| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
KY-02327 acetate targets the protein-protein interaction between Dishevelled (Dvl), a key scaffold protein in the Wnt signaling pathway, and CXXC5 (CXXC finger protein 5), a negative regulator of Wnt/beta-catenin signaling. By inhibiting this interaction, it relieves CXXC5-mediated suppression.
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| 体外研究 (In Vitro) |
KY-02327 乙酸盐（1–10 μM；2 天；MC3T3E1 细胞，一种小鼠前成骨细胞系）以剂量依赖的方式促进核内 β-catenin 和 Runx2 的积累[1]。成骨细胞发育的指标——胶原蛋白 1a (Col1a) 和骨钙素 (OCN) 的 mRNA 水平在暴露于 KY-02327 (1-10 μM) 乙酸盐时升高[1]。
KY-02327 醋酸酯对 Wnt/β-catenin 信号通路具有激活作用。在 1-10 uM 的浓度下，它能提高成骨细胞分化标志物胶原蛋白 Ia (Col1a) 和骨钙素 (OCN) 的 mRNA 水平。KY-02327 醋酸酯是一种有效的 Dvl-CXXC5 相互作用抑制剂。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在卵巢切除 (OVX) 小鼠模型中，KY-02327（20 mg/kg；口服；每周连续 5 天，持续 4 周）醋酸盐可有效恢复骨丢失[1]。
体内研究表明，KY-02327醋酸盐能够促进成骨细胞分化和骨形成。它还可能通过阻断MC4R信号通路来调节摄食行为和能量消耗，使其成为研究肥胖和恶病质等代谢性疾病的宝贵工具。 |
| 酶活实验 |
使用重组纯化蛋白进行Dvl-CXXC5相互作用抑制剂的非细胞结合实验。实验缓冲液由20 mM HEPES（pH 7.5）、150 mM NaCl、1 mM DTT、0.005% Tween-20和0.1% BSA组成。对于基于ELISA的实验，将重组His标签Dvl蛋白（例如Dvl1、Dvl2或Dvl3，浓度为0.5-2 ug/mL）固定在Ni-NTA板上，或直接包被于96孔板上，并在4℃下孵育过夜。用 3% BSA 或 5% 脱脂牛奶封闭后，加入不同浓度的 KY-02327 乙酸盐（1 nM 至 100 uM），随后加入重组 GST 标签的 CXXC5 蛋白（0.1-0.5 ug/mL），孵育 60-90 分钟。使用抗 GST-HRP 抗体和 TMB 底物检测结合的 CXXC5。测量 450 nm 处的吸光度。IC50 值通过非线性回归确定。对于表面等离子共振 (SPR) 检测，将 His 标签的 Dvl 蛋白固定在 Ni-NTA 传感器芯片上，或通过胺偶联连接到 CM5 芯片上。将浓度为 0.1-1000 nM 的 KY-02327 醋酸盐溶于运行缓冲液（10 mM HEPES、150 mM NaCl、0.005% Tween-20、0.1% BSA、0.5 mM TCEP，pH 7.4）中，流过芯片。监测结合（2-3 分钟）和解离（5-10 分钟）阶段。将传感图拟合到 1:1 结合模型，以计算 ka、kd 和 KD 值。对于竞争性结合实验（AlphaScreen 或 TR-FRET），使用生物素标记的 Dvl 和 His 标签的 CXXC5。加入供体磁珠（链霉亲和素包被）和受体磁珠（抗 His 标签）。在 KY-02327 醋酸盐存在的情况下，Dvl 和 CXXC5 之间的相互作用被破坏，导致信号降低。据此计算 IC50 值。
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| 细胞实验 |
KY-02327 醋酸酯的细胞活性检测采用成骨细胞前体细胞系，例如 MC3T3-E1、C3H10T1/2 或原代骨髓间充质干细胞 (BMSCs)。将细胞以 5×10⁴ 个/孔的密度接种于 6 孔或 24 孔板中，并在分化培养基（含 10% FBS、50 ug/mL 抗坏血酸和 10 mM β-甘油磷酸钠的 α-MEM 或 DMEM）中培养。加入浓度为 0.1-10 uM 的 KY-02327 醋酸酯，培养 3-14 天。基因表达分析中，分别于第 3、7 和 14 天使用 TRIzol 试剂提取总 RNA。反转录采用随机引物或 oligo-dT 引物进行。采用 SYBR Green 或 TaqMan 探针进行 qRT-PCR，以检测成骨细胞分化标志物的 mRNA 水平，这些标志物包括：I 型胶原 α1 链 (Col1a1)、骨钙素 (OCN/Bglap)、碱性磷酸酶 (ALP)、Runx2 和骨形成蛋白 (Sp7)。所有数值均以管家基因（GAPDH、β-肌动蛋白或 18S rRNA）进行标准化。对于蛋白质表达，将细胞在含有蛋白酶/磷酸酶抑制剂的 RIPA 缓冲液中裂解，取 20-40 ug 蛋白裂解液进行 SDS-PAGE 电泳分离，然后转移至 PVDF 膜，并使用针对 β-连环蛋白、磷酸化 β-连环蛋白、Runx2、OCN 和 Dvl 的抗体进行免疫印迹分析。增殖实验中，将细胞接种于96孔板中，用KY-02327醋酸盐（0.1-50 uM）处理24-72小时，然后用MTT或CellTiter-Glo法检测细胞活力。碱性磷酸酶（ALP）活性染色实验中，用4%多聚甲醛固定细胞，并以BCIP/NBT或对硝基苯磷酸酯（pNPP）为底物进行染色。pNPP水解后，通过测定405 nm处的吸光度来定量ALP活性。矿化实验（茜素红S染色）中，将细胞在含有KY-02327醋酸盐的分化培养基中培养14-21天，然后用70%乙醇固定，并用40 mM茜素红S（pH 4.2）染色30分钟。用10%氯化十六烷基吡啶洗脱染色物1小时，并在570 nm处测量吸光度。对于MC4R信号通路研究（代谢效应），用KY-02327乙酸盐（0.1-10 uM）处理表达MC4R的细胞，并通过HTRF或ELISA检测cAMP水平以评估MC4R信号通路的抑制情况。KY-02327乙酸盐可能阻断MC4R信号通路，从而调节摄食行为和能量消耗。
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| 动物实验 |
已开展体内动物实验以评估KY-02327醋酸盐的骨合成代谢作用。实验采用雌性或雄性C57BL/6小鼠（8-12周龄）。KY-02327醋酸盐以1-20 mg/kg的剂量腹腔注射，每周3-5次，持续4-8周。治疗结束后，通过对股骨或胫骨进行微型计算机断层扫描（micro-CT）评估骨形成情况。测量的参数包括骨矿物质密度（BMD，mg/cc）、骨体积分数（BV/TV，%）、骨小梁数量（Tb.N，mm⁻¹）、骨小梁厚度（Tb.Th，mm）和骨小梁间距（Tb.Sp，mm）。为进行组织形态计量学分析，在处死小鼠前10天和3天，分别腹腔注射钙黄绿素（10 mg/kg）以标记矿化表面。制备未脱钙的骨切片（5-10微米），并测量动态组织形态计量学参数：矿物质沉积率（MAR，微米/天）、矿化表面（MS/BS，%）和骨形成率（BFR/BS，微米³/微米²/天）。对于血清标志物，通过心脏穿刺采集血液，分离血清，并用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定成骨细胞标志物（P1NP，I型胶原N端前肽）和破骨细胞标志物（CTX-1，I型胶原C端肽）的水平。对于代谢紊乱研究，小鼠喂食高脂饮食（HFD）4-8周以诱导肥胖。每天腹腔注射KY-02327醋酸盐，持续2-4周。每周监测体重、食物摄入量和空腹血糖。实验结束时，称量白色脂肪组织（WAT）和棕色脂肪组织（BAT）的重量。葡萄糖耐量试验 (GTT) 和胰岛素耐量试验 (ITT) 通过腹腔注射葡萄糖 (1-2 g/kg) 或胰岛素 (0.5-1 U/kg) 进行，并在 0、15、30、60、90 和 120 分钟时测量血糖水平。在药代动力学研究中，将 KY-02327 醋酸盐以 5-20 mg/kg 的剂量静脉注射、腹腔注射或口服给药于小鼠或大鼠。在多个时间点（0、0.25、0.5、1、2、4、6、8、12 和 24 小时）采集血样。采用液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 测定血浆浓度。使用非房室模型分析（Phoenix WinNonlin 或类似软件）计算药代动力学参数（Tmax、Cmax、AUC、t½、CL、Vd）。详细的药代动力学参数未公开。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
KY-02327 醋酸盐是 KY-02061 的代谢稳定类似物，旨在改善其药代动力学性质。代谢稳定化可能涉及对代谢不稳定位点的修饰，以降低清除率并延长半衰期。与游离碱相比，醋酸盐形式提高了水溶性和操作性能。使用肝微粒体（人、大鼠、小鼠）进行的体外代谢稳定性试验以及在啮齿动物中进行的体内药代动力学研究表明，该化合物可能具有良好的药代动力学特征（例如，中等至高的口服生物利用度、延长的半衰期和良好的组织分布）。预计该化合物主要通过肝脏代谢清除，主要由 CYP450 酶（可能是 CYP3A4/5）代谢，也可能通过结合（葡萄糖醛酸化）代谢。分布容积可能为中等至大，表明其可分布到包括骨骼在内的组织中，这与其成骨作用相关。详细的药代动力学参数（口服生物利用度、半衰期、清除率）尚未公开。该化合物被描述为“代谢稳定”，这表明其代谢稳定性有所提高，因此与KY-02061相比具有更好的药代动力学特征。如需详细信息，用户应参考已发表的文献或联系供应商。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
KY-02327 乙酸酯的正式毒理学研究尚未发表。该化合物仅供研究使用，不得用于人类或兽医用途。在细胞培养研究中，通过 MTT 细胞活力检测评估，KY-02327 乙酸酯在浓度高达 10-20 μM 时，持续 72 小时，通常耐受性良好。在较高浓度（>50 μM）或长时间暴露（>96 小时）下，可能会观察到一些细胞毒性，这可能是由于脱靶效应所致。在动物研究中，腹腔注射 KY-02327 乙酸酯 1-20 mg/kg，持续长达 8 周，通常耐受性良好，未观察到明显的毒性迹象，例如显著的体重减轻、行为改变、腹泻或毛发变化。公开数据中未报告靶器官毒性。然而，由于该化合物的作用机制（Wnt/β-catenin激活），其潜在的靶向毒性理论上可能包括细胞过度增殖（包括潜在的肿瘤促进作用），因为异常的Wnt激活与多种癌症相关。研究人员在设计研究时，尤其是在进行长期研究或在易患癌症的模型中进行研究时，应注意这种理论风险。目前尚未发表有关该化合物的遗传毒性（Ames试验、微核试验）、致癌性或生殖毒性的研究。处理KY-02327醋酸酯时，应遵循标准安全预防措施，包括使用适当的个人防护装备并在通风橱内操作。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
KY-02327 醋酸酯是一种强效且选择性的 Dishevelled (Dvl)-CXXC5 蛋白-蛋白相互作用抑制剂。Wnt/β-catenin 信号通路对骨形成和成骨细胞分化至关重要，而 CXXC5 通过与 Dvl 结合并阻止 Dvl 信号复合物的形成，发挥 Wnt 信号负反馈调节作用。KY-02327 醋酸酯通过破坏 Dvl-CXXC5 相互作用，解除对 Wnt 信号通路的抑制，从而导致 β-catenin 的稳定和核转位，激活 TCF/LEF 介导的转录，并上调成骨细胞分化基因（Runx2、OCN、Col1a1、ALP）。这种机制使得 KY-02327 醋酸酯成为治疗骨质疏松症和其他骨骼相关疾病的潜在候选药物。此外，KY-02327 醋酸酯可能阻断 MC4R（黑皮质素 4 受体）信号传导，从而调节摄食行为和能量消耗，为肥胖和恶病质等代谢紊乱的治疗提供潜在应用。该化合物是 KY-02061 的代谢稳定类似物，这意味着它在保留母体化合物生物活性的同时，具有更高的代谢稳定性、更低的清除率以及可能更优的药代动力学特性。KY-02327 醋酸酯是一种严格意义上的研究用化合物，尚未获得 FDA、EMA 或其他卫生监管机构的批准，不可用于人体。对于研究骨生物学、Wnt 信号通路或代谢紊乱的研究人员而言，KY-02327 醋酸酯是一种有价值的工具化合物，可用于激活 Wnt 通路并探索其对成骨细胞分化、骨形成和能量代谢的影响。
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| 分子式 |
C22H31N3O6
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|---|---|
| 分子量 |
433.5
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| 精确质量 |
433.221
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| CAS号 |
2989396-34-9
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| 相关CAS号 |
KY-02327;2093407-25-9
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| PubChem CID |
162642779
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| 外观&性状 |
Off-white to light brown solid powder
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| tPSA |
121
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
8
|
| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
540
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCOC(=O)C1=CC2=C(N1CC(=O)NCCN3CCCCC3)C=CC(=C2)O.CC(=O)O
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| InChi Key |
YLUUQPHYDMHSNT-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H27N3O4.C2H4O2/c1-2-27-20(26)18-13-15-12-16(24)6-7-17(15)23(18)14-19(25)21-8-11-22-9-4-3-5-10-22;1-2(3)4/h6-7,12-13,24H,2-5,8-11,14H2,1H3,(H,21,25);1H3,(H,3,4)
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| 化学名 |
acetic acid;ethyl 5-hydroxy-1-[2-oxo-2-(2-piperidin-1-ylethylamino)ethyl]indole-2-carboxylate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :≥ 160 mg/mL (~369.09 mM)
DMSO :~140 mg/mL (~322.95 mM ) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.77 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.77 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.77 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3068 mL | 11.5340 mL | 23.0681 mL | |
| 5 mM | 0.4614 mL | 2.3068 mL | 4.6136 mL | |
| 10 mM | 0.2307 mL | 1.1534 mL | 2.3068 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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