| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Fluorescent Dye
This compound targets and stains the enzymatic activity of tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP), a key marker for osteoclasts, and alkaline phosphatase (ALP), a marker for osteoblasts. As a staining dye, it forms colored insoluble precipitates at sites of enzyme activity, enabling visual detection. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
原位骨破骨细胞计数[1]
脱矿骨切片中破骨细胞的定量基于先前描述的方法。将固定、脱矿并石蜡包埋的胫骨切片，并用含 50mM 酒石酸钠的 0.1 M 乙酸钠缓冲液（pH 5.0）中的 0.1 mg/ml 萘酚 AS-MX 磷酸盐和 0.6 mg/ml 快红紫 LB 盐进行抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP) 染色。破骨细胞被鉴定为小梁骨表面的 TRAP 阳性细胞。使用彩色显微成像系统和 ImageJ 软件（1.35s，NIH）对近端胫骨小梁切片上的破骨细胞数量进行计数，并测量破骨细胞占据的骨表面比例。 破骨细胞潜能[1] 将骨髓细胞（1.0 × 10⁵ 个细胞/0.5 ml/孔，48 孔板）在含 10% FBS、100 U/ml 青霉素和 100 μg/ml 链霉素的 α-MEM 培养基中培养 6 天。每 3 天更换一次培养基，加入 rmM-CSF（20 ng/ml）和 rhsRANKL（60 ng/ml），并在 37°C、5% CO₂ 的湿润环境中培养。在第6天，将细胞用10%甲醛固定，并用0.1 mg/ml萘酚AS-MX磷酸盐和0.6 mg/ml快红紫LB盐在0.1 M pH 5.0的醋酸钠缓冲液（含50mM酒石酸钠）中进行TRAP染色。使用相差显微镜计数具有三个或更多细胞核的TRAP阳性细胞。 作为一种染色剂，Fast Red Violet LB 通常不进行独立的体外活性研究。它作为磷酸酶的显色底物；当被 TRAP 或 ALP 裂解时，会产生红紫色沉淀，该沉淀会定位到表达这些酶的细胞，从而可以在光学显微镜下观察。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
该染料用于对组织切片和细胞培养物中的TRAP和ALP活性进行染色。它广泛应用于骨生物学研究，用于识别破骨细胞（TRAP阳性）和成骨细胞（ALP阳性），从而能够在骨重塑研究中量化骨吸收和骨形成活性。
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| 酶活实验 |
ALP染色：将细胞用4%多聚甲醛于4℃固定10分钟。配制工作液：0.1%萘酚AS-MX磷酸盐和0.1%快红紫LB氯化锌溶于56 mM 2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇缓冲液中。将固定好的细胞置于该工作液中，室温避光孵育10-15分钟。用PBS缓冲液洗涤后，在光学显微镜下观察。TRAP染色：在缓冲液中加入50 mM酒石酸钠以抑制其他磷酸酶。
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| 细胞实验 |
细胞活力和分化检测[2]
使用NucleoCounter（一种用于哺乳动物细胞计数的仪器，其配备低倍率荧光显微镜）检测冷冻保存细胞的活力。在用裂解缓冲液处理前后，使用NucleoCounter分析细胞样本，从而估算出死细胞和总细胞数。 为监测成骨细胞分化，将冷冻保存的细胞在含15% FBS的α-MEM培养基中解冻。然后，将细胞以1 × 10⁴ 个细胞/cm²的密度接种于十二孔培养板中，并在添加了10 mM β-甘油磷酸二钠、0.07 mM L-抗坏血酸磷酸镁正水合物和0.1 mM地塞米松的培养基中培养两周。不添加地塞米松的培养物用作阴性对照。通过测定钙含量和碱性磷酸酶（ALP）活性染色，对分化的成骨细胞进行生化分析。钙沉积（体外骨形成）的评估方法如我们之前报道的那样。简而言之，在培养期间向培养基中加入1 µg/mL钙黄绿素，并使用荧光显微镜观察细胞外区域钙黄绿素的荧光。观察前，移除含钙黄绿素的培养基，并用PBS缓冲液洗涤。对于碱性磷酸酶（ALP）活性染色，用PBS缓冲液洗涤细胞，并在4%多聚甲醛中于4℃固定10分钟。然后将固定后的细胞浸泡在含有0.1%萘酚AS-MX磷酸盐和0.1%快红紫LB盐的56 mM 2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇溶液中，于室温下孵育10分钟。用PBS缓冲液洗涤后，通过显微镜观察ALP活性细胞[2]。 在合适的诱导分化培养基中培养破骨细胞或成骨细胞系或原代骨髓来源细胞。诱导分化后，移除培养基，将细胞用4%多聚甲醛于4℃固定10分钟。用PBS洗涤。用Fast Red Violet LB染色液（按所述方法制备）于室温孵育10-30分钟。用PBS彻底洗涤并风干。在明场显微镜下观察红紫色染色，并定量阳性细胞数量或染色强度。 |
| 动物实验 |
动物模型不适用于直接染色方案。然而，对于原位染色，可从小鼠或大鼠（例如股骨或胫骨）获取骨组织，用4%多聚甲醛固定24-48小时，用EDTA或甲酸溶液脱钙7-14天，然后包埋于石蜡或OCT中。切取5-10微米厚的切片，脱蜡并复水，然后按照上述方法用Fast Red Violet LB染色液孵育，以观察破骨细胞和成骨细胞的活性。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
Fast Red Violet LB 用于离体或体外组织染色，尚未研究其全身药代动力学特性。作为组织化学染料时，它会局限于组织切片或培养细胞内，形成不溶于水的沉淀，且扩散性极低。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
按照标准实验室操作规程使用时，快速红紫LB作为组织化学试剂毒性较低。应避免吸入、摄入或皮肤接触。操作该化合物时应佩戴适当的个人防护装备（手套、实验服、护目镜）。染色液的处置应遵循机构危险废物处理指南。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
快速红紫LB通常与萘酚AS-MX磷酸盐联用，作为磷酸酶检测的底物。生成的红紫偶氮染料沉淀稳定，在光学显微镜下不易褪色。它是标准TRAP染色试剂盒的组成部分，广泛用于骨组织形态计量学中破骨细胞的鉴定。其他名称包括快速红紫LB盐。
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| 分子式 |
C14H11CLN3O.1/2ZNCL2
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| 分子量 |
340.86
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| 相关CAS号 |
Fast Red Violet LB;32348-81-5
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| 外观&性状 |
Off-white to yellow solid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~62.5 mg/mL (~183.36 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9338 mL | 14.6688 mL | 29.3376 mL | |
| 5 mM | 0.5868 mL | 2.9338 mL | 5.8675 mL | |
| 10 mM | 0.2934 mL | 1.4669 mL | 2.9338 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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