cGAMP diammonium (Cyclic GMP-AMP diammonium; 3',3'-cGAMP diammonium)

目录号: V77156 纯度: ≥98%
cGAMP(环 GMP-AMPP)二铵充当内源性第二信使,并根据胞质 DNA 触发干扰素的产生。
cGAMP diammonium (Cyclic GMP-AMP diammonium; 3',3'-cGAMP diammonium) 产品类别: Endogenous Metabolite
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1mg
Other Sizes

Other Forms of cGAMP diammonium (Cyclic GMP-AMP diammonium; 3',3'-cGAMP diammonium):

  • 2'2'-cGAMP disodium
  • cGAMP disodium (Cyclic GMP-AMP disodium; 3',3'-cGAMP disodium)
  • 2',3'-cGAMP sodium (2'-3'-cyclic GMP-AMP sodium)
  • Mal-Val-Ala-PABA-cGAMP
  • 2',3'-cGAMP-d8 ammonium
  • 2'2'-cGAMP
  • cGAMP free acid
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InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
cGAMP(环 GMP-AMPP)二铵充当内源性第二信使,并根据胞质 DNA 触发干扰素的产生。 cGAMP 二铵激活干扰素基因刺激剂 (STING),激活信号级联,导致 I 型干扰素和其他免疫介质的产生。
生物活性&实验参考方法
靶点
Human Endogenous Metabolite; second messenger; STING/stimulator of interferon genes
体外研究 (In Vitro)
cGAMP 二铵可增强小鼠脾细胞响应特定抗原而增殖的能力 [2]。在体外,人类和小鼠树突状细胞立即被 cGAMP 二铵激活 [2]。在 cGAMP 二铵刺激后,患者成纤维细胞表现出 IFNB1 转录增强,但编码 TNF、IL6 或白细胞介素 1 (IL1) 的基因则没有增强 [3]。内质网 (ER) 驻留受体 STING 被 cGAMP 二铵激活,从而诱导抗病毒状态并产生 I 型干扰素 [4]。
体内研究 (In Vivo)
在接受疫苗接种的小鼠中,当暴露于 5 μg 鼻粘膜佐剂二铵 (cGAMP) 时,脾细胞会产生更多的抗原特异性细胞因子 [2]。
酶活实验
胞浆DNA诱导I型干扰素和其他细胞因子,这些细胞因子对抗菌防御很重要,但也可能导致自身免疫。这种DNA信号通路需要衔接蛋白STING和转录因子IRF3,但DNA传感的机制尚不清楚。我们发现,哺乳动物细胞质提取物在体外由三磷酸腺苷和鸟苷三磷酸在DNA而非RNA的存在下合成环鸟苷一磷酸腺苷一磷酸(环GMP-AMP或cGAMP)。哺乳动物细胞的DNA转染或DNA病毒感染也会触发cGAMP的产生。cGAMP与STING结合,导致IRF3的激活和干扰素-β的诱导。因此,cGAMP在后生动物中起着内源性第二信使的作用,并触发干扰素的产生以响应细胞质DNA[1]。
细胞实验
原代细胞的体外刺激[2]
原代细胞的培养基中补充了5µg/ml(小鼠细胞)或60µg/ml(人细胞)的c-di-AMP或cGAMP,或者不添加任何添加剂。细胞在37°C下孵育24小时。
Scrape loading[[3]
HEK STING细胞以2.5×105个细胞ml-1的密度接种在96孔板中。16小时后,向培养基中加入cGAMP(2′-5′)至终浓度为50μg ml−1。使用18G针手动损伤单层细胞,每孔6处划痕。4-8小时后采集图像。
动物实验
动物/疾病模型: 6-8周龄雌性C57BL/6 (H-2b)小鼠[2]
剂量: 5 µg
给药途径: 鼻孔黏膜佐剂
实验结果: 与OVA免疫小鼠相比,cGAMP佐剂OVA免疫小鼠血清中卵清蛋白(OVA)特异性IgA、总IgG以及IgG1和IgG2c的滴度更高。
小鼠免疫实验[2]
每组5只动物分别于第0、14和28天进行免疫。动物用异氟烷麻醉,每侧鼻孔滴入10 µl,分别单独使用15 µg OVA或与5 µg OVA联合使用。在Ampuwa中添加c-di-AMP、cGAMP或霍乱毒素B亚单位,或在对照组(假免疫)中仅使用Ampuwa。免疫后第42天处死动物并采集样本。
参考文献

[1]. Cyclic GMP-AMP is an endogenous second messenger in innate immune signaling by cytosolic DNA. Science. 2013 Feb 15;339(6121):826-30.

[2]. Cyclic GMP-AMP displays mucosal adjuvant activity in mice. PLoS One. 2014 Oct 8;9(10):e110150.

[3]. Cell intrinsic immunity spreads to bystander cells via the intercellular transfer of cGAMP. Nature. 2013 Nov 28;503(7477):530-4.

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C20H30N12O13P2
分子量
708.47
相关CAS号
cGAMP disodium;2407516-83-8;cGAMP;849214-04-6
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O :~100 mg/mL (~141.15 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 33.33 mg/mL (47.05 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.4115 mL 7.0575 mL 14.1149 mL
5 mM 0.2823 mL 1.4115 mL 2.8230 mL
10 mM 0.1411 mL 0.7057 mL 1.4115 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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