| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Connexin 43 (Cx43) hemichannels and gap junctions. Gap 26 is a connexin mimetic peptide that targets the first extracellular loop (E1 domain) of the gap junction protein connexin 43. By binding to this region, Gap 26 inhibits the opening of Cx43 hemichannels and prevents the formation of functional gap junctions, thereby blocking direct intercellular communication. Gap 26 does not affect the expression level or trafficking of connexin 43 to the plasma membrane; rather, it acts as a selective blocker of channel activity. The peptide contains the SHVR amino acid motif, which is essential for its binding and inhibitory action. Inhibition of Cx43 gap junctions disrupts electrical coupling, metabolic coupling, and signaling molecule exchange (including small molecules such as Ca2+, IP3, cAMP, ATP, and glucose) between adjacent cells, allowing researchers to dissect the functional roles of GJIC.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在三种细胞系（SV-ARBEC、ECV304 和 RBE4）中，gap 26（0.25 mg/mL，30 分钟）降低了波形幅度。Gap 26（0.25 mg/mL，30 分钟）完全消除了 InsP3 触发的 ATP 反应，并将 ATP 释放降低至低于对照水平，表明基础 ATP 释放也受到影响[1]。尽管所用细胞系中存在连接蛋白 43，但 FRAP 实验表明，gap 26 并不影响通过连接通道的染料偶联[1]。然而，gap 26 确实显著降低了我们观察到的 InsP3 触发的细胞间钙波。兔肠系膜上动脉的节律性反应呈剂量依赖性地被 gap 26（100-300 μM）降低，IC50 为 28.4 ± 3.4 μM[2]。
Gap 26 TFA 是一种连接蛋白模拟肽，可阻断由连接蛋白 43 组成的间隙连接和半通道。在体外，Gap 26 可抑制间隙连接偶联实验中相邻细胞间的染料转移。在刮擦加载/染料转移实验中，将细胞（例如，NRK-49F 细胞、表达 Cx43 的 HeLa 细胞、心肌细胞或星形胶质细胞）培养至汇合，用手术刀片划出一条划痕，然后将细胞与加载到供体细胞中的荧光间隙连接通透性染料（例如，Lucifer Yellow CH (457 Da) 或 Calcein AM (623 Da)）孵育。在实验开始前或实验过程中，向培养基中加入 Gap 26 (100-500 uM)。孵育后，通过荧光显微镜定量分析划痕附近与染料偶联的细胞数量。 Gap 26 显著减少了染料偶联细胞的数量，证实了其对间隙连接细胞间通讯 (GJIC) 的抑制作用。在 ATP 释放实验中，Gap 26 还阻断了通过 Cx43 半通道的 ATP 释放，其中用 ATP 生物发光试剂荧光素/荧光素酶标记的细胞经处理后发光强度降低。此外，Gap 26 还抑制了通过间隙连接在细胞间传播的钙波。TFA 盐不影响肽的活性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
Gap 26 TFA 已在多种动物模型中进行体内研究，以探究 Cx43 间隙连接在生理和疾病中的作用。在脊髓损伤模型中，鞘内注射 Gap 26（10-100 uM，5-10 uL）可减轻继发性损伤、炎症和胶质瘢痕形成，并改善功能恢复。在心肌缺血/再灌注损伤模型中，全身性静脉注射 Gap 26（0.5-5 mg/kg）可通过阻止再灌注期间凋亡信号通过间隙连接传播，从而缩小梗死面积并保护心脏功能。在癫痫模型中，脑室内注射 Gap 26 可减轻癫痫发作的严重程度和扩散，表明间隙连接通讯有助于癫痫发作的扩散。在癌症模型中，瘤内注射 Gap 26 与化疗或免疫疗法联合使用，可通过阻止药物从敏感细胞转移到耐药细胞，从而增强对肿瘤细胞的杀伤作用。在这些模型中，肽的疗效取决于给药途径和组织特异性 Cx43 表达。
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| 酶活实验 |
对于 Gap 26 与 Cx43 的直接结合分析，可采用表面等离子共振 (SPR) 或 ELISA 结合分析法。将对应于 Cx43 第一个胞外环 (E1)（氨基酸残基 46-75）的合成肽固定在传感器芯片或 96 孔板上。将不同浓度的 Gap 26 (0.1-100 uM) 溶液流过固定化的肽段。或者，也可使用生物素标记的 Gap 26 进行下拉分析：将生物素标记的 Gap 26 (10-50 uM) 与表达 Cx43 的细胞（例如心肌细胞、HeLa-Cx43）的细胞膜在 4℃ 下孵育 1-2 小时。加入链霉亲和素-琼脂糖珠以捕获生物素标记的肽段和任何结合的 Cx43。结合的蛋白质经洗脱后，通过SDS-PAGE分离，并用抗Cx43抗体进行免疫印迹分析。然而，由于Gap 26被认为是通过与完整Cx43半通道的胞外环相互作用而非与溶液中的线性肽结合来阻断通道，因此传统的酶/受体结合实验意义不大。Gap 26的活性评估是通过功能性方法（染料转移、ATP释放、Ca2+波传播、电耦合）而非直接结合来进行的。
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| 细胞实验 |
对于典型的间隙连接抑制实验，将表达 Cx43 的细胞（例如，原代大鼠心肌细胞、稳定转染 Cx43 的 HeLa 细胞、NRK-49F 大鼠肾上皮细胞或 U251 胶质瘤细胞）接种于 35 mm 玻璃底培养皿或带有盖玻片的 24 孔板中，培养至细胞汇合（约 24-48 小时）。Gap 26 TFA 用无菌水或 PBS 配制成 5-10 mM 的储备液，并储存于 -20℃。对于染料转移实验：将细胞在含有 100-500 uM Gap 26 的培养基中于 37℃ 预孵育 30-60 分钟。对于刮擦加载/染料转移实验，使用无菌手术刀片或 26 号针头在细胞单层上划痕。将细胞轻轻洗涤后，在室温下用间隙连接通透性染料（例如，Lucifer Yellow CH，0.1-0.5 mg/mL，溶于PBS）孵育1-5分钟。用PBS洗涤细胞3次，用4%多聚甲醛固定10分钟，然后用荧光显微镜观察（Lucifer Yellow的激发/发射波长：430 nm/540 nm）。每个条件下至少计数5-10个显微镜视野中染料标记的细胞（划痕边缘以外的荧光细胞）的数量。对于ATP释放测定：将细胞与Gap 26（100-500 uM）预孵育30分钟，然后用10 uM离子霉素处理或进行机械刺激以触发ATP释放。收集上清液，并使用荧光素-荧光素酶生物发光检测法（例如Promega ENLITEN ATP生物发光检测试剂盒）测定ATP浓度。在发光仪中测量发光强度，并将ATP水平标准化至对照组。所有处理均应在三个复孔中进行，且至少进行三次独立实验。
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| 动物实验 |
体内研究采用成年雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g）或C57BL/6J小鼠（20-30 g）。Gap 26 TFA用无菌PBS或人工脑脊液（用于中枢神经系统研究）复溶。大鼠鞘内给药：在异氟烷麻醉下，将连接50 μL Hamilton注射器的30号针头插入L4和L5椎体之间的蛛网膜下腔，缓慢注射Gap 26（10-100 μM，体积5-10 μL），注射时间为1分钟。小鼠脑室内（icv）注射：使用立体定位仪，将26号针头插入侧脑室（坐标：前囟后方-0.5 mm，左右侧+1.0 mm，腹侧-2.5 mm），并在2-5分钟内注射Gap 26（0.5-5 nmol，溶于2-5 μL溶液中）。心脏缺血/再灌注研究：大鼠麻醉后，结扎左前降支冠状动脉，造成30-45分钟的缺血，随后进行2-24小时的再灌注。在再灌注前5分钟，经股静脉或尾静脉静脉注射Gap 26（0.5-5 mg/kg）。在实验终点，取出心脏，用伊文思蓝和TTC（氯化三苯基四氮唑）染色，并通过面积测量法测量梗死面积（占危险面积的百分比）。对于脊髓损伤研究：椎板切除术后，使用重物坠落装置诱导中度挫伤。损伤后立即和/或24小时后，鞘内注射Gap 26（10-100 μM，5 μL）。损伤后21-28天，使用Basso、Beattie、Bresnahan (BBB) 开放场运动评分量表评估运动功能恢复情况。处死动物时，收集脊髓组织进行组织学分析（病灶大小、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP) 染色以检测胶质瘢痕）。在所有研究中，对照组动物接受载体（PBS）或乱序的Gap 26肽。在所描述的剂量下，Gap 26 的耐受性良好，大多数研究中未观察到明显的行为或生理异常。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
目前尚无Gap 26 TFA的具体药代动力学数据。Gap 26是一种由13个氨基酸组成的肽（分子量约为1.4 kDa），全身给药后很可能迅速从循环中清除，并在体内被蛋白酶降解。静脉注射后，由于肾小球滤过快速清除以及组织和血浆肽酶（例如氨肽酶、羧肽酶和内肽酶）的蛋白水解作用，这种短肽的血浆半衰期预计仅为几分钟（5-15分钟）。对于中枢神经系统应用，通常采用鞘内注射（it）或脑室内注射（icv）以达到足以阻断间隙连接的局部浓度。在脑脊液中，由于蛋白酶活性低于血浆，该肽的半衰期可能更长（30-60分钟）。TFA反离子不影响其药代动力学特征。 Gap 26 不适用于治疗用途，也不常进行正式的药代动力学研究。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无关于 Gap 26 TFA 的具体毒性数据。体外实验表明，Gap 26（浓度高达 500 μM）在培养细胞中暴露 24-48 小时后，未观察到明显的细胞毒性（例如，MTT 或 LDH 释放试验）。体内实验中，在多种动物模型（脊髓损伤、心肌缺血、癫痫）中，鞘内、脑室内或静脉注射 Gap 26，剂量为 0.5-5 mg/kg 或局部浓度 10-100 μM，通常耐受性良好，未见死亡、严重不良反应或器官毒性的报道。由于其作用机制特异性，且在用于间隙连接阻断的浓度下无脱靶效应，因此该肽被认为毒性较低。目前尚未报道其具有遗传毒性、致癌性或生殖毒性。TFA 盐含量较低，被认为无毒。第 26 部分仅供研究使用。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
间隙连接是连接相邻细胞胞质的特殊细胞间通道，允许离子（例如K⁺、Ca²⁺）和小分子（例如cAMP、IP₃、ATP、葡萄糖、氨基酸）通过，分子量可达~1 kDa，从而实现电信号和代谢的耦合。连接蛋白43 (Cx43) 是表达最广泛、研究最深入的连接蛋白亚型，存在于多种细胞类型中。Gap 26（序列VCYDKSFPISHVR，Cx43胞外环1的第63-75位氨基酸残基）是一种合成肽，可选择性地阻断Cx43间隙连接通道和半通道。它是连接蛋白特异性模拟肽家族的成员之一，该家族还包括Gap 27（靶向Cx43 E2环）、Gap 19（靶向Cx43胞内环）以及Cx32、Cx36和Cx40特异性肽。三氟乙酸盐用于提高肽的溶解度和稳定性。Gap 26 已被广泛用作研究工具，用于研究缝隙连接通讯在心脏电生理、神经生物学和癌症中的作用。截至 2026 年，尚无缝隙连接阻滞剂获准用于临床，但临床前研究表明其在心律失常、中风、创伤性脑损伤和癌症方面具有潜在的治疗应用价值。Gap 26 并非获批药物，而是一种仅供实验室使用的研究级生化试剂。
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| 分子式 |
C72H108F3N19O21S
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|---|---|
| 分子量 |
1664.80
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| 相关CAS号 |
Gap 26;197250-15-0
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~60.07 mM)
H2O :~50 mg/mL (~30.03 mM) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (1.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (1.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (1.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 100 mg/mL (60.07 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.6007 mL | 3.0034 mL | 6.0067 mL | |
| 5 mM | 0.1201 mL | 0.6007 mL | 1.2013 mL | |
| 10 mM | 0.0601 mL | 0.3003 mL | 0.6007 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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