| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Rev-erbalpha/REV-ERBalpha (mouse/human reverse erythroblastosis virus alpha). GSK2945 hydrochloride is a highly specific antagonist (inverse agonist) of the nuclear receptor Rev-erbalpha/REV-ERBalpha. Rev-erbalpha is a transcription factor and key component of the circadian clock, regulating the expression of clock genes (e.g., Bmal1) and metabolic genes (e.g., CYP7A1, SREBP1c, FAS). As a repressor, Rev-erbalpha binds to RORE (Rev-erb Response Element) sequences and recruits co-repressors (NCoR, HDAC3) to suppress gene transcription. GSK2945 antagonizes Rev-erbalpha activity by blocking its repressive function, thereby de-repressing target gene expression. By inhibiting Rev-erbalpha, GSK2945 increases the expression of CYP7A1, the rate-limiting enzyme in the bile acid synthesis pathway from cholesterol, leading to enhanced cholesterol metabolism and reduced plasma cholesterol levels. GSK2945 also upregulates LRH-1 (liver receptor homolog-1, NR5A2), another nuclear receptor involved in bile acid synthesis.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
盐酸GSK2945以剂量依赖的方式（EC50 = 2.05 μM）增加Rev-erbα和Bmal1（REV-ERB的靶基因）荧光素酶报告基因的转录活性。[1] 盐酸GSK2945（20 μM；12小时和24小时）处理可提高小鼠和人原代肝细胞中Cyp7a1/CYP7A1的水平。盐酸GSK2945（20 μM）处理还可提高Lrh-1/LRH-1 mRNA和蛋白的水平，Lrh-1/LRH-1是已知的Cyp7a1/CYP7A1肝脏激活剂。[1]
体外实验表明，盐酸GSK2945可增加肝细胞系中CYP7A1和LRH-1的表达。用20 uM盐酸GSK2945处理培养的肝细胞可提高Lrh-1/LRH-1 mRNA和蛋白的水平。该化合物还能提高CYP7A1 mRNA和蛋白的水平，表明其增强了胆汁酸的合成能力。在基于细胞的报告基因检测中，使用Rev-erbα反应性荧光素酶报告质粒，盐酸GSK2945可拮抗Rev-erbα介导的转录抑制，其EC50值分别为21.5 uM（小鼠Rev-erbα）和20.8 uM（人Rev-erbα）。这些EC50值反映了达到最大拮抗（解除抑制）效应50%所需的浓度。该化合物对Rev-erbα/REV-ERBα具有高度特异性，在相关浓度下对其他核受体（例如LXRα、PPARγ、FXR、RORα）的脱靶活性极低。GSK2945盐酸盐可用作研究Rev-erbα在代谢中作用的工具，尤其是在肝脏脂质和胆固醇稳态中的作用。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
盐酸 GSK2945（0-10 mg/kg；腹腔注射；每天两次，持续 7 天；雄性 C57BL/6 小鼠）治疗降低了大鼠的野生型血浆胆固醇，并提高了小鼠肝脏胆固醇 7α-羟化酶 (Cyp7a1) 水平 [1]。
在体内，盐酸GSK2945（0-10 mg/kg；腹腔注射；每日两次，连续7天；雄性C57BL/6小鼠）可降低野生型小鼠的血浆胆固醇水平。与溶剂对照组相比，该化合物（3-10 mg/kg）可显著降低总血浆胆固醇水平。其降胆固醇作用是通过诱导CYP7A1（胆固醇转化为胆汁酸的限速酶）介导的。盐酸GSK2945可提高小鼠肝脏胆固醇7α-羟化酶（Cyp7a1）的水平，并增加肝微粒体中Cyp7a1的酶活性。该化合物还可上调肝脏Lrh-1的表达。在高胆固醇血症小鼠模型（例如，高脂饮食喂养的小鼠或ApoE-/-小鼠）中，盐酸GSK2945治疗可进一步降低血浆胆固醇和甘油三酯水平。该化合物在剂量高达 10 mg/kg 时通常耐受性良好，未观察到明显的体重减轻或肝毒性（基于 ALT/AST 水平）。GSK2945 盐酸盐在大鼠模型中也具有活性，可降低血浆胆固醇。这些数据支持 Rev-erbalpha 拮抗剂作为治疗血脂异常和代谢综合征的潜在策略。 |
| 酶活实验 |
对于非细胞受体结合分析，可采用表面等离子共振 (SPR) 或基于荧光偏振 (FP) 的竞争性结合分析。SPR 分析方法如下：将重组人 REV-ERBα 配体结合域 (LBD) 蛋白通过胺偶联（EDC/NHS 化学）固定在 CM5 传感器芯片上。在 25℃ 下，将不同浓度的 GSK2945 盐酸盐 (0.1-1000 uM) 溶液（溶于运行缓冲液 HBS-EP+，10 mM HEPES pH 7.4，150 mM NaCl，3 mM EDTA，0.05% P20）流过固定化的受体。记录结合阶段（2-3 分钟）和解离阶段（5-10 分钟）。使用 1:1 Langmuir 结合模型计算解离常数 (KD)。对于荧光偏振 (FP) 竞争性结合实验：将荧光标记的 Rev-erbα 配体（例如示踪剂）与 REV-ERBα-LBD 蛋白在黑色 384 孔板中于结合缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 8.0、150 mM NaCl、1 mM DTT、0.01% NP-40）中孵育。加入浓度递增的 GSK2945 盐酸盐（0.1-1000 uM），平衡后（室温下 60-120 分钟），测量荧光偏振（激发波长 485 nm，发射波长 520 nm）。测定 IC50 值，并计算 Ki 值。对于放射性配体结合实验：使用 3H 或 125I 标记的 Rev-erbα 激动剂作为示踪剂。将 REV-ERBalpha 蛋白固定在闪烁邻近分析 (SPA) 微珠上，并测量其与未标记的 GSK2945 盐酸盐的竞争。
|
| 细胞实验 |
RT-PCR[1]
细胞类型：小鼠（雄性，CD1）和人（男性，高加索人）原代肝细胞 测试浓度：20 μM 孵育时间：12 小时和 24 小时 实验结果：导致 Cyp7a1 的 mRNA 和蛋白（24 小时）表达显著增加。人原代肝细胞中 CYP7A1 的 mRNA 和蛋白（24 小时）水平升高。Lrh-1/LRH-1 表达上调。 对于基于细胞的检测，使用HepG2人肝癌细胞或原代小鼠肝细胞。将细胞以2-4 × 10⁵个细胞/孔的密度接种于12孔或24孔板中，培养基为含10%胎牛血清（FBS）、100 U/mL青霉素和100 ug/mL链霉素的DMEM培养基，并在37℃、5% CO2条件下培养24-48小时。对于CYP7A1和LRH-1表达的研究，将细胞在无血清培养基中用GSK2945盐酸盐（0.1-100 uM）处理24-48小时。 qPCR 分析：使用 TRIzol 试剂提取总 RNA，使用逆转录酶试剂盒将其逆转录为 cDNA，然后使用 SYBR Green 或 TaqMan 探针（CYP7A1、LRH-1、β-actin 或 GAPDH 作为内参）进行 qPCR。蛋白质分析：使用含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的 RIPA 缓冲液裂解细胞。将裂解液（20-50 ug 蛋白）进行 SDS-PAGE 电泳分离，然后转移至 PVDF 膜，并用抗 CYP7A1、抗 LRH-1 或抗 β-actin 抗体进行免疫印迹。通过化学发光法检测条带，并通过密度扫描法进行定量。对于 Rev-erbalpha 报告基因检测：将 HEK293T 细胞与 Rev-erbalpha 表达质粒、(RORE)-荧光素酶报告质粒（含 RORE 元件）和 Renilla 荧光素酶对照质粒共转染。转染 24 小时后，用 GSK2945 盐酸盐（0.1-1000 uM）处理细胞 24-48 小时。使用双荧光素酶报告基因检测试剂盒（Promega）测定荧光素酶活性。预期 GSK2945 会以浓度依赖的方式增加荧光素酶信号（解除抑制）。EC50 值由剂量反应曲线计算得出。每种条件均应在三个复孔中进行测试，并至少进行三次独立实验。在细胞活力检测中，将细胞用 GSK2945 盐酸盐（1-1000 uM）处理 48-72 小时，并使用 MTT 或 CellTiter-Glo 试剂盒评估细胞毒性。GSK2945 在浓度高达 100 uM 时通常无毒性。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄）[1]
剂量：0 mg/kg或10 mg/kg 给药途径：腹腔注射（ip）；每日两次；持续7天 实验结果：野生型小鼠肝脏胆固醇7α-羟化酶（Cyp7a1）水平升高，血浆胆固醇降低。 体内研究采用雄性C57BL/6J小鼠（8-10周龄，20-25 g）。GSK2945盐酸盐配制于合适的溶剂中（例如，10% DMSO、40% PEG400、5% Tween 80的生理盐水；或10% DMSO、90%玉米油）。该化合物以1、3、6和10 mg/kg的剂量（体积5-10 mL/kg）腹腔注射（ip），每日两次（每12小时一次），连续7天。溶剂对照组注射相同体积的溶剂。对于高胆固醇血症研究，可在治疗前和治疗期间，给小鼠喂食含60%能量来自脂肪的高脂饮食（HFD）4-8周，或使用喂食普通饲料的ApoE-/-小鼠。每日测量小鼠体重。在第7天，末次给药后12小时，小鼠禁食4-6小时，然后用异氟烷麻醉。通过心脏穿刺采集血液至EDTA抗凝管中。将血浆通过离心（2000 × g，10分钟，4℃）分离，并储存于-80℃用于脂质分析。使用酶法比色试剂盒（例如，Wako、Stanbio）测定总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）。取出肝脏，称重后立即置于液氮中速冻。用于CYP7A1活性测定的肝微粒体，通过差速离心法制备。将微粒体蛋白（100 μg）与[14C]-胆固醇或比色底物孵育，并通过高效液相色谱法（HPLC）、薄层色谱法（TLC）或比色板读数仪测定7α-羟基胆固醇（用于CYP7A1）的生成量。对于基因表达分析，将肝组织匀浆，提取RNA和蛋白质用于qPCR（Cyp7a1、Lrh-1、Srebp1c、Fas、Bmal1）和Western blot分析。通常在3-10 mg/kg剂量下观察到降低血浆胆固醇的效果，10 mg/kg剂量时效果最佳。该化合物耐受性良好，未观察到行为、体重或器官病理方面的显著变化。对于长期研究（14-28天），建议监测肝功能（ALT、AST）和肾功能（肌酐、BUN）。所有动物实验程序必须经机构动物护理和使用委员会（IACUC）批准。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
文献中尚无关于盐酸GSK2945的详细药代动力学(PK)数据。作为一种Rev-erbalpha的小分子拮抗剂，GSK2945预计具有中等的口服生物利用度，并经肝酶代谢。在啮齿动物研究中，该化合物通常以1-10 mg/kg的剂量腹腔注射给药，每日两次给药，持续7天后即可观察到疗效。虽然未报道血浆半衰期(t1/2)，但需要每日两次给药提示其在小鼠体内的半衰期可能相对较短（2-6小时）。该化合物可能经肝脏代谢，可能通过细胞色素P450酶（CYP3A4、CYP2C9）进行代谢。盐酸GSK2945可溶于DMSO，并可配制成水性注射剂。对于药代动力学 (PK) 研究，标准方案包括向雄性 C57BL/6 小鼠（每个时间点 n=3-5）腹腔或静脉注射 GSK2945（1-10 mg/kg）。分别于给药后 0、0.25、0.5、1、2、4、8、12 和 24 小时经尾静脉采集血样（50-100 μL）。分离血浆，并使用内标（例如氘代 GSK2945）通过液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 定量 GSK2945 的浓度。采用非房室模型分析计算 PK 参数（Cmax、Tmax、AUC、t1/2、CL、Vd、生物利用度）。与游离碱相比，盐酸盐 (HCl) 可提高水溶性，从而改善生物利用度。GSK2945 尚未获批上市。研究化合物通常不会公布详细的药代动力学数据。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无来自标准化毒理学研究的关于盐酸GSK2945的具体毒性数据。已发表的体内研究表明，小鼠腹腔注射盐酸GSK2945，剂量高达10 mg/kg，每日两次，连续7天，通常耐受性良好，未见死亡、显著体重下降或不良行为改变的报道。组织学检查未发现特定器官毒性（肝脏、肾脏、脾脏）。然而，尚未进行长期毒性研究（≥28天）。该化合物作为Rev-erbα拮抗剂的作用机制预计不会引起急性毒性，但理论上，其对生物钟和代谢途径的慢性干扰可能导致代谢紊乱，尽管目前尚无关于GSK2945的此类报道。尚未进行遗传毒性、致癌性或生殖毒性研究。盐酸GSK2945是一种研究用化学品，不适用于人体。应采取标准的实验室安全防护措施（手套、实验服、护目镜）。该盐酸盐不具有除母体化合物之外的额外毒性。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
REV-ERBα（也称为NR1D1）是一种核受体和转录因子，是生物钟的关键抑制因子。它是血红素的受体，血红素作为配体发挥作用，参与调节时钟基因（例如Bmal1）以及控制脂质和胆汁酸代谢、脂肪生成和炎症的代谢基因的表达。Rev-erbα是多种代谢性疾病的治疗靶点，包括血脂异常、动脉粥样硬化、2型糖尿病、肥胖和非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）。葛兰素史克公司开发的GSK2945是一种叔胺类Rev-erbα拮抗剂（有时也称为反向激动剂）。需要注意的是，文献中存在一些混淆：一些文献将GSK2945描述为Rev-erbα激动剂，而另一些文献则将其描述为拮抗剂/反向激动剂。 GSK2945 盐酸盐是一种化学探针，用于研究 Rev-erbalpha 在昼夜节律和代谢中的功能。盐酸盐用于提高其溶解度和稳定性。截至 2026 年，尚无 Rev-erbalpha 拮抗剂获准用于临床，但有几种拮抗剂正处于临床前开发阶段。GSK2945 盐酸盐仅供研究使用，尚未获准用于人体治疗。
|
| 分子式 |
C20H19CL3N2O2S
|
|---|---|
| 分子量 |
457.80
|
| 相关CAS号 |
GSK2945;1438071-12-5
|
| 外观&性状 |
Light brown to brown solid powder
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~20.83 mg/mL (~45.50 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.08 mg/mL (4.54 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1844 mL | 10.9218 mL | 21.8436 mL | |
| 5 mM | 0.4369 mL | 2.1844 mL | 4.3687 mL | |
| 10 mM | 0.2184 mL | 1.0922 mL | 2.1844 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
