| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg | |||
| Other Sizes |
| 靶点 |
LMP7 (IC50 ~10 nM)
Immunoproteasome subunit LMP7 (β5i, chymotrypsin-like activity): - Recombinant human LMP7: IC₅₀ ≈ 4 nM; - Selectivity over constitutive proteasome subunits: β5 (constitutive) IC₅₀ ≈ 300 nM, β1/β2 (constitutive/immunoproteasome) IC₅₀ > 1000 nM, showing >75-fold selectivity for LMP7 [1] - Latent HIV-1 activation (via HSF-1/p-TEFb pathway): No explicit EC₅₀ for HIV-1 reactivation; 100 nM ONX-0914 (PR-957) induces ~60% HIV-1 GFP expression in J-Lat 9.2 cells (latent HIV-1 model) [3] - Mycobacterium tuberculosis (Mtb) proteasome: No significant inhibition; ONX-0914 (10 μM) showed <10% inhibition of Mtb proteasome activity (vs. psoralen derivatives as positive controls) [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
ONX-0914 对 LMP7 的选择性比第二敏感位点 β5 或 LMP2 高 20 至 40 倍。 ONX-0914 在体外和体内阻断 LMP7 特异性、MHC-I 限制性抗原的呈递，与组成型蛋白酶体的交叉反应性最小。 ONX-0914 选择性抑制 LMP7 可阻止激活的单核细胞产生白细胞介素 23 (IL-23)，以及 T 细胞产生干扰素 γ 和 IL-2。 LMP7 抑制可阻止约 90% 的 IL-23 产生，以及约 50% 的肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 和 IL-6 产生。细胞测定：将PBMC用200nM ONX-0914处理1小时，并暴露于1ng/ml LPS 24小时。分析上清液中炎症细胞因子的表达。 ONX-0914 选择性抑制 LMP7 (> 80%)。 LMP7 抑制可阻止 IL-23 的产生 > 90%，以及肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 和 IL-6 的产生约 50%。较高浓度的 ONX-0914 可诱导 LMP2 和 MECL-1 的抑制，进一步减少 TNF-α 和 IL-6 的分泌，表明这些亚基在细胞因子调节中发挥作用。
抗炎活性: 1. 免疫细胞细胞因子抑制: - 人巨噬细胞（LPS刺激）：ONX-0914（1 nM–100 nM）浓度依赖性降低TNF-α（IC₅₀≈8 nM）和IL-6（IC₅₀≈12 nM）分泌。50 nM浓度下，TNF-α/IL-6水平较对照组分别降低~70%/~65%[1] - 小鼠CD4⁺ T细胞（抗CD3/CD28刺激）：100 nM ONX-0914使IFN-γ分泌减少~55%，T细胞增殖减少~40%（MTT法）[1] 2. 信号通路抑制：LPS刺激巨噬细胞的Western blot显示，50 nM ONX-0914使p-IκBα（Ser32）降低~60%，p-p38 MAPK降低~50%，抑制NF-κB和MAPK通路[1] - 潜伏HIV-1激活: 1. J-Lat细胞系（J-Lat 9.2/J-Lat 10.6，含GFP报告基因的潜伏HIV-1）: - ONX-0914（10 nM–200 nM）浓度依赖性激活HIV-1。100 nM时，GFP⁺细胞比例达~60%（J-Lat 9.2）和~55%（J-Lat 10.6），对照组仅~5%（流式细胞术）[3] - 作用机制：100 nM ONX-0914促进HSF-1核转位（免疫荧光，上调~3.5倍）和p-TEFb（CDK9/cyclin T1）结合（co-IP实验，上调~2.8倍），增强HIV-1 LTR转录[3] 2. 原代CD4⁺ T细胞（来自ART抑制的HIV感染者）：100 nM ONX-0914使HIV-1 RNA水平较对照组增加~4倍（qPCR）[3] - 无显著抗Mtb活性: 1. Mtb H37Rv培养：ONX-0914（1 μM–100 μM）对Mtb生长无抑制作用（CFU计数法），而补骨脂素衍生物MIC₅₀≈10 μM[2] 2. Mtb蛋白酶体抑制：10 μM ONX-0914对Mtb蛋白酶体活性抑制率<10%（荧光底物法）[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在类风湿关节炎和狼疮小鼠模型中，ONX-0914 治疗可逆转疾病迹象，并在耐受良好的剂量下减少细胞浸润、细胞因子产生和自身抗体水平。 ONX-0914在小鼠中的最大耐受剂量（MTD）为30 mg/kg体重。 ONX-0914 在 LMP7 选择性浓度下，IFN-g 释放被抑制约 60%，在更高浓度下，抑制约 90%。 IL-2 的产生也被抑制约 50%。
小鼠胶原诱导关节炎（CIA）模型: 1. 分组：DBA/1小鼠（n=8/组）随机分为3组：（1）对照组（腹腔注射5% DMSO+95%生理盐水）；（2）ONX-0914 1 mg/kg组；（3）ONX-0914 5 mg/kg组[1] 2. 给药方案：牛II型胶原免疫诱导CIA，于免疫后21天（关节炎发作时）开始给药，腹腔注射，每日1次，持续21天[1] 3. 疗效: - 关节炎评分：较对照组分别降低~40%（1 mg/kg）和~65%（5 mg/kg）（评分基于关节肿胀/红斑，0–16分制）[1] - 血清细胞因子：TNF-α/IL-6/IFN-γ水平较对照组分别降低~50%/~45%/~40%（1 mg/kg）和~70%/~65%/~55%（5 mg/kg）（ELISA）[1] - 关节病理：5 mg/kg组滑膜增生减少~55%，炎性细胞浸润减少~60%（H&E染色）[1] |
| 酶活实验 |
人LMP7（β5i）蛋白酶体活性实验（文献[1]、[3]）:
1. 蛋白制备：重组人LMP7（β5i）及组成型蛋白酶体亚基（β5、β1、β2）在大肠杆菌中表达，通过镍螯合亲和层析（N端His标签）纯化[1] 2. 反应体系：100 μL反应混合物含50 mM Tris-HCl（pH7.5）、10 mM MgCl₂、1 mM DTT、20 μM荧光底物（Z-LLVY-AMC，检测糜蛋白酶样活性）及ONX-0914（0.1 nM–1000 nM，溶剂为对照）[1] 3. 孵育与检测：37℃孵育60分钟，每10分钟测定荧光强度（激发光380 nm，发射光460 nm）。抑制率=（1–药物组荧光强度/对照组荧光强度）×100%[1] 4. 数据分析：使用GraphPad Prism将抑制率拟合至四参数逻辑斯蒂曲线，计算IC₅₀值[1] - Mtb蛋白酶体活性实验: 1. 蛋白制备：重组Mtb蛋白酶体（20S核心颗粒）在大肠杆菌中纯化[2] 2. 反应体系：100 μL混合物含25 mM Tris-HCl（pH7.0）、5 mM MgCl₂、1 mM ATP、20 μM Z-LLVY-AMC及ONX-0914（1 nM–100 μM）[2] |
| 细胞实验 |
在接受 200 nM ONX-0914 长达一小时的处理后，PBMC 暴露于 1 ng/ml LPS 24 小时。我们检查了上清液中炎症细胞因子的表达。 LMP7 被 ONX-0914 特异性抑制 (> 80%)。 LMP7 的抑制导致 IL-23 的产生减少 >90%，TNF-α 和 IL-6 的产生减少约 50%。大量的 ONX-0914 抑制 LMP2 和 MECL-1，进一步减少 TNF-α 和 IL-6 的分泌，表明这些亚基在细胞因子调节中的潜在功能。
巨噬细胞细胞因子抑制实验: 1. 细胞接种：人外周血单核细胞分化为巨噬细胞（5×10⁵个细胞/孔，24孔板），用含10% FBS的RPMI 1640培养基培养[1] 2. 药物处理：ONX-0914（1 nM–100 nM）预处理2小时，再用LPS（100 ng/mL）刺激24小时[1] 3. 检测：收集上清液，ELISA测定TNF-α/IL-6水平；MTT法确认细胞活力>90%[1] - J-Lat细胞HIV-1激活实验: 1. 细胞接种：J-Lat 9.2细胞（2×10⁵个细胞/孔，6孔板），用含10% FBS的RPMI 1640培养基培养[3] 2. 药物处理：加入ONX-0914（10 nM–200 nM），37℃、5% CO₂孵育48小时[3] 3. 检测：收集细胞，流式细胞术量化GFP⁺细胞；J-Lat 10.6细胞用荧光素酶实验检测HIV-1 LTR转录（100 nM时上调~4.5倍）[3] 4. Western blot/co-IP：用含蛋白酶/磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞，30 μg蛋白进行免疫印迹（一抗：抗HSF-1、抗CDK9、抗cyclin T1）；用抗CDK9抗体进行co-IP实验，检测p-TEFb复合物[3] - Mtb生长抑制实验: 1. Mtb培养：Mtb H37Rv在7H9培养基中培养，加入ONX-0914（1 μM–100 μM），孵育7天[2] 2. 检测：取100 μL培养物接种于7H11琼脂，3周后计数CFU（与对照组相比无显著减少）[2] |
| 动物实验 |
collagen antibody–induced arthritis (CAIA) and collagen-induced arthritis (CIA)
2, 6 or 10 mg/kg i.v. Mouse CIA model protocol: 1. Animal housing: Female DBA/1 mice (6–8 weeks old, 18–22 g) housed in SPF facilities (22–25°C, 12-hour light/dark cycle) with free access to food/water [1] 2. CIA induction: Mice immunized subcutaneously with 100 μg bovine type II collagen emulsified in complete Freund’s adjuvant (CFA) on day 0; boosted with incomplete Freund’s adjuvant (IFA) on day 21 [1] 3. Grouping and treatment: On day 21 (arthritis onset), mice randomized into 3 groups. ONX-0914 dissolved in 5% DMSO + 95% normal saline, administered intraperitoneally (10 μL/g body weight) at 1 mg/kg or 5 mg/kg, once daily for 21 days. Control received solvent alone [1] 4. Monitoring and analysis: Arthritis score recorded every 3 days; serum collected for cytokine ELISA on day 42. Mice euthanized via CO₂ inhalation; knee joints excised, fixed in 4% paraformaldehyde, decalcified, and stained with H&E for histopathology [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
In vitro toxicity (literature [1], [3]):
1. Normal human PBMCs: 100 nM ONX-0914 (72-hour treatment) reduced viability by <10% (MTT assay) [1] 2. J-Lat cells: 200 nM ONX-0914 (48-hour treatment) showed no significant cytotoxicity (viability >85%, trypan blue exclusion) [3] - In vivo toxicity: 1. Mouse CIA model (5 mg/kg, intraperitoneal, daily, 21 days): - No mortality or clinical toxicity (e.g., lethargy, diarrhea); body weight change <5% vs. baseline [1] - Serum ALT, AST, creatinine, and BUN levels within normal ranges; no histopathological lesions in liver, kidney, or spleen [1] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
See also: Onx-0914 (annotation moved to).
Mechanism of action: ONX-0914 (PR-957) is a selective inhibitor of the immunoproteasome subunit LMP7 (β5i), which is highly expressed in activated immune cells. By blocking LMP7-mediated protein degradation, it suppresses NF-κB/MAPK pathways and pro-inflammatory cytokine production (anti-inflammatory effect) [1]; in latent HIV-1, it activates HSF-1, promoting p-TEFb assembly to drive HIV-1 LTR transcription [3] - Therapeutic potential: (1) Autoimmune diseases (e.g., rheumatoid arthritis) based on anti-inflammatory activity in CIA models [1]; (2) HIV-1 latency reversal (“shock and kill” strategy) by reactivating latent HIV-1 in CD4⁺ T cells [3]; (3) No potential for Mtb infection (weak Mtb proteasome inhibition) [2] |
| 分子式 |
C31H40N4O7
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|---|---|
| 分子量 |
580.67
|
| 精确质量 |
580.289
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| 元素分析 |
C, 64.12; H, 6.94; N, 9.65; O, 19.29
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| CAS号 |
960374-59-8
|
| 相关CAS号 |
ONX-0914 TFA
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| PubChem CID |
23642227
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| 外观&性状 |
white to off-white solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
878.0±65.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
484.8±34.3 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±0.3 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.569
|
| LogP |
3.41
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| tPSA |
149.07
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
14
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| 重原子数目 |
42
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| 分子复杂度/Complexity |
928
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| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
C([C@@]1(OC1)C)(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN1CCOCC1)CC1C=CC(OC)=CC=1)CC1C=CC=CC=1
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| InChi Key |
WQAVPPWWLLVGFK-VTNASVEKSA-N
|
| InChi Code |
/C31H40N4O7/c1-21(32-27(36)19-35-13-15-41-16-14-35)29(38)34-26(18-23-9-11-24(40-3)12-10-23)30(39)33-25(28(37)31(2)20-42-31)17-22-7-5-4-6-8-22/h4-12,21,25-26H,13-20H2,1-3H3,(H,32,36)(H,33,39)(H,34,38)/t21-,25-,26-,31+/m0/s1
|
| 化学名 |
(2S)-3-(4-methoxyphenyl)-N-[(2S)-1-[(2R)-2-methyloxiran-2-yl]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]-2-[[(2S)-2-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]propanoyl]amino]propanamide
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| 别名 |
ONX0914; PR-957; ONX 0914; PR 957; ONX-0914; PR957
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.17 mg/mL (3.74 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 21.7 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.17 mg/mL (3.74 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 21.7 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.17 mg/mL (3.74 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 2% DMSO+castor oil: 10 mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7221 mL | 8.6107 mL | 17.2215 mL | |
| 5 mM | 0.3444 mL | 1.7221 mL | 3.4443 mL | |
| 10 mM | 0.1722 mL | 0.8611 mL | 1.7221 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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