| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Human Endogenous Metabolite; second messenger; STING/stimulator of interferon genes
cGAMP diammonium directly activates the stimulator of interferon genes (STING), an endoplasmic reticulum (ER)-resident receptor. Activation of STING initiates a signaling cascade via TBK1 and IRF3, leading to the production of type I interferons (IFN-alpha/beta) and other pro-inflammatory cytokines. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
cGAMP二铵可增强小鼠脾细胞对特定抗原的增殖反应[2]。体外实验表明，cGAMP二铵可立即激活人和小鼠的树突状细胞[2]。cGAMP二铵刺激患者成纤维细胞后，IFNB1的转录增强，但TNF、IL-6或IL-1基因的转录未见增强[3]。cGAMP二铵可激活内质网（ER）驻留受体STING，进而诱导抗病毒状态和I型干扰素的产生[4]。
体外实验表明，cGAMP二铵可直接激活小鼠和人树突状细胞，促进其成熟和抗原呈递能力。它还能刺激患者的成纤维细胞，导致IFNB1转录增加。此外，它还能诱导抗病毒状态并促进I型干扰素的分泌。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在接种疫苗的小鼠中，脾细胞在暴露于 5 μg 鼻黏膜佐剂二铵 (cGAMP) 时会产生更多抗原特异性细胞因子 [2]。
近期发现的哺乳动物酶环状 GMP-AMP 合成酶在被病原体来源的胞质双链 DNA 激活后会产生环状 GMP-AMP (cGAMP)。该产物可以刺激 STING 依赖的 I 型干扰素信号通路。本文探讨了 cGAMP 作为小鼠黏膜佐剂的功效。研究表明，cGAMP 可以增强对模型抗原卵清蛋白的适应性免疫应答。它能促进免疫小鼠产生抗原特异性 IgG，并维持 Th1/Th2 淋巴细胞的平衡应答。cGAMP 诱导的免疫应答的一个特点是，作为 Th17 活性标志的白细胞介素-17 的诱导略有降低——这是其他环状二核苷酸佐剂所不具备的独特特征。我们进一步在体外对小鼠骨髓来源的树突状细胞和人树突状细胞进行了先天免疫刺激活性表征。观察到的结果表明，cGAMP 可作为人类疫苗的候选黏膜佐剂[2]。 在体内，cGAMP二铵可用作疫苗佐剂，鼻内给药可提高抗体滴度。它能激活cGAS-STING通路，促进先天免疫反应，并可在动物癌症模型中增强抗肿瘤免疫反应。 |
| 酶活实验 |
胞质DNA可诱导I型干扰素和其他细胞因子的产生，这些细胞因子对抗菌防御至关重要，但也可能导致自身免疫性疾病。该DNA信号通路需要接头蛋白STING和转录因子IRF3，但其DNA识别机制尚不明确。我们发现，在体外，哺乳动物胞质提取物在DNA存在的情况下，而非RNA存在的情况下，可由ATP和GTP合成环状鸟苷单磷酸-腺苷单磷酸（环状GMP-AMP，或cGAMP）。DNA转染或DNA病毒感染哺乳动物细胞也能诱导cGAMP的产生。cGAMP与STING结合，进而激活IRF3并诱导干扰素-β的产生。因此，cGAMP在后生动物中作为内源性第二信使发挥作用，并响应胞质DNA而触发干扰素的产生[1]。
在体外酶结合实验中，cGAMP 与 STING 的亲和力可通过表面等离子共振 (SPR) 或等温滴定量热法 (ITC) 测定。纯化的 STING 蛋白被固定在芯片上，然后将不同浓度的 cGAMP 溶液流过芯片，以计算结合常数 (Kd)。 |
| 细胞实验 |
体外刺激原代细胞[2]
在原代细胞培养基中添加 5 µg/ml（小鼠细胞）或 60 µg/ml（人细胞）的 c-di-AMP 或 cGAMP，或不添加任何添加剂。细胞在 37°C 下孵育 24 小时。 刮擦加载[3] 将 HEK STING 细胞以 2.5 × 10⁵ 个细胞/ml 的密度接种于 96 孔板中。16 小时后，向培养基中加入 cGAMP(2′-5′) 至终浓度为 50 μg/ml。使用 18G 针头在每个孔中手动划痕 6 次，以损伤细胞单层。4-8 小时后采集图像。 在基于细胞的检测中，将稳定表达STING依赖性荧光素酶报告基因的细胞（例如THP-1来源的巨噬细胞或HEK293T细胞）接种于96孔板中。用cGAMP二铵（例如，0.1-100 ug/mL）处理细胞6-24小时。孵育后，制备细胞裂解液并测定荧光素酶活性。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 6-8周龄雌性C57BL/6 (H-2b)小鼠[2]
剂量： 5 µg 给药途径： 鼻孔黏膜佐剂 实验结果： 与OVA免疫小鼠相比，cGAMP佐剂OVA免疫小鼠血清中卵清蛋白(OVA)特异性IgA、总IgG以及IgG1和IgG2c的滴度更高。 小鼠免疫实验[2] 每组5只动物分别于第0、14和28天进行免疫。动物用异氟烷麻醉，每侧鼻孔滴入10 µl，分别单独使用15 µg OVA或与5 µg OVA联合使用。在Ampuwa中添加c-di-AMP、cGAMP或霍乱毒素B亚单位，或在对照组（假免疫）中仅使用Ampuwa。免疫后第42天处死动物并采集样本。 在动物实验中，将雌性C57BL/6小鼠（6-8周龄）通过鼻内、瘤内或腹腔注射途径（例如，5微克/只）给予cGAMP二铵。在给药后不同时间点采集血液和组织样本。对于肿瘤实验，每2-3天测量一次肿瘤体积，持续2-3周。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
腹腔注射后，cGAMP二铵盐迅速分布，在血浆和淋巴组织中均可检测到。其消除半衰期相对较短。二铵盐形式易溶于水，这有利于肠外给药和提高全身生物利用度。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
cGAMP二铵在标准剂量下通常被认为对研究用途安全。动物研究表明，未观察到存活率的显著变化或明显的毒性反应。由于其能激活免疫通路，建议密切监测是否存在过度炎症或细胞因子释放综合征。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
cGAMP二铵是一种水溶性合成环状二核苷酸（cGAMP），它作为内源性第二信使激活STING通路，进而诱导I型干扰素的产生。它广泛应用于疫苗佐剂的研发、癌症免疫疗法的研究以及抗病毒免疫的研究。本产品仅供研究使用。
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| 分子式 |
C20H30N12O13P2
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|---|---|
| 分子量 |
708.47
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| 相关CAS号 |
cGAMP disodium;2407516-83-8;cGAMP;849214-04-6
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~100 mg/mL (~141.15 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 33.33 mg/mL (47.05 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4115 mL | 7.0575 mL | 14.1149 mL | |
| 5 mM | 0.2823 mL | 1.4115 mL | 2.8230 mL | |
| 10 mM | 0.1411 mL | 0.7057 mL | 1.4115 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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