Fast Red Violet LB

别名: 固红紫LB盐;固红紫色;固红紫色 LB;固红紫色LB盐;固红紫LB;耐晒红紫 LB 盐
目录号: V44747 纯度: ≥95%
Fast Red Violet LB 是一种可用于 TRAP(抗酒石酸酸性磷酸酶)染色的染料。
Fast Red Violet LB CAS号: 32348-81-5
产品类别: New11
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
5mg
10mg
25mg
50mg
100mg
250mg
500mg
1g
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纯度/质量控制文件

纯度: ≥98%

纯度: ≥98%

产品描述
快红紫LB是一种可用于TRAP(抗酒石酸酸性磷酸酶)染色的染料。它也可用于碱性磷酸酶(ALP)活性的染色和测定。
快红紫LB是一种重氮盐,广泛用作组织学、细胞学和免疫组织化学中的显色偶联剂。它用于TRAP染色以及碱性磷酸酶(ALP)活性的染色和测定。该化合物也被称为TRAP和ALP的染色染料。其分子式为C₁₄H₁₁Cl₂N₃O,分子量为340.86。
生物活性&实验参考方法
靶点
Fluorescent Dye
Fast Red Violet LB does not have a specific biological target. It functions as a chromogenic substrate in enzyme histochemistry. When reacted with enzymes such as TRAP or ALP, it produces a colored precipitate at the site of enzyme activity. This allows for the visualization of enzyme activity in tissue sections or cell preparations. It is a widely used reagent in diagnostic and research laboratories.
体外研究 (In Vitro)
原位骨破骨细胞计数[1]
脱矿骨切片中破骨细胞的定量基于先前描述的方法。将固定、脱矿并石蜡包埋的胫骨切片,并用含 50mM 酒石酸钠的 0.1 M 乙酸钠缓冲液(pH 5.0)中的 0.1 mg/ml 萘酚 AS-MX 磷酸盐和 0.6 mg/ml 快红紫 LB 盐进行抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP) 染色。破骨细胞被鉴定为小梁骨表面的 TRAP 阳性细胞。使用彩色显微成像系统和 ImageJ 软件(1.35s,NIH)对近端胫骨小梁切片上的破骨细胞数量进行计数,并测量破骨细胞占据的骨表面比例。
破骨细胞潜能[1]
将骨髓细胞(1.0 × 10⁵ 个细胞/0.5 ml/孔,48 孔板)在含 10% FBS、100 U/ml 青霉素和 100 μg/ml 链霉素的 α-MEM 培养基中培养 6 天。每 3 天更换一次培养基,加入 rmM-CSF(20 ng/ml)和 rhsRANKL(60 ng/ml),并在 37°C、5% CO₂ 的湿润环境中培养。在第6天,细胞用10%甲醛固定,并用0.1 mg/ml萘酚AS-MX磷酸盐和0.6 mg/ml快红紫LB盐在0.1 M醋酸钠缓冲液(pH 5.0,含50 mM酒石酸钠)中进行TRAP染色。使用相差显微镜计数具有三个或更多细胞核的TRAP阳性细胞。
在体外,快红紫LB盐可用作TRAP和ALP活性的染色试剂。当与含有这些酶的组织或细胞孵育时,它会产生有色反应产物。现有文献中未提供比活性数据,例如动力学参数。
体内研究 (In Vivo)
Fast Red Violet LB 通常不用于体内应用,因为它主要用于体外组织切片和细胞染色。它不用于活体动物的治疗或诊断。
酶活实验
无细胞快速红紫LB检测方法包括测量其与TRAP或ALP的比色反应。在这种检测方法中,将底物与酶一起孵育,并通过分光光度法测量有色产物的生成量。这是生化检测中检测酶活性的标准方法。现有文献中未详细说明具体的检测条件。
细胞实验
细胞活力和分化检测[2]
使用NucleoCounter(一种用于哺乳动物细胞计数的仪器,其配备低倍率荧光显微镜)检测冷冻保存细胞的活力。在用裂解缓冲液处理前后,使用NucleoCounter分析细胞样本,从而估算出死细胞和总细胞数。
为监测成骨细胞分化,将冷冻保存的细胞在含15% FBS的α-MEM培养基中解冻。然后,将细胞以1 × 10⁴ 个细胞/cm²的密度接种于十二孔培养板中,并在添加了10 mM β-甘油磷酸二钠、0.07 mM L-抗坏血酸磷酸镁正水合物和0.1 mM地塞米松的培养基中培养两周。不添加地塞米松的培养物用作阴性对照。通过测定钙含量和碱性磷酸酶(ALP)活性染色,对分化的成骨细胞进行生化分析。钙沉积(体外骨形成)的评估方法如我们之前报道。简而言之,在培养期间向培养基中加入1 µg/mL钙黄绿素,并使用荧光显微镜观察细胞外区域钙黄绿素的荧光。观察前,移除含钙黄绿素的培养基,并用PBS缓冲液洗涤。对于碱性磷酸酶(ALP)活性染色,用PBS缓冲液洗涤细胞,并在4%多聚甲醛中于4℃固定10分钟。然后将固定后的细胞浸泡在含有0.1%萘酚AS-MX磷酸盐和0.1%快红紫LB盐的56 mM 2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇溶液中,室温下孵育10分钟。用PBS洗涤后,通过显微镜观察活性ALP细胞[2]。
使用Fast Red Violet LB进行细胞或组织实验通常将其用作组织化学染色的显色底物。将组织切片或细胞制备物与含有该底物的缓冲液孵育,有色沉淀表明存在TRAP或ALP活性。这是病理学和研究实验室的标准技术。具体操作步骤取决于应用。
动物实验
Fast Red Violet LB 是一种用于体外组织切片的染色试剂,因此不适用于体内动物实验。
药代性质 (ADME/PK)
Fast Red Violet LB 是一种染色试剂,不具备常规药代动力学特性。它主要用于体外组织学和细胞学染色。该化合物应在适宜条件下储存以保持其稳定性。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
现有资料中未提供快速红紫LB的毒性数据。作为一种重氮盐,它可能具有潜在危害,因此在操作时应遵守标准的实验室安全预防措施。本品仅供研究和诊断用途,不得用于人类食用。
参考文献

[1]. Genetic background influences fluoride's effects on osteoclastogenesis. Bone. 2007 Dec;41(6):1036-44.

[2]. Cultured autologous human cells for hard tissue regeneration: preparation and characterization of mesenchymal stem cells from bone marrow. Artif Organs. 2004 Jan;28(1):33-9.

其他信息
快红紫LB(CAS:32348-81-5)是一种重氮盐,用作组织学和免疫组织化学中TRAP和ALP的显色底物。它也被称为TRAP染色染料。该化合物在酶活性位点产生有色沉淀,从而实现可视化。其分子式为C₁₄H₁₁Cl₂N₃O,分子量为340.86。它并非治疗药物,仅用于研究和诊断目的。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C14H11N3OCL+.CL-
分子量
308.16264
精确质量
307.027
CAS号
32348-81-5
相关CAS号
Fast Red Violet LB Zinc chloride
PubChem CID
16219357
外观&性状
Off-white to yellow solid
LogP
1.462
tPSA
57.25
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
3
可旋转键数目(RBC)
2
重原子数目
20
分子复杂度/Complexity
372
定义原子立体中心数目
0
SMILES
CC1=CC(=NC(=O)C2=CC=CC=C2)C(=CC1=[N+]=[N-])Cl.Cl
InChi Key
SARKXLKWFKNUMR-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C14H10ClN3O.ClH/c1-9-7-13(11(15)8-12(9)18-16)17-14(19)10-5-3-2-4-6-10;/h2-8H,1H3;1H
化学名
4-benzamido-5-chloro-2-methylbenzenediazonium;chloride
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.2451 mL 16.2253 mL 32.4507 mL
5 mM 0.6490 mL 3.2451 mL 6.4901 mL
10 mM 0.3245 mL 1.6225 mL 3.2451 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们