| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IC50: 77.79 nM (Speckled 140 kDa, SP140)[1]
Speckled 140 kDa protein (SP140). SP140 is an epigenetic reader protein that binds to specific chromatin regions and regulates gene transcription. GSK761 binds to SP140 with high affinity, inhibiting its ability to interact with regulatory elements of inflammatory genes. This inhibition reduces the transcription of pro-inflammatory cytokines and co-stimulatory molecules. SP140 is highly expressed in CD mucosal macrophages and in vitro-generated inflammatory macrophages. By blocking SP140 function, GSK761 suppresses the inflammatory activation of macrophages and dendritic cells, shifting the immune response towards a regulatory phenotype with increased FOXP3+ regulatory T cells. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在转染了带有Halo标签的SP140的HuT78细胞和HEK293细胞中，GSK761可与SP140结合[1]。在M1极化巨噬细胞中，GSK761（0.01-1.11 µM；1 h）可降低炎症激活并下调促炎细胞因子（如TNF、IL-6、IL-12p70、IL-1β、IL-8和IL-10）的表达[1]。在CD14+黏膜巨噬细胞中，GSK761（0.04 µM；4 h）可显著降低TNF、IL-6和IL-10的表达[1]。
体外实验表明，GSK761（0.01-1.11 uM）可降低人原代巨噬细胞和树突状细胞的炎症活化，下调包括TNF、IL-6、IL-12p70、IL-1β、IL-8和IL-10在内的促炎细胞因子的表达。在转染Halo标签SP140的HEK293细胞中，GSK761可与SP140靶向结合。在树突状细胞-T细胞共培养实验中，GSK761处理的树突状细胞可诱导更高比例的FOXP3+调节性T细胞，同时降低Th1和Th17细胞的极化。在胶质瘤细胞系中，GSK761 处理（0.1-1 uM，持续 48-72 小时）通过下调 TRIM22 表达抑制 PI3K/AKT 信号通路，从而抑制细胞增殖、迁移和侵袭。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
目前尚无GSK761的具体体内活性数据。由于其药代动力学性质较差，限制了全身给药后的生物利用度和组织分布，因此该化合物不适用于在体内动物模型中评估SP140抑制剂的作用。因此，GSK761主要用作体外研究工具。在利用克罗恩病患者结肠巨噬细胞进行的体外研究中，GSK761治疗可减少炎症细胞因子的产生，这证明了SP140作为炎症性肠病治疗靶点的概念验证。
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| 酶活实验 |
对于非细胞结合实验，可采用表面等离子共振 (SPR) 技术来测量 GSK761 与纯化的重组 SP140 蛋白的直接结合。SP140 蛋白通过胺偶联（EDC/NHS 化学）固定在 CM5 传感器芯片上。将浓度递增的 GSK761 溶液（0.1-1000 nM）溶于 HBS-EP+ 缓冲液中，并在 25℃ 下流经固定化的 SP140 蛋白。记录结合（2-3 分钟）和解离（5-10 分钟）阶段，并使用 1:1 Langmuir 结合模型计算解离常数 (KD)。或者，也可以采用荧光偏振 (FP) 竞争性结合实验，使用荧光标记的 SP140 配体来测定 GSK761 对 SP140 的 IC50 值和抑制常数 (Ki)。
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| 细胞实验 |
在细胞靶标结合实验中，将编码 Halo 标签 SP140 蛋白的质粒瞬时转染至 HEK293 细胞。24-48 小时后，将细胞接种于 96 孔板（2-5 × 10⁴ 个细胞/孔），并在 37℃ 下用 GSK761（0.01-1.11 uM）处理 1 小时。随后裂解细胞，并将 Halo 标签 SP140 捕获在 HaloLink 树脂上。通过质谱分析或荧光探针竞争性置换法定量结合的 GSK761。在功能性实验中，将人原代单核细胞在 GM-CSF（30 ng/mL）和 IL-4（20 ng/mL）存在下诱导分化为树突状细胞 5 天，同时加入 GSK761（0.12 uM）或溶剂对照（0.1% DMSO）。处理后，用LPS（100 ng/mL）刺激细胞24小时，并通过ELISA检测培养上清液中的细胞因子（IL-6、TNF、IL-12p70）水平。采用MTT法（0.1-10 uM GSK761处理24-72小时）评估细胞活力。对于T细胞极化实验，将经GSK761处理的树突状细胞与自体CD4+ T细胞在Revaxis抗原存在下进行共培养。5-7天后，通过流式细胞术分析T细胞表型（FOXP3、T-bet、RORγt），并通过ELISA检测细胞因子（IFN-γ、IL-17）水平。
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| 动物实验 |
不适用（体内应用有限）。由于 GSK761 的药代动力学性质较差，目前尚无该化合物的体内动物模型数据。由于其吸收、分布、代谢和排泄 (ADME) 特性不佳，该分子不适用于评估 SP140 抑制剂在炎症或自身免疫性疾病动物模型中的应用。研究人员应注意，GSK761 仅是一种体外研究工具化合物，将其用于体内研究的尝试均未成功，这限制了其在转化研究中的应用。建议使用其他 SP140 抑制剂或基因模型进行体内研究。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
由于GSK761的药代动力学性质较差（文献中已明确描述），目前尚无详细的药代动力学数据。据报道，该化合物不适用于体内SP140抑制活性的评估，因为其生物利用度不足、清除迅速和/或全身给药后组织分布较差。因此，不建议将GSK761用于体内研究。公开文献中未披露详细的药代动力学参数（例如，半衰期、Cmax、AUC、口服生物利用度、分布容积）。该化合物主要用于体外细胞实验，因为在这些实验中，药代动力学的限制并不适用。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚未有关于 GSK761 的具体毒性数据报道。体外实验表明，GSK761 在浓度高达 1.11 μM 时，对人原代细胞的耐受性良好，MTT 或 LDH 释放试验均未观察到明显的细胞毒性。在 10 μM 的浓度下，某些细胞类型可能出现轻微的细胞活力下降，但这些结果尚未得到系统性报道。尚未进行遗传毒性、器官毒性或致癌性研究。GSK761 是一种研究级抑制剂，不适用于人类治疗用途。处理该化合物时，应采取标准的实验室安全防护措施（佩戴手套、实验服和护目镜）。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
SP140（斑点蛋白，140 kDa）是一种表观遗传阅读蛋白，包含溴结构域和PHD指状结构域。它在免疫细胞中高表达，并与包括克罗恩病在内的多种炎症性疾病以及某些癌症的发病机制相关。GSK761是首个报道的小分子SP140抑制剂，是通过药物化学优化研究发现的。尽管GSK761是研究SP140生物学的重要体外工具，但其较差的药代动力学性质限制了其在动物模型中的应用。目前，针对SP140作为治疗靶点的研究仍在继续，重点在于开发具有更优成药性质的SP140抑制剂。GSK761仍然是表观遗传学研究的重要化学探针，仅供研究使用，尚未获准用于临床。
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| 分子式 |
C40H46N4O4
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|---|---|
| 分子量 |
646.82
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~125 mg/mL (~193.25 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.22 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.22 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.5460 mL | 7.7301 mL | 15.4603 mL | |
| 5 mM | 0.3092 mL | 1.5460 mL | 3.0921 mL | |
| 10 mM | 0.1546 mL | 0.7730 mL | 1.5460 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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