规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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5mg |
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10mg |
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50mg |
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Other Sizes |
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体外研究 (In Vitro) |
方案一:蛋白制备 1)请将蛋白(抗体)浓度制备至2 mg/mL,以达到最大的标记效果。 2)蛋白质溶液的pH为8.5±0.5。如果 pH 值低于 8.0,则应添加 1 毫克碳酸氢钠 (1M)。 3) 蛋白质含量低于2 mg/mL时,标记效率会显着降低。为了获得最佳标记效率,建议的最终蛋白质浓度范围为 2–10 mg/mL。 4) 为了确保最佳的标记效果,蛋白质需要处于不含铵离子和伯胺(如 Tris 或甘氨酸)的缓冲液中。 2. 染料制备(例如,使用 CY3-NHS 酯) 要制备 10 mM 储备溶液,请在 CY3-NHS 酯小瓶中填充无水 DMSO。使用移液器或涡旋器充分混合。 3、染料用量的计算。待标记蛋白质的量决定了反应需要多少 CY3-NHS 酯; CY3-NHS 的理想摩尔比约为 10。 例如:假设 500 μL 2 mg/mL IgG (MW=150,000) 是必需的标记蛋白,则将 1 mg CY3-NHS 酯溶解在 100 μL DMSO 中,得到需要 5.05 μL CY3-NHS 酯。精确计算步骤如下: 1) mg/mL(IgG) ×mL(IgG)/MW(IgG) = 2 mg/mL × 0.5 mL/150,000 mg/mmol = 6.7×10-6 mmol 2) 摩尔( CY3-NHS 酯) = 摩尔(IgG) × 10=6.7 × 10-6 mmol×10=6.7 × 10-5 mmol 3) uL(CY3-NHS 酯) = mmol(CY3-NHS 酯) ×MW(CY3- NHS 酯)/mg/μL(CY3-NHS 酯) = 6.7 ×10-5 mmol ×753.88 mg/mmol/0.01 mg/μL=5.05 μL (CY3-NHS 酯) 4. 开始偶联反应。 1) 添加所需量的新制备的 CY3-NHS 酯 (10 mg/mL)。应将 0.5 mL 蛋白质样品逐渐添加到溶液中,轻轻摇动使其混合,然后快速离心以将材料收集在反应管底部。为防止蛋白质样品变性和失活,请勿将它们均匀混合。 2) 将反应管置于避光处后,室温轻轻孵育60分钟。 10 到 15 分钟后,轻轻扭转反应。 5. 使缀合物纯化 下面提供了染料-蛋白质缀合物的 SepHadex G-25 柱纯化过程的示例。 br/> 首先,按照制造商的指示准备 SepHadex G-25 色谱柱。 2) 将反应混合物填充 SepHadex G-25 柱至边缘(来自“运行缀合反应”)。 3) 当样品流到顶部树脂表面以下时,立即添加 PBS (pH 7.2–7.4)。要完成所选样品的纯化,请添加额外的 PBS (pH 7.2–7.4)。将适当的含有染料-蛋白质缀合物的级分合并。
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参考文献 |
分子式 |
C45H60N4O10S2
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分子量 |
881.11
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相关CAS号 |
CY7-SE;477908-53-5
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外观&性状 |
Dark purple to dark blue solid powder
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HS Tariff Code |
2934.99.9001
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存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: (1). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。 (2). 该产品在溶液状态不稳定,请现配现用。 |
运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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溶解度 (体外实验) |
DMSO :~83.33 mg/mL (~94.57 mM)
H2O :~10 mg/mL (~11.35 mM) |
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溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (2.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (2.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 1.1349 mL | 5.6747 mL | 11.3493 mL | |
5 mM | 0.2270 mL | 1.1349 mL | 2.2699 mL | |
10 mM | 0.1135 mL | 0.5675 mL | 1.1349 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。