| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
This compound serves as a model substrate for studying transglutaminase (tTG/TG2) activity and protein crosslinking. It is not a drug targeting a therapeutic receptor; rather, it is the molecular product of tTG-mediated crosslinking. tTG is the enzyme responsible for its formation, and the isopeptide bond plays a critical role in ECM stabilization and tissue remodeling. It is implicated in diseases including non-diabetic kidney disease, diabetic nephropathy, and glaucoma filtration.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在体外，ε-(γ-谷氨酰)-赖氨酸异肽键可用作组织转谷氨酰胺酶（tTG）活性的生物标志物。在tTG表达或活性增强的情况下，可观察到这些交联水平升高。该化合物可作为研究tTG介导的蛋白质交联的生化工具，而蛋白质交联对于稳定包括细胞外基质和纤维蛋白凝块在内的多种生物结构至关重要。它可用于酶活性测定，通过监测标记底物交联的形成来测量tTG活性。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，ε-(γ-谷氨酰)-赖氨酸交联水平在以纤维化、细胞外基质重塑或组织转谷氨酰胺酶（tTG）活性增强为特征的疾病状态下升高，包括非糖尿病肾病、糖尿病肾病、青光眼和某些纤维化疾病。在转谷氨酰胺酶介导的反应中，这些交联有助于组织稳定、伤口愈合和神经退行性疾病的发病机制。其水平的改变正被研究作为疾病进展的潜在生物标志物。
|
| 酶活实验 |
标准 tTG 活性测定：将 N,N-二甲基酪蛋白（0.5-1 ug/孔）溶于 PBS 中，于 4℃ 包被 96 孔微孔板过夜。室温下用 3% BSA 的 PBS 溶液封闭 1 小时。加入 tTG 酶（0.1-1 ug/mL）的反应缓冲液（50 mM Tris-HCl，5 mM CaCl2，10 mM DTT，pH 7.5），该缓冲液中含有生物素标记的戊胺（50-200 uM）和不同浓度的 ε-(γ-谷氨酰)-赖氨酸肽（作为竞争剂，1 nM-10 uM）。37℃ 孵育 30-60 分钟。洗涤后，加入 HRP 标记的链霉亲和素，孵育 30 分钟，再次洗涤，加入 TMB 底物，于 450 nm 处测定吸光度。或者，使用荧光标记的底物（例如，单丹酰尸胺）并监测荧光（激发波长 360 nm，发射波长 550 nm）。
|
| 细胞实验 |
对于交联形成研究，将成纤维细胞或其他产生细胞外基质（ECM）的细胞培养于含10%胎牛血清（FBS）的DMEM培养基中。用TGF-β1（2-10 ng/mL）诱导tTG表达或活化24-72小时。裂解细胞或收集ECM。使用针对ε-(γ-谷氨酰)-赖氨酸交联的特异性抗体（单克隆抗体）进行Western blot分析。或者，使用生物素标记的底物，然后用链霉亲和素检测交联蛋白。定量分析时，在蛋白水解后进行LC-MS/MS分析，以测定蛋白水解物中的ε-(γ-谷氨酰)-赖氨酸二肽。对于细胞活力检测，用ε-(γ-谷氨酰)-赖氨酸（10-500 uM）处理细胞6-48小时，并通过MTT或LDH检测评估毒性。
|
| 动物实验 |
对于疾病模型研究，可使用转谷氨酰胺酶2 (TG2, tTG) 基因敲除小鼠或野生型对照小鼠，并构建单侧输尿管梗阻 (UUO) 肾纤维化模型、链脲佐菌素 (STZ) 诱导的糖尿病肾病模型或组织损伤模型等疾病模型。给予 TG2 抑制剂（例如胱胺，10-50 mg/kg）以调节交联形成。处死小鼠后采集组织样本（肾脏、肝脏、皮肤、眼部）。进行组织学处理或匀浆以提取蛋白质。通过 ELISA 或 LC-MS/MS 定量 ε-(γ-谷氨酰)-赖氨酸交联水平，作为 tTG 活性和细胞外基质 (ECM) 重塑的药效学生物标志物。对于青光眼模型，可使用眼高压模型并测量小梁网中的交联。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
ε-(γ-谷氨酰)-赖氨酸是一种内源性二肽，在细胞外基质(ECM)重塑过程中会被迅速分解代谢或周转。作为一种小分子亲水性肽（游离二肽的分子量约为275.3；三氟乙酸盐的分子量为389.32），如果外源性引入，预计会迅速经肾脏清除，且血浆半衰期很短（仅几分钟）。内源性水平因组织而异，通常在每毫克蛋白质皮摩尔至纳摩尔范围内。在正常稳态下，交联的形成与ECM的蛋白水解降解保持平衡。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
ε-(γ-谷氨酰)-赖氨酸是一种内源性代谢产物，在生理浓度或升高浓度下不被认为具有毒性。然而，在纤维化疾病中，过量的tTG介导的交联会导致病理性组织僵硬和器官功能障碍。该化合物本身不具有直接毒性。材料安全数据表指出，在火灾条件下，它可能会分解并释放有毒烟雾。应采取标准的实验室防护措施（手套、实验服、安全眼镜）。如果处理不当，TFA盐可能会刺激眼睛、皮肤和呼吸道。
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
该化合物又称H-Glu(H-Lys-OH)-OH TFA、γ-Glu-ε-Lys TFA或ε-(γ-谷氨酰)赖氨酸。它可用作转谷氨酰胺酶活性和蛋白质交联研究的模型底物或抑制剂，并用于生化分析，以研究ε-(γ-谷氨酰)-赖氨酸连接在组织稳定、伤口愈合和神经退行性疾病中的作用。TFA盐形式可提高其在水性缓冲液中的溶解度。仅供研究使用。
|
| 分子式 |
C13H22F3N3O7
|
|---|---|
| 分子量 |
389.32
|
| 相关CAS号 |
Epsilon-(gamma-glutamyl)-lysine;17105-15-6
|
| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~250 mg/mL (~642.15 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5686 mL | 12.8429 mL | 25.6858 mL | |
| 5 mM | 0.5137 mL | 2.5686 mL | 5.1372 mL | |
| 10 mM | 0.2569 mL | 1.2843 mL | 2.5686 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
