| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CY7-SE triethylamine does not bind to a biological target; it is a chemical labeling reagent. The succinimidyl ester (SE) group reacts specifically with primary amines (-NH2) on lysine residues or protein N-termini under mild conditions to form stable covalent amide bonds. The CY7 fluorophore provides NIR fluorescence for detection and imaging.
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| 体外研究 (In Vitro) |
方案一:蛋白质制备 1) 请将蛋白质(抗体)浓度配制至 2 mg/mL,以获得最佳标记效果。2) 蛋白质溶液的 pH 值为 8.5±0.5。如果 pH 值低于 8.0,则需加入 1 mg 碳酸氢钠 (1M) 调节 pH 值。3) 如果蛋白质浓度低于 2 mg/mL,标记效率将显著降低。建议最终蛋白质浓度范围为 2–10 mg/mL,以获得最佳标记效率。4) 为确保最佳标记效果,蛋白质需要溶于不含铵离子和伯胺的缓冲液中,例如 Tris 或甘氨酸缓冲液。2. 染料制备(例如使用 CY3-NHS 酯) 要配制 10 mM 的储备液,请用无水 DMSO 填充 CY3-NHS 酯小瓶。使用移液器或涡旋振荡器充分混匀。3. 染料用量计算。待标记蛋白质的量决定了反应所需的 CY3-NHS 酯的量;CY3-NHS 的理想摩尔比约为 10。例如:假设 500 μL 2 mg/mL IgG(MW=150,000)是所需的标记蛋白,则将 1 mg CY3-NHS 酯溶解于 100 μL DMSO 中,即可得到所需的 5.05 μL CY3-NHS 酯。以下是精确的计算步骤:1) mg/mL(IgG) × mL(IgG)/MW(IgG) = 2 mg/mL × 0.5 mL/150,000 mg/mmol = 6.7×10-6 mmol 2) mol(CY3-NHS酯) = mol(IgG) × 10 = 6.7 × 10-6 mmol × 10 = 6.7 × 10-5 mmol 3) μL(CY3-NHS酯) = mmol(CY3-NHS酯) × MW(CY3-NHS酯)/mg/μL(CY3-NHS酯) = 6.7 × 10-5 mmol × 753.88 mg/mmol/0.01 mg/μL = 5.05 μL (CY3-NHS酯) 4. 开始偶联反应。1) 加入所需量的刚制备的CY3-NHS酯(10 mg/mL)。将 0.5 mL 蛋白质样品逐渐加入溶液中,轻轻摇晃使其混合均匀,然后快速离心,使物质聚集在反应管底部。为防止蛋白质样品变性或失活,请勿等量混合。2) 将反应管置于避光处,在室温下轻轻孵育 60 分钟。10 至 15 分钟后,轻轻反转反应。5. 纯化偶联物 下面提供了一个使用 SepHadex G-25 柱纯化染料-蛋白质偶联物的示例。首先,按照制造商的说明准备 SepHadex G-25 柱。2) 将反应混合物(来自“运行偶联反应”)加满 SepHadex G-25 柱。3) 当样品流过树脂表面时,立即加入 PBS(pH 7.2–7.4)。为完成所选样品的纯化,可再次加入 PBS(pH 7.2–7.4)。将含有相应染料-蛋白质缀合物的组分合并。
在体外,CY7-SE三乙胺可用作荧光标记剂。将其添加到含有目标蛋白或肽的溶液中,其中的SE基团与暴露的胺基反应。所得标记的生物分子可用于流式细胞术、荧光显微镜或免疫分析等检测方法,其中CY7标记可在近红外通道中进行检测,且生物样品产生的背景自发荧光极低。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
CY7-SE三乙胺不直接用于体内活性测定。它用于标记靶向配体(例如抗体、肽),然后将这些配体静脉注射到动物模型中。CY7荧光团提供近红外荧光,由于近红外波长下光散射和吸收减少,因此可以进行体内深层组织成像。这使得对生物分布和肿瘤蓄积进行非侵入性追踪成为可能。
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| 酶活实验 |
在体外酶活性测定中,CY7-SE 三乙胺通常不用作底物或抑制剂,而是用于蛋白质标记反应。标记方案:将 100 ug 浓度为 1 mg/mL 的蛋白质(例如抗体)溶于 PBS 缓冲液(pH 7.2-7.4)中,并与 2-10 uL 浓度为 5-20 mM 的 CY7-SE 三乙胺 DMSO 溶液(DMSO 终浓度为 2-20%)混合。反应在室温下温和搅拌 60 分钟。未反应的染料可通过透析或尺寸排阻色谱法去除。标记度 (DOL) 通过分光光度法测定,分别在 750 nm 和 280 nm 波长处测量吸光度来确定。
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| 细胞实验 |
在基于细胞的检测中,使用CY7标记的抗体或肽进行细胞摄取和结合研究。将细胞接种于8孔腔室载玻片或96孔板中,并培养过夜。将CY7标记的靶向探针加入培养基中,使其终浓度为1-10 ug/mL,并在37℃下孵育1-4小时。然后用PBS洗涤细胞以去除未结合的探针,用4%多聚甲醛固定(可选),并用Hoechst 33342进行细胞核复染。使用显微镜或酶标仪进行荧光成像,激发/发射波长为750/775 nm。为了评估非特异性结合,在平行孔中加入50倍过量的未标记抗体进行共孵育。
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| 动物实验 |
在体内成像研究中,将CY7标记的抗体(例如,抗EGFR抗体偶联物)通过尾静脉注射给携带皮下肿瘤异种移植瘤的小鼠(6-8周龄,20-25克)。典型剂量为每只小鼠50-100微克标记抗体,溶于100-200微升PBS缓冲液(pH 7.4)中。使用近红外成像系统(激发波长745-755纳米,发射波长800纳米带通滤波器)在不同时间点(例如,注射后1、6、12、24、48、72小时)进行体内荧光成像。在实验终点,处死小鼠,并取出主要器官(肿瘤、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、心脏)进行离体荧光成像,以量化生物分布。荧光信号以辐射效率 [(p/s/cm2/sr)/(microW/cm2)] 或每克组织注射剂量的百分比表示。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
CY7-SE 三乙胺的分子量为 881.11 Da(游离碱)。该化合物为固体,应在 -20℃ 下避光防潮保存。储备液(10-20 mM)用无水 DMSO 配制;配制好的溶液应在 -80℃ 下保存长达 6 个月,或在 -20℃ 下保存长达 1 个月。用于蛋白质标记时,该染料通常以 DMSO 溶液的形式使用。三乙胺盐形式用于在储存过程中稳定活性 NHS 酯。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
作为一种反应性标记试剂,CY7-SE 三乙胺应小心操作,避免皮肤接触和吸入粉尘。应遵循标准的实验室安全操作规程(例如,佩戴手套、实验服和护目镜)。本产品仅供研究使用,不得用于人体诊断或治疗。在典型的研究浓度下,尚未报告明显的毒性。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
CY7-SE 三乙胺是一种用于近红外成像的荧光染料。CY7 荧光团是一种七甲川吲哚菁类菁染料,由于含有磺酸基团,具有优异的水溶性。琥珀酰亚胺酯 (SE) 形式可通过酰胺键与伯胺共价偶联。三乙胺反离子用于在储存过程中稳定反应性 NHS 酯。常见应用包括流式细胞术、免疫荧光 (IF)、荧光原位杂交 (FISH)、蛋白质印迹和体内成像。该化合物也可作为游离酸或其他反应性形式(例如 NHS 酯、马来酰亚胺、叠氮化物)用于不同的标记策略。
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| 分子式 |
C45H60N4O10S2
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| 分子量 |
881.11
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| 相关CAS号 |
CY7-SE;477908-53-5
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| 外观&性状 |
Dark purple to dark blue solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: (1). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。 (2). 该产品在溶液状态不稳定,请现配现用。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~83.33 mg/mL (~94.57 mM)
H2O :~10 mg/mL (~11.35 mM) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (2.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (2.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.1349 mL | 5.6747 mL | 11.3493 mL | |
| 5 mM | 0.2270 mL | 1.1349 mL | 2.2699 mL | |
| 10 mM | 0.1135 mL | 0.5675 mL | 1.1349 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。