| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Fluorescent Dye
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| 体内研究 (In Vivo) |
原位破骨细胞数量[1]
脱矿骨切片中破骨细胞的定量是基于先前描述的程序。将固定的、软化的和石蜡包埋的胫骨切片,并在含有50mM酒石酸钠的0.1M乙酸钠缓冲液中用0.1mg/ml萘酚AS-MX磷酸盐和0.6mg/mlFast Red Violet LB盐进行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色。骨小梁表面的破骨细胞被鉴定为TRAP阳性细胞。使用彩色相机显微镜成像系统和ImageJ(1.35s,NIH)软件对切片上的破骨细胞数量进行计数,并测量胫骨近端小梁中破骨细胞占据的骨表面分数。 破骨细胞潜能[1] 骨髓细胞在含有10%FBS、100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素的α-MEM中培养6天(1.0×105个细胞/0.5ml/孔,在48孔板中)。培养物每3天加入含有rmM-CSF(20 ng/ml)、rhsRANKL(60 ng/ml)的培养基,并在5%CO2的湿润气氛中保持在37°C。在第6天,将细胞固定在10%福尔马林中,并用0.1 mg/ml萘酚AS-MX磷酸盐和0.6 mg/mlFast Red Violet LB盐在0.1 M乙酸钠缓冲液(pH 5.0,含50 M酒石酸钠)中对TRAP进行染色。使用相差显微镜计数具有三个或更多细胞核的TRAP阳性细胞。 |
| 细胞实验 |
细胞活力和分化测定[2]
使用NucleoCounter测定冷冻保存的细胞的活力,NucleoCcounter是一种用于计数哺乳动物细胞的仪器,其使用适于相对低的光学放大率的荧光显微镜。在用裂解缓冲液处理之前和之后,在NucleoCounter上分析细胞样品,给出不活细胞和总细胞的估计。 为了监测成骨细胞分化,将冷冻保存的细胞在含有15%FBS的α-MEM中解冻。然后将其接种并以1 × 104个细胞/cm2,在补充有10 mMβ-甘油磷酸二钠盐,0.07 mM L-抗坏血酸磷酸镁盐正水合物和0.1 mM地塞米松两周。使用不含地塞米松的培养物作为阴性对照。通过测定钙和ALP活性染色对分化的成骨细胞进行生化分析。钙沉积(体外骨形成)通过我们之前报道的方法进行评估)。简而言之,1 在培养期间,将µg/mL钙黄绿素加入培养基中,并通过荧光显微镜观察细胞胞外区域中掺入的钙黄绿元的荧光。在观察之前,除去含有钙黄绿素的培养基并用PBS洗涤。对于碱性磷酸酶(ALP)活性染色,用PBS洗涤细胞,并在4%多聚甲醛中固定10 最低温度为4°C。然后将固定的细胞浸泡在0.1%萘酚AS-MX磷酸盐和0.1%Fast Red Violet LB盐中56 mM 2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇用于10 在室温下最小。在用PBS洗涤步骤之后,通过显微镜观察活性ALP细胞[2]。 |
| 参考文献 |
| 分子式 |
C14H11CLN3O.1/2ZNCL2
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|---|---|
| 分子量 |
340.86
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| 相关CAS号 |
Fast Red Violet LB;32348-81-5
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| 外观&性状 |
Off-white to yellow solid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~62.5 mg/mL (~183.36 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9338 mL | 14.6688 mL | 29.3376 mL | |
| 5 mM | 0.5868 mL | 2.9338 mL | 5.8675 mL | |
| 10 mM | 0.2934 mL | 1.4669 mL | 2.9338 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。