| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
ONX-0914 TFA specifically targets the LMP7 (beta5i) subunit of the immunoproteasome. The immunoproteasome (composed of beta1i, beta2i, and beta5i/LMP7) is responsible for generating peptides for presentation by MHC class I molecules. Its activity is crucial for the production of pro-inflammatory cytokines, including IL-23, TNF-alpha, and IL-6, and for the activation and proliferation of Th17 cells. By irreversibly binding to the active site of LMP7, ONX-0914 inhibits its chymotrypsin-like proteolytic activity. This leads to reduced processing of antigenic peptides, decreased inflammatory signaling, and suppression of autoimmune responses. The compound is selective for LMP7 over the constitutive proteasome subunits beta1, beta2, and beta5.
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| 体外研究 (In Vitro) |
ONX-0914 抑制 LMP7 特异性抗原的呈递。ONX-0914 抑制小鼠脾细胞的 T 细胞发育和细胞因子的产生[1]。
体外实验表明，ONX-0914 TFA 可阻断免疫细胞产生促炎细胞因子。在用抗 CD3/CD28 抗体刺激的小鼠脾细胞中，ONX-0914 (1-10 uM) 以剂量依赖的方式抑制 IL-23、IL-6 和 TNF-α 的产生。该化合物还能抑制初始 CD4+ T 细胞向 Th17 细胞的分化，表现为培养上清液中 IL-17A 产生减少。其对细胞裂解液中 LMP7 酶活性的抑制 IC50 值在亚微摩尔至低微摩尔范围内。在人外周血单核细胞 (PBMC) 中，ONX-0914 (5-20 uM) 可降低 LPS 或 T 细胞激活剂刺激后的细胞因子分泌。它对其他蛋白酶体亚基的脱靶活性较低。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
OnX-0914（2-10 mg/kg；腹腔注射；第 4、6 和 8 天）可改善小鼠关节炎[1]。T 细胞和 B 细胞依赖性 CIA（胶原诱导性关节炎）模型在接受 ONX-0914 治疗（2、6 和 10 mg/kg 体重，第 25、27、29、31 和 33 天；静脉注射）时也表现出快速的治疗反应[1]。
在体内，ONX-0914 TFA 已在自身免疫性疾病和炎症性疾病的临床前模型中展现出疗效。在小鼠胶原诱导性关节炎 (CIA) 模型中，口服或腹腔注射 ONX-0914（10-30 mg/kg/天）可减轻实验性关节炎的进展，减少关节肿胀、组织学损伤（滑膜炎、软骨侵蚀、骨破坏）以及疾病发生率。该化合物可降低血清中促炎细胞因子和自身抗体的水平。在多发性硬化症（实验性自身免疫性脑脊髓炎，EAE）模型中，ONX-0914 治疗可延缓疾病发作并减轻临床严重程度。炎症性肠病 (IBD) 模型也显示出疗效。该化合物为非竞争性且不可逆，可导致持续的靶点抑制。 |
| 酶活实验 |
无细胞检测法用于测定LMP7酶活性。将纯化的免疫蛋白酶体复合物（包含LMP7、LMP2和MECL-1）或重组LMP7与特异性针对胰凝乳蛋白酶样活性的荧光肽底物（例如，Suc-LLVY-AMC，50 uM）在检测缓冲液（25 mM HEPES，pH 7.5，0.5 mM EDTA，0.01% SDS和0.01%叠氮化钠）中孵育。向反应混合物中加入不同浓度的ONX-0914 TFA（0.001-100 uM），并在37℃下与酶预孵育15-30分钟。加入底物启动反应，并使用荧光酶标仪（激发/发射波长380/460 nm）连续监测60-90分钟。 IC50值由剂量反应曲线计算得出。对于分枝杆菌蛋白酶体，Ki值为5.2 uM。为确认不可逆性，可进行稀释或透析实验。
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| 细胞实验 |
本研究采用基于细胞的检测方法，使用小鼠脾细胞或人外周血单核细胞 (PBMC)。为检测 Th17 细胞分化，首先利用磁珠分离法从小鼠脾脏中分离出初始 CD4+ T 细胞。将细胞接种于预先包被抗 CD3 抗体 (1×10⁵ 个细胞/孔) 和可溶性抗 CD28 抗体 (2 ug/mL) 的 96 孔板中，并加入 TGF-β (5 ng/mL)、IL-6 (20 ng/mL) 和抗 IFN-γ (10 ug/mL) 以促进 Th17 细胞分化。在培养开始时加入 ONX-0914 TFA (0.1-10 uM)。培养 72-96 小时后，采用 ELISA 法检测培养上清液中 IL-17A 的水平。细胞因子分泌检测中，脾细胞（2×10⁵ 个细胞/孔）用抗 CD3/CD28 抗体刺激 48 小时，分别在有或无 ONX-0914 的情况下进行，然后通过 ELISA 法检测 IL-23、IL-6 和 TNF-α 的水平。为检测细胞活力，进行 MTT 法以排除直接细胞毒性。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型：胶原抗体诱导的关节炎（CAIA，用针对 II 型胶原蛋白的抗体 (mAb) 和内毒素在 balb/c (Bagg ALBino) 小鼠中诱导关节炎）[1]
剂量：每公斤体重 2、6 或 10 毫克 给药途径：静脉注射；分别于第 4、6 和 8 天给药 实验结果：以剂量依赖的方式阻断疾病进展，并在最高剂量下完全改善可见的疾病症状。 本研究采用雄性DBA/1J小鼠（8-10周龄）建立胶原诱导性关节炎（CIA）模型。将100 μg牛II型胶原蛋白（CII）以1:1的比例乳化于弗氏完全佐剂（CFA）中，皮内注射于小鼠尾根部进行免疫。第21天，用100 μg CII与弗氏不完全佐剂（IFA）进行加强免疫。将ONX-0914 TFA（10-30 mg/kg）配制于溶剂（例如，10% DMSO、5% Tween-80、85%生理盐水）中，从第21天至第42天（或直至研究结束）每日通过灌胃或腹腔注射给药。每周评估三次关节炎的临床评分：0 = 正常；1 = 指趾或踝关节轻度肿胀和红斑； 2级 = 整个爪子中度肿胀和红斑；3级 = 整个爪子重度肿胀和红斑；4级 = 关节强直伴畸形。使用游标卡尺测量爪子厚度。对后爪（安乐死后）进行组织病理学评分，评估炎症、血管翳形成、软骨侵蚀和骨吸收情况。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中抗CII抗体和细胞因子（IL-6、TNF-α、IL-17）的水平。此外，还使用了用MOG35-55肽免疫的C57BL/6小鼠的EAE模型。ONX-0914可减轻EAE的临床严重程度。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
TFA盐形式的分子量为571.66 g/mol（游离碱）。冻干粉末应储存在-20℃的密封容器中，避光防潮，可稳定保存长达3年。溶液储存时，用DMSO配制10-50 mM的储备液，并分别储存在-80℃（可保存长达6个月）和-20℃（可保存长达1个月）。该化合物可溶于DMSO（10-20 mg/mL）。用于体内口服给药时，可配制于10% DMSO + 5% Tween-80 + 85%生理盐水、0.5%甲基纤维素或其他合适的溶剂中。用于腹腔注射时，可使用相同的溶剂。TFA反离子可提高溶解度。该化合物是一种选择性LMP7抑制剂。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
本产品仅供研究使用，不可用于人体治疗。目前尚无ONX-0914 TFA的具体毒性数据。在胶原诱导性关节炎的临床前研究中，小鼠接受ONX-0914治疗，剂量高达30 mg/kg/天，持续3-4周，未出现明显的体重减轻、死亡或明显的毒性症状（如活动、毛发或行为的改变）。免疫蛋白酶体主要在免疫细胞中表达，由于组成型蛋白酶体功能保持完整，因此预计其抑制具有良好的耐受性。然而，长期抑制可能会损害免疫功能，包括增加感染的易感性。应遵循标准的实验室安全操作规程（佩戴手套、实验服和护目镜）。避免吸入粉末。该化合物未经FDA批准。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
免疫蛋白酶体是蛋白酶体的一种特殊亚型，由炎症细胞因子诱导产生。它在MHC I类表位的生成、免疫细胞活化和自身免疫性疾病中发挥着重要作用。LMP7（β5i）是免疫蛋白酶体的三个催化亚基之一。ONX-0914是一种选择性LMP7抑制剂，已被广泛用作化学探针，用于解析免疫蛋白酶体在炎症和自身免疫中的作用。该化合物在关节炎、多发性硬化症、炎症性肠病和狼疮模型中均显示出活性。其非竞争性、不可逆的作用机制确保了对靶点的持续作用。母体非氘代化合物为ONX-0914（PR-957）。该化合物尚未获得临床批准。请勿包含供应商信息。
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| 分子式 |
C33H41F3N4O9
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|---|---|
| 分子量 |
694.70
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| 相关CAS号 |
ONX-0914;960374-59-8
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~143.95 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.60 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.60 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.60 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4395 mL | 7.1974 mL | 14.3947 mL | |
| 5 mM | 0.2879 mL | 1.4395 mL | 2.8789 mL | |
| 10 mM | 0.1439 mL | 0.7197 mL | 1.4395 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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