血管调节和感觉处理。目前尚无长期毒性数据。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
PACAP (6-38) 是一种广泛使用的研究试剂，尚未获准用于人体。它是体外和体内阻断 PACAP 信号传导最常用的工具之一，使研究人员能够将 PACAP 的作用与相关肽 VIP 的作用区分开来。该化合物以冻干粉末形式在 -20℃ 下可稳定保存 2-3 年。使用时，可用无菌水或 0.9% 注射用生理盐水复溶。该肽易发生聚集；请轻轻涡旋混匀，避免反复冻融。长期保存时，请分装后置于 -80℃ 保存。
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| 分子式 |
C184H301N56FO47S
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|---|---|
| 分子量 |
4138.76
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| 相关CAS号 |
PACAP (6-38), human, ovine, rat;143748-18-9
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~24.16 mM)
H2O :~50 mg/mL (~12.08 mM) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (0.60 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (0.60 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 View More
配方 3 中的溶解度: 100 mg/mL (24.16 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.2416 mL | 1.2081 mL | 2.4162 mL | |
| 5 mM | 0.0483 mL | 0.2416 mL | 0.4832 mL | |
| 10 mM | 0.0242 mL | 0.1208 mL | 0.2416 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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