| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
EC50: 9.5 μM (PAD2); 0.4 μM (H3 citrullination)[1]
PAD2 (Protein Arginine Deiminase 2). |
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| 体外研究 (In Vitro) |
化合物 30a，或称 AFM-30a 盐酸盐，其 EC50 值为 9.5 μM，能够高效穿透 HEK293T/PAD2 细胞并与 PAD2 发生共价修饰[1]。AFM-30a 盐酸盐的 EC50 值为 0.4 μM，具有良好的 H3 瓜氨酸化阻断能力[1]。
AFM-30a 盐酸盐与 PAD2 结合的 EC50 值为 9.5 uM，并能有效穿透 HEK293T/PAD2 细胞，以共价方式修饰该酶。它还能强效抑制 H3 瓜氨酸化（EC50：0.4 uM），表现出优异的细胞内活性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 PAD2-/-转基因小鼠中，AFM-30a 盐酸盐可减少气道重塑并抑制 NLRP3 信号传导[2]。
体内数据有限。PAD2抑制剂（如AFM-30a）被用于研究癌症和自身免疫性疾病，例如类风湿性关节炎（RA）、多发性硬化症、狼疮和溃疡性结肠炎。疗效通过动物模型中瓜氨酸化蛋白的减少来衡量。 |
| 酶活实验 |
进行标准的体外PAD2抑制试验。将重组人PAD2与合成底物（例如N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯）和Ca2+在Tris缓冲液中孵育。向反应中加入AFM-30a。通过与二乙酰单肟和安替比林的比色反应定量瓜氨酸产物。
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| 细胞实验 |
细胞活力测定[1]
细胞类型： HEK293T/PAD2 细胞 测试浓度： 各种浓度 孵育时间： 24 小时 实验结果： 表明对细胞的细胞毒性较低。 将HEK293T/PAD2细胞接种于6孔板中，并用不同浓度的AFM-30a（1-25 uM）处理6小时。用SDS缓冲液裂解细胞，并通过SDS-PAGE分离蛋白质。使用抗瓜氨酸（修饰）检测抗体进行Western blotting，以评估靶标结合和H3瓜氨酸化抑制情况。 |
| 动物实验 |
本研究采用类风湿性关节炎小鼠模型（胶原诱导性关节炎，CIA）。小鼠经II型胶原蛋白免疫后，一旦出现关节炎症状，即给予AFM-30a（例如，10-50 mg/kg，腹腔注射，每日一次）。监测临床关节炎评分（肿胀/发红），并采集爪组织进行组织学分析。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
AFM-30a 的药代动力学数据尚未公布。它是一种分子量为 502.97 的小分子，提示其具有口服生物利用度的潜力。其作用机制涉及对 PAD2 的共价修饰，即使化合物从血液循环中清除后，仍能持续抑制靶点活性。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无具体的毒性数据。作为PAD2的共价抑制剂，AFM-30a可能通过抑制其他PAD同工酶（PAD1、PAD3、PAD4）而产生潜在的脱靶毒性，尽管据报道其具有高度选择性。本品仅供研究使用。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
PAD2介导的组蛋白和其他核蛋白的瓜氨酸化调控基因表达。PAD2功能失调与多发性硬化症（MS）、溃疡性结肠炎和类风湿性关节炎相关。AFM-30a是一种选择性化学探针，用于解析PAD2在这些疾病中的作用，它并非临床药物。
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| 分子式 |
C24H28CLFN6O3
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|---|---|
| 分子量 |
502.97
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| 相关CAS号 |
AFM-30a;2095107-57-4
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~50 mg/mL (~99.41 mM)
DMSO :~50 mg/mL (~99.41 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (9.94 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 50.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (9.94 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 50.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9882 mL | 9.9410 mL | 19.8819 mL | |
| 5 mM | 0.3976 mL | 1.9882 mL | 3.9764 mL | |
| 10 mM | 0.1988 mL | 0.9941 mL | 1.9882 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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