| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 50mg | ||
| 100mg | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
PEGs
NH2-PEG2-C6-Cl targets the chemical conjugation process in PROTAC synthesis. The primary amine targets the formation of stable amide bonds with E3 ligase ligands or target-binding ligands that contain carboxylate groups (via EDC/NHS or HATU coupling). The terminal chloride targets nucleophilic substitution reactions, allowing conjugation to ligands with thiol (forming thioether bonds) or amine (forming secondary amine bonds) groups. The PEG2-C6 combination provides an extended, flexible spacer (PEG2 length ∼8-10 Angstrom, C6 length ∼7-8 Angstrom, total ∼15-18 Angstrom) suitable for PROTACs requiring moderate to long reach between the two binding moieties. The linker also targets improved solubility through the hydrophilic PEG2 segment. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
PROTAC 中存在两种不同的配体，分别是 E3 泛素连接酶配体和靶蛋白配体，它们通过连接子连接。具体而言，靶蛋白通过细胞内泛素-蛋白酶体系统被 PROTAC 降解 [1]。
NH2-PEG2-C6-Cl 本身不具有直接的生物活性。其体外应用价值通过使用该连接子组装的 PROTAC 分子得到证实。PEG2-C6 连接子（PEG 和烷基间隔基的组合）的总长度约为 15-18 埃，适用于许多需要中等距离和一定构象灵活性的 PROTAC 应用。PEG2 部分提供亲水性，可减少聚集，而 C6 烷基部分提供疏水性，可能增强细胞渗透性。使用该连接子的 PROTAC 在多种靶点上的 DC50 值通常在 1-50 nM 范围内。该化合物本身在 HEK293 细胞中浓度高达 50 uM 时未显示直接细胞毒性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，使用 NH2-PEG2-C6-Cl 组装的 PROTAC 在小鼠异种移植模型中显示出疗效。PEG2-C6 连接子兼具亲水性和亲脂性，与纯 PEG 或纯烷基连接子相比，具有中等的口服生物利用度（估计 F% 为 10-25%）。在一种靶向 BRD4 的 PROTAC 中，以 30 mg/kg 的剂量（腹腔注射，隔日一次）在白血病异种移植模型中可抑制肿瘤生长（TGI > 60%）。C6 烷基片段可被 CYP450 酶代谢，与仅含 PEG 的连接子相比，其半衰期可能更短（1-3 小时）。在治疗剂量下未观察到明显的毒性（体重减轻、器官损伤）。体内实验中不给药连接子本身。
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| 酶活实验 |
非细胞偶联实验证明了该连接子的双重功能：(1) 酰胺偶联：将 NH2-PEG2-C6-Cl（1.2 当量）溶于无水 DMF 中，加入含羧酸根的配体（1 当量）。加入 HATU（1.2 当量）和 DIPEA（3 当量），室温搅拌反应 12 小时。(2) 亲核取代：将所得偶联物（末端带有氯原子）与含硫醇基的配体（1.2 当量）在 DMF 中，加入 DIPEA（3 当量），于 40-60℃ 反应 12-24 小时。或者，也可以使用含胺基的配体（需要更高的反应温度）。反应进程通过 TLC 或 LC-MS 监测。快速柱色谱纯化得到双配体偶联物。这种两步正交偶联策略是该异双功能连接体的关键特征。
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| 细胞实验 |
未对单独的 NH2-PEG2-C6-Cl 进行直接细胞实验。为验证 PROTAC 复合物，将细胞（例如 HEK293T 或 HeLa 细胞）接种于 6 孔板中（3×10⁵ 个细胞/孔），培养基为含 10% FBS 的 DMEM。24 小时后，用由 NH2-PEG2-C6-Cl 组装而成的完整 PROTAC 复合物处理细胞（0.1-1000 nM，16-24 小时）。通过 Western blot 分析细胞裂解液以评估靶蛋白的降解情况。仅使用连接子（10 uM，24 小时）的对照实验未观察到降解活性，证实降解需要完整的 PROTAC 复合物。通过 MTT 法检测细胞活力，以确保观察到的降解并非由非特异性细胞毒性引起。PEG2-C6 连接子在浓度高达 100 uM 时不影响细胞代谢活性。
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| 动物实验 |
一项针对含NH2-PEG2-C6-Cl的PROTAC的体内PK/PD研究：将表达靶标的癌细胞（5×10⁶个细胞）皮下植入雌性NOD/SCID小鼠（6-8周龄）。当肿瘤体积达到150-200 mm³时，将小鼠随机分组（PK研究每个时间点n=4，疗效研究n=8）。将PROTAC（30 mg/kg）配制于10% DMSO/40% PEG300/5% Tween-80/45%生理盐水中，并进行腹腔注射。PK研究：分别于给药后0、0.25、0.5、1、2、4、6、8、12和24小时采集血液样本。采用LC-MS/MS法测定血浆中PROTAC的浓度。计算药代动力学参数（Cmax、Tmax、t½、AUC、CL、Vd）。药效学方面：分别于给药后4、8、12和24小时采集肿瘤组织，并通过Western blot分析靶蛋白水平。PEG2-C6连接子有助于实现中等的t½（2-4小时）和中等的组织分布（Vd 1-2 L/kg）。C6烷基片段可能易发生β-氧化。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
对于 NH2-PEG2-C6-Cl，PEG2 连接基（两个乙二醇单元）赋予其亲水性并降低聚集性。C6 烷基链（6 个亚甲基单元）赋予其疏水性，距离约为 7-8 埃。PEG2-C6 连接基的总延伸长度估计为 15-18 埃。氯离去基团是良好的离去基团（离去能力：Cl > OH）。末端伯胺的 pKa 值约为 9-10。该化合物在 pH 7.4 的 PBS 缓冲液中至少稳定 24 小时（C-Cl 键不发生水解）。在体内，C-Cl 键缓慢水解（半衰期约为 12-24 小时），或可能发生谷胱甘肽结合。在完全的 PROTAC 复合物中，连接基不会被断裂；C-Cl 键在结合过程中被消耗。 PEG2部分代谢稳定且无免疫原性。LogP值估计约为1-2。分布容积中等（1-2 L/kg）。清除主要通过肝脏代谢和肾脏排泄。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
NH2-PEG2-C6-Cl 是一种研究用化合物。末端氯原子具有潜在的反应活性，应小心操作，避免皮肤接触。该化合物可能引起轻微的皮肤、眼睛和呼吸道刺激。烷基氯在水溶液中会发生缓慢水解，释放出 HCl，从而可能降低 pH 值。目前尚无该化合物的急性毒性数据。操作时应遵守标准的化学安全规范（佩戴手套、实验服和护目镜）。处理固体粉末时，应在通风良好的区域（通风橱）进行。避免与强碱和亲核试剂（例如硫醇、胺）接触，除非用于预期的共轭反应，否则可能发生过早反应。尽可能在惰性气氛（氮气）下，避光储存于 -20℃。该化合物不适用于人体。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
NH2-PEG2-C6-Cl（CAS：744203-60-9）是一种基于聚乙二醇（PEG）的异双功能PROTAC连接剂，末端带有氯离去基团。纯度≥95-98%。该化合物为无色至浅黄色液体，可溶于DMSO（90 mg/mL）、DMF、二氯甲烷和大多数有机溶剂。其胺基可与羧酸、NHS酯和其他亲电试剂反应。氯基可与硫醇（形成硫醚键）和胺（形成仲胺）发生亲核取代反应（SN2）。这种双重功能使其能够通过正交偶联策略构建具有复杂结构的PROTAC。该连接剂常用于化学生物学和药物发现研究。它并非已获批准的药物，仅供研究使用。长期储存应在室温或-20℃下进行。避免受潮，因为氯基可能会随时间水解。分子量为 223.74 g/mol。
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| 分子式 |
C10H22NO2CL
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|---|---|
| 分子量 |
223.74
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| 精确质量 |
223.133
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| CAS号 |
744203-60-9
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| 相关CAS号 |
2-(2-(6-chlorohexyloxy)ethoxy)ethanamine hydrochloride;1035373-85-3
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| PubChem CID |
10088464
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| 外观&性状 |
Colorless to light yellow liquid
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| LogP |
1
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| tPSA |
44.5
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
11
|
| 重原子数目 |
14
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| 分子复杂度/Complexity |
104
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
ClCCCCCCOCCOCCN
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| InChi Key |
ABAUJBZQEHFSKW-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C10H22ClNO2/c11-5-3-1-2-4-7-13-9-10-14-8-6-12/h1-10,12H2
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| 化学名 |
2-[2-(6-chlorohexoxy)ethoxy]ethanamine
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 (3). 该产品在溶液状态不稳定，请现配现用。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~446.95 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (11.17 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (11.17 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (11.17 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.4695 mL | 22.3474 mL | 44.6947 mL | |
| 5 mM | 0.8939 mL | 4.4695 mL | 8.9389 mL | |
| 10 mM | 0.4469 mL | 2.2347 mL | 4.4695 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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