| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IC50: 3 nM (rat PAC1), 2 nM (rat VPAC1), 5 nM (human VPAC2)[1]
PACAP (1-27) targets the three known receptors for PACAP and VIP: the PAC1 receptor (selective for PACAP) and the VPAC1 and VPAC2 receptors (which bind both PACAP and VIP with similar affinity). It acts as a competitive antagonist at all three receptors. The reported IC50 values are: 3 nM for rat PAC1, 2 nM for rat VPAC1, and 5 nM for human VPAC2. This broad antagonistic profile makes PACAP(1-27) a useful tool for studying the total PACAP/VIP signaling system. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
由于人源、绵羊源、大鼠源的PACAP(1-27)和PACAP(1-38)均能以1-2 nM的Kd值等效地置换放射性配体结合，而血管活性肠肽(VIP)的效力则低1000倍，因此使用碘标记的PACAP(1-27)、人源、绵羊源、大鼠源和PACAP(1-38)进行的放射性配体受体结合实验证实了AR4-2J细胞上存在PAC受体。人源、绵羊源和大鼠源的PACAP(1-27)对VIP氨基酸修饰表现出不同的、显著增强的敏感性。人源、绵羊源和大鼠源的PACAP(1-27)能够以良好的效力和结合亲和力刺激AR4-2J细胞中IP3和cAMP的产生[2]。
在表达PAC1、VPAC1或VPAC2受体的细胞膜制备物中，PACAP(1-27)竞争性抑制PACAP-38或VIP刺激的腺苷酸环化酶活性。在基于细胞的实验中（例如，表达人VPAC2的CHO细胞，表达PAC1的PC12细胞），PACAP(1-27)（0.1-1000 nM）阻断PACAP-38（10 nM）诱导的cAMP积累，其IC50值与上述数值一致。它对这些受体没有内在的激动剂活性（即，它本身不会增加cAMP），证实了其纯拮抗剂特性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
本研究在麻醉并进行机械通气的豚鼠中，探讨了垂体腺苷酸环化酶激活肽（PACAP (1-27)，人源、绵羊源、大鼠源）对过敏原或组胺引起的肺总阻力（RL）升高的抑制作用。吸入卵清蛋白和组胺可引起RL升高，而静脉输注PACAP (1-27)（人源、绵羊源、大鼠源，剂量为0.045-4.5 nmol/kg/min）可剂量依赖性地降低RL升高。在最大剂量下，PACAP (1-27)（人源、绵羊源、大鼠源）可完全抑制卵清蛋白和组胺引起的RL升高。 RL 的增加可通过输注 PACAP (1-27)、人、绵羊和大鼠以及 β2-肾上腺素受体激动剂万托林 (0.045-4.5 nmol/kg/min) 来抑制；然而，沙丁胺醇引起的心率增加比 PACAP (1-27)、人、绵羊和大鼠更大[3]。
在豚鼠气管环标本中，PACAP (1-27) TFA (0.1-10 uM) 可完全抑制 PACAP-38 和 VIP 诱导的舒张反应，表明其对平滑肌 VPAC 受体具有功能性拮抗作用。在麻醉大鼠中，静脉输注 PACAP (1-27) TFA (0.045-4.5 nmol/kg/min) 可剂量依赖性地降低吸入卵清蛋白（一种过敏原）和组胺引起的呼吸道阻力 (RL) 增加，表明内源性 PACAP/VIP 在调节呼吸道张力中发挥作用。此外，它还能阻断 PACAP 诱导的肠系膜动脉血管舒张。 |
| 酶活实验 |
采用表达人PAC1、人VPAC2或大鼠VPAC1的CHO或HEK293细胞膜进行竞争性结合实验。将膜（10-20 ug蛋白/孔）与50 pM ¹2⁵I-PACAP-27（放射性配体）和浓度递增（0.01 nM - 10 uM）的PACAP (1-27) TFA在结合缓冲液（25 mM HEPES，pH 7.4，1 mM CaCl2，5 mM MgCl2，0.1% BSA，0.1 mg/mL杆菌肽）中于22℃孵育60-90分钟。结合的放射性配体通过预先浸泡在0.3%聚乙烯亚胺中的GF/B或GF/C滤膜进行真空过滤分离。滤膜用冰冷的 50 mM Tris-HCl 缓冲液（pH 7.4）洗涤 3 次。放射性用 γ 计数器测定。非特异性结合在 1 uM 未标记的 PACAP-27 存在下测定。IC50 值使用单一位点竞争结合方程（GraphPad Prism）计算。Ki 值使用 Cheng-Prusoff 方程计算。
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| 细胞实验 |
在实验前24小时，将稳定表达人VPAC2或大鼠PAC1的HEK293细胞接种于96孔板（2×10⁴个细胞/孔）。用HBSS洗涤细胞后，在37℃下用不同浓度的PACAP(1-27) TFA（0.001-10 uM，用含1 mM IBMX和0.1% BSA的HBSS稀释）预孵育15分钟。然后向细胞中加入PACAP-38（10 nM，溶于相同缓冲液）（以刺激cAMP生成），并在37℃下继续孵育15分钟。加入0.1 M HCl终止反应。中和裂解液后，使用竞争性ELISA或HTRF cAMP试剂盒测定细胞内cAMP水平。抑制率以仅含PACAP-38的对照组为基准计算。拮抗剂IC50定义为使PACAP-38刺激的cAMP信号降低50%的浓度。Schild图（log[拮抗剂] vs. log(CR-1)，其中CR为浓度比）可用于计算Schild斜率和平衡常数(KB)，以确认竞争性拮抗作用。对于激动剂活性测试（以确认化合物是纯拮抗剂而非部分激动剂），将细胞在不含PACAP-38的情况下与PACAP(1-27) TFA (0.001-10 uM)孵育。此时不应观察到cAMP的显著增加。
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| 动物实验 |
雄性邓肯-哈特利豚鼠（300-400 g，每组 n=6）用氨基甲酸乙酯（1.5 g/kg，腹腔注射）麻醉。进行气管插管，并将动物连接到呼吸机（呼吸频率 60 次/分钟，潮气量 10 mL/kg）。气管插管的侧端口连接到压力传感器，用于测量气道阻力（RL）。测量肺吸气压力（PIP）。进行颈静脉插管以给药。静脉注射卵清蛋白（10 mg/kg）或组胺（30 μg/kg）以诱导支气管收缩（RL 增加）。在激动剂刺激前和刺激期间，通过注射泵静脉输注PACAP (1-27) TFA（0.045、0.45、1.35、2.25、4.5 nmol/kg/min）或载体（0.9%生理盐水）20分钟。持续监测RL值。计算激动剂诱导的RL值增加的抑制百分比。在大鼠模型中：雄性Wistar大鼠（200-250 g）麻醉。分离肠系膜动脉床，并用Krebs-Henseleit溶液（95% O₂/5% CO₂，37℃，5 mL/min）灌注。平衡后，测量灌注压。在持续输注PACAP(1-27) (10-100 nM)的情况下，向动脉内注射递增剂量的PACAP-38 (1-100 pmol)。PACAP(1-27)可阻断PACAP-38诱导的血管舒张，从而导致灌注压升高。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
PACAP (1-27) 作为肽拮抗剂的药代动力学尚未得到充分研究。作为一种由 27 个氨基酸组成的肽（分子量约为 3000 Da），预计其在体内会迅速降解，半衰期为 5-15 分钟。对于持续输注实验（例如豚鼠气道模型），输注速率（0.045-4.5 nmol/kg/min）旨在维持实验过程中稳定的血浆浓度。三氟乙酸盐可确保其水溶性。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无专门的毒性研究报告。在豚鼠气道模型中，以高达 4.5 nmol/kg/min 的速率持续输注 2 小时未引起不良反应（基线心率、血压或行为指标均无变化）。该化合物在浓度高达 10 μM 的细胞培养中未显示出细胞毒性。作为一种内源性肽片段，它可能具有良好的耐受性。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
PACAP (1-27) TFA 是一种研究级肽拮抗剂，尚未获准用于临床。它是研究内源性 PACAP/VIP 系统作用的重要药理学工具。它与 PACAP (6-38) 拮抗剂（对 PAC1 的选择性更高）不同。TFA 盐是其标准商业形式。该肽以冻干粉末形式储存于 -20℃ 时至少可稳定保存 2 年。配制储备液时，可用无菌水或 0.1% 乙酸溶液复溶。该肽易发生聚集；避免反复冻融，复溶后的溶液应储存于 -80℃。
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| 分子式 |
C144H225F3N40O41S
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|---|---|
| 分子量 |
3261.68
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| 相关CAS号 |
PACAP (1-27), human, ovine, rat;127317-03-7
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~250 mg/mL (~76.65 mM)
H2O :~12.5 mg/mL (~3.83 mM) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (0.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.08 mg/mL (0.64 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (0.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.3066 mL | 1.5330 mL | 3.0659 mL | |
| 5 mM | 0.0613 mL | 0.3066 mL | 0.6132 mL | |
| 10 mM | 0.0307 mL | 0.1533 mL | 0.3066 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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