LL-37, human TFA

目录号: V76816 纯度: ≥98%
LL-37,人 TFA 是一种 37 残基两亲性组织蛋白酶衍生的抗菌肽,具有广泛的抗菌作用。
LL-37, human TFA 产品类别: Bacterial
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
LL-37,即人源TFA,是一种由37个氨基酸残基组成的两亲性组织蛋白酶衍生抗菌肽,具有广谱抗菌活性。LL-37,即人源TFA,有助于保护角膜免受感染并调节伤口愈合。
LL-37,即人源TFA,是37个氨基酸残基的两亲性抗菌肽(LL-37)的三氟乙酸盐,LL-37是目前已知的唯一的人类抗菌肽。它具有广谱抗菌活性,并能调节伤口愈合。
生物活性&实验参考方法
靶点
LL-37 targets microbial membranes. It also interacts with various host receptors, including formyl peptide receptor-like 1 (FPRL1), P2X7, and the epidermal growth factor receptor (EGFR), thereby modulating immune cell chemotaxis and cytokine release.
体外研究 (In Vitro)
LL-37(人三氟乙酸,1–20 μg/mL;24 小时)可影响人角膜内皮细胞 (HCEC) 的迁移 [2]。LL-37(人三氟乙酸,0.0001–5 μg/mL;6–24 小时)可影响 HCEC 的细胞因子产生 [2]。当 LL-37(人三氟乙酸,1–100 μg/mL;24 小时)浓度高于 10 μg/mL 时,对 HCEC 表现出剂量依赖性细胞毒性 [2]。
LL-37,一种人源三氟乙酸(TFA),对细菌(革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌)、病毒和真菌均具有广谱抗菌活性。它还能影响免疫细胞趋化性和细胞因子释放。LL-37 可保护角膜免受感染并调节伤口愈合。在人角膜上皮细胞(HCEC)中,LL-37(1-20 ug/mL,24 小时)可影响细胞迁移,(0.0001-5 ug/mL,6-24 小时)可影响细胞因子分泌。
体内研究 (In Vivo)
用 LL-37(人 TFA,0.4-2.0 mg/kg;气管内注射一次)治疗由 MRSA 引起的肺炎小鼠效果更好[3]。
LL-37(人源性TFA,0.4-2.0 mg/kg;气管内注射,单次)可改善小鼠的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)肺炎。它能降低IL-6和TNF-α的释放,从而减轻MRSA引起的肺炎。研究还表明,在严重先天性中性粒细胞减少症中,中性粒细胞产生的LL-37量也会上调。
酶活实验
对于非细胞结合试验,可测试LL-37对多种细菌和真菌的抗菌活性。标准最低抑菌浓度(MIC)测定在96孔板中进行。将LL-37进行系列稀释(0.5-128 ug/mL),稀释液为肉汤(例如Mueller-Hinton肉汤)。加入细菌悬液(5×10⁵ CFU/mL),并将孔板在37℃下孵育16-24小时。MIC为抑制可见细菌生长的最低浓度。对于受体结合试验,LL-37可与荧光染料(例如FITC)标记,并用于流式细胞术或共聚焦显微镜,以研究其与表达FPRL1等受体的细胞的结合情况。
细胞实验
细胞迁移实验[2]
细胞类型: 人角膜上皮细胞(HCEC)
测试浓度: 1、2.5、5、10 和 20 μg/mL
孵育时间: 24 小时
实验结果: 剂量依赖性地刺激 HCEC 迁移,但对细胞增殖无影响。

细胞活力测定[2]
细胞类型: 人角膜上皮细胞(HCEC)
测试浓度: 0.0001、0.001、0.01、0.1、0.5、1 和 5 μg/mL
孵育时间: 6 和 24 小时
实验结果: 在 HCEC 中,IL-8、IL-6、IL-1β 和 TNF-α 的分泌在 6 小时和 24 小时呈剂量依赖性增加。
对于细胞实验,采用划痕愈合实验进行人角膜上皮细胞 (HCEC) 迁移实验:将细胞培养至汇合,用移液器吸头划痕,然后用 LL-37 (1-20 ug/mL) 处理细胞 24 小时。测量细胞迁移距离。用 LL-37 (0.0001-5 ug/mL, 6-24 h) 处理 HCEC 后,通过 ELISA 检测细胞因子(IL-8、IL-6、IL-1β、TNF-α)的分泌。用 LL-37 (1-100 ug/mL, 24 h) 处理细胞后,通过 LDH 释放实验或 MTT 实验检测细胞毒性(浓度高于 10 ug/mL 时观察到剂量依赖性细胞毒性)。对于巨噬细胞检测,将分化为巨噬细胞的 THP-1 细胞用 LL-37 处理,并通过流式细胞术分析表面标志物(CD86、CD206)的表达。
动物实验
动物/疾病模型: 6-8 周龄 C57BL/6 小鼠,患有 MRSA 诱导的肺炎[3]
剂量: 0.4、0.8、1.2、1.6 和 2.0 mg/kg
给药途径: 气管内注射;0.4-2.0 mg/kg,单次给药
实验结果: IL-6 和 TNF-α 释放减少,从而减轻了受试小鼠的 MRSA 诱导的肺炎。
在体内动物研究中,使用6-8周龄的C57BL/6小鼠建立MRSA诱导的肺炎模型。小鼠经气管内感染MRSA(5×10⁷ CFU)。感染后立即(单次)经气管内给予LL-37(人源TFA,剂量分别为0.4、0.8、1.2、1.6和2.0 mg/kg)。感染24小时后处死小鼠。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细菌计数和细胞因子(IL-6、TNF-α)分析。收集肺组织进行组织病理学检查。LL-37可改善小鼠MRSA诱导的肺炎。
药代性质 (ADME/PK)
LL-37 是一种由 37 个氨基酸残基组成的肽(分子量约为 4607 Da)。作为一种肽,由于蛋白水解降解和快速肾清除,其血浆半衰期很短(仅几分钟)。三氟乙酸盐形式可改善其溶解度和操作性。通常采用局部给药(外用、气管内给药)以达到较高的局部浓度。目前尚无详细的 ADME 数据。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
LL-37 在浓度超过 10 μg/mL 时对人角膜内皮细胞 (HCEC) 表现出剂量依赖性细胞毒性。动物研究表明,气管内给予 2.0 mg/kg 的 LL-37 耐受性良好。局部给药可能引起轻微炎症。TFA 反离子可能具有刺激性。
参考文献

[1]. LL-37, the only human member of the cathelicidin family of antimicrobial peptides. Biochim Biophys Acta. 2006 Sep;1758(9):1408-25.

[2]. Multifunctional roles of human cathelicidin (LL-37) at the ocular surface. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2006 Jun;47(6):2369-80.

[3]. Antimicrobial peptide LL-37 and IDR-1 ameliorate MRSA pneumonia in vivo. Cell Physiol Biochem. 2013;32(3):614-23.

其他信息
LL-37 是目前已知的唯一一种人源抗菌肽,具有多种功能,包括直接抗菌活性和免疫调节作用。目前正在研究其在治疗感染和促进伤口愈合方面的潜力。三氟乙酸盐是常用的研究用形式。本产品仅供研究使用,不得用于人体。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C205H340N60O53.XC2HF3O2
分子量
4493.26 (free base)
相关CAS号
LL-37, human;154947-66-7;LL-37, human acetate
外观&性状
White to off-white solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O :~100 mg/mL
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 16.67 mg/mL (Infinity mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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