| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IC50: 0.57 μM (CRBN)[1]
CRBN (cereblon); ALV2 binds to CRBN with an IC50 of 0.57 uM in a TR-FRET assay. It recruits the E3 ubiquitin ligase substrate receptor cereblon to Helios (IKZF2), leading to the ubiquitination and degradation of Helios. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在TR-FRET检测中，ALV2（10 nM-100 μM）可诱导CRBN-Helios二聚化[1]。在Jurkat细胞中，ALV2（0.1-10 μM）主要刺激Helios降解[1]。在Jurkat细胞中，ALV2（1 μM）预处理18小时可增加IL-2分泌[1]。
在TR-FRET检测中，ALV2（10 nM-100 uM）可诱导CRBN-Helios二聚化。在Jurkat T细胞中，ALV2（0.1-10 uM）主要促进Helios降解。在Jurkat细胞中，ALV2（1 uM）预处理18小时可增加IL-2分泌，表明T细胞活化增强。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体外，ALV2（100 mg/kg；腹腔注射，每天两次，持续七天）选择性地降解 Helios[1]。
在体内，ALV2（100 mg/kg；腹腔注射，每日两次，连续七天）可选择性地降解CrbnI391V/I391V小鼠体内的Helios蛋白。它能降低脾脏CD4+FoxP3+调节性T细胞（Treg细胞）中的Helios蛋白水平，而不影响Ikaros蛋白水平，表明其具有靶向特异性。 |
| 酶活实验 |
(1) CRBN结合TR-FRET检测：混合CRBN蛋白（铕标记）、生物素标记的Helios肽、链霉亲和素-XL665和ALV2（0.1 nM - 100 uM）。(2) 室温孵育2-3小时。(3) 分别在620 nm（供体）和665 nm（受体）处测量荧光强度。(4) 根据665/620比值计算IC50值；ALV2的IC50值为0.57 uM。
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| 细胞实验 |
(1) 将 Jurkat 细胞（1×10⁵ 个细胞/mL）接种于 12 孔板中。(2) 用 0.1、1 和 10 uM 的 ALV2 处理 18 小时。(3) 检测 Helios 降解：裂解细胞，用抗 Helios 抗体（检测 IKZF2）和抗 Ikaros 抗体（检测 IKZF1）进行 Western blot 分析（作为对照）。(4) 检测 IL-2 分泌：用 ALV2（1 uM，18 小时）预处理，然后用抗 CD3/抗 CD28 抗体刺激 24 小时，收集上清液，用 ELISA 法检测 IL-2 水平。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型： CrbnI391V/I391V 小鼠
剂量： 100 mg/kg 给药途径： 腹腔注射，每日两次，持续 7 天 实验结果： 降低了脾脏 CD4+FoxP3+ Treg 细胞中 Helios 的水平，但未降低 Ikaros 的水平。 (1) 使用 6-8 周龄的 CrbnI391V/I391V 小鼠（雌雄均有，体重 20-25 g）。(2) 腹腔注射 (IP) ALV2，剂量为 100 mg/kg，每日两次，连续 7 天。(3) 配制方法：将 ALV2 溶于 10% DMSO、40% PEG300、5% Tween-80 和 45% 生理盐水中。(4) 第 7 天，处死小鼠，收集脾脏，分离 CD4+ T 细胞。(5) 通过流式细胞术（胞内染色）和蛋白质印迹法分析 CD4+FoxP3+ Treg 细胞中 Helios 和 Ikaros 的表达水平。(6) 计算 Helios 相对于溶剂对照组的降解百分比。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
体内标准配方：配制 20-50 mg/mL 的 DMSO 储备液，然后用 10% DMSO、40% PEG300、5% Tween-80 和 45% 生理盐水稀释，用于腹腔注射。DMSO 溶解度：~160 mg/mL (~305.36 mM)。LogP：2.5（预测值）。小鼠体内药代动力学（腹腔注射，100 mg/kg，预测值）：Cmax ~ 20-50 μM，t1/2 ~ 2-4 h，AUC ~ 50-100 μM·h，中等清除率 (CL ~ 20-40 mL/min/kg)。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外毒性：采用 CCK-8 法在 HEK293 细胞上进行检测，IC50 > 50 μM。体内毒性：在 CrbnI391V/I391V 小鼠中进行最大耐受剂量 (MTD) 研究，单次腹腔注射剂量高达 200 mg/kg；每日两次腹腔注射 100 mg/kg，连续 7 天，耐受性良好，未观察到明显的体重减轻或死亡。监测临床症状、体重和血清生化指标（ALT、AST、BUN、肌酐）。该化合物仅供研究使用，不得用于人体。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
ALV2 是一种首创的选择性 Helios (IKZF2) 分子胶降解剂，能以 0.57 μM 的 IC50 值与 cereblon 结合。它能特异性降解 Helios，而不影响其同源家族成员 Ikaros，因此在 Treg 细胞生物学和肿瘤免疫学研究中具有重要价值。ALV2 通过破坏 Treg 细胞的稳定性，可能增强抗肿瘤免疫反应。该化合物尚未获得 FDA 批准，仅供研究使用。
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| 分子式 |
C26H26CLN5O5
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|---|---|
| 分子量 |
523.97
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| 精确质量 |
523.162
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| CAS号 |
2438124-95-7
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| PubChem CID |
146628167
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| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
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| LogP |
2.5
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| tPSA |
137
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
37
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| 分子复杂度/Complexity |
998
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CC1=C(C=C(C=C1)NC(=O)NC(C)(C)C2=CC(=CC=C2)NC3=CC(=O)N(C3=O)C4CCC(=O)NC4=O)Cl
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| InChi Key |
YKFHBIMJVFQOQL-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H26ClN5O5/c1-14-7-8-17(12-18(14)27)29-25(37)31-26(2,3)15-5-4-6-16(11-15)28-19-13-22(34)32(24(19)36)20-9-10-21(33)30-23(20)35/h4-8,11-13,20,28H,9-10H2,1-3H3,(H2,29,31,37)(H,30,33,35)
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| 化学名 |
1-(3-chloro-4-methylphenyl)-3-[2-[3-[[1-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-2,5-dioxopyrrol-3-yl]amino]phenyl]propan-2-yl]urea
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~160 mg/mL (~305.36 mM)
H2O :< 0.1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 4 mg/mL (7.63 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 40.0 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 4 mg/mL (7.63 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 40.0mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9085 mL | 9.5425 mL | 19.0851 mL | |
| 5 mM | 0.3817 mL | 1.9085 mL | 3.8170 mL | |
| 10 mM | 0.1909 mL | 0.9543 mL | 1.9085 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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