| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
INX-315 is a potent and selective inhibitor of cyclin-dependent kinase 2 (CDK2). Biochemical IC₅₀ values (mean ± SEM, n ≥ 3) determined by Nanosyn assay are: CDK2/cyclin E1 0.6 ± 0.2 nmol/L, CDK2/cyclin A2 2.5 ± 0.7 nmol/L, CDK1/cyclin B1 2.5 ± 0.7 nmol/L, CDK3/cyclin E1 4 ± 1 nmol/L, CDK5 1 ± 0.2 nmol/L, CDK5/p25 4 ± 1 nmol/L, CDK7 4640 ± 390 nmol/L, CDK9/cyclin T1 30 ± 8.3 nmol/L, CDK4/cyclin D1 1240 ± 40 nmol/L, CDK6/cyclin D3 1710 ± 480 nmol/L. It also inhibits CSF1R with an IC₅₀ of 2.29 nmol/L in follow-up assays. Intracellular target engagement IC₅₀ measured by NanoBRET: CDK2/cyclin E1 2.3 ± 0.07 nmol/L, CDK2/cyclin A1 71 ± 0.5 nmol/L, CDK1/cyclin B1 374 ± 63.5 nmol/L, CDK9/cyclin T1 2950 ± 314 nmol/L. The selectivity for CDK2 over CDK1 is approximately 50-fold in biochemical assays and 163-fold in NanoBRET assays [1].
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| 体外研究 (In Vitro) |
INX-315能有效抑制CCNE1扩增的癌细胞系增殖，在卵巢癌和胃癌细胞系（如OVCAR3、COV318、Kuramochi、MKN1）中平均IC₅₀为36 nmol/L（范围10–64 nmol/L），而非扩增细胞系敏感性显著降低（平均IC₅₀ 1435 nmol/L）。在CDK4/6抑制剂耐药的乳腺癌细胞（对abemaciclib或abemaciclib/fulvestrant耐药的MCF7和T47D）中，INX-315表现出增强的敏感性（IC₅₀值显著低于亲本细胞）。相反，正常成纤维细胞系Hs68对INX-315不敏感（IC₅₀ > 1 μmol/L）[1]。
细胞周期分析显示，OVCAR3和MKN1细胞经INX-315 (30–100 nmol/L)处理24小时后发生强烈的G₁期阻滞；在更高浓度（≥300 nmol/L）下出现G₁/G₂联合阻滞。G₁阻滞伴随视网膜母细胞瘤蛋白在Ser807/811和Thr821位点磷酸化降低，CDK2底物如CDC6和核仁素水平下降，以及E2F靶标cyclin A2的下调（Western blot证实）[1]。 INX-315在CCNE1扩增细胞中诱导治疗诱导的衰老。处理7天（100–1000 nmol/L）后，OVCAR3和MKN1细胞显示出衰老相关的β-半乳糖苷酶活性增加、核体积增大以及衰老基因特征上调（RNA-seq）。在CDK4/6抑制剂耐药的乳腺癌细胞中，加入INX-315可重建类似于亲本细胞经CDK4/6抑制剂诱导的衰老表型，包括染色质重塑和AP-1靶基因激活 [1]。 在耐药细胞中，INX-315与CDK4/6抑制剂（abemaciclib、palbociclib、ribociclib）联合使用比单药产生更强烈的生长抑制和E2F靶基因更深度的抑制 [1]。 长期克隆形成实验显示，CDK4/6抑制剂联合INX-315在10周内可防止对CDK4/6抑制产生耐药性，而单独使用CDK4/6抑制剂则出现耐药细胞群 [1]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在CCNE1扩增的肿瘤模型中，口服INX-315诱导剂量依赖性肿瘤生长抑制。在胃癌PDX GA0103（CCNE1约10拷贝）中，INX-315以25、50或100 mg/kg每日两次给药56天显著抑制肿瘤生长，100 mg/kg每日两次组出现肿瘤消退。在另一胃癌PDX GA0114（CCNE1约3拷贝）中，100 mg/kg每日两次给药5周抑制生长（P < 0.0001）。在卵巢癌PDX OV5398（CCNE1约9拷贝）中，100 mg/kg每日两次给药8周抑制生长（P < 0.0001）。在OVCAR3 CDX模型中，100 mg/kg每日两次同样抑制生长。未观察到显著体重减轻（>5%）或毒性迹象 [1]。
在转基因MMTV-rtTA/tetO-HER2乳腺癌模型中，对abemaciclib获得性耐药的小鼠分别给予溶媒、继续abemaciclib、INX-315 (50 mg/kg每日两次)或联合治疗。联合治疗显著减缓肿瘤生长超过5周，而单药效果有限。肿瘤分析显示联合治疗组E2F靶基因抑制更深且衰老标志物重建 [1]。 在CDK4/6抑制剂耐药的乳腺癌PDX ST4316B中，ribociclib (50 mg/kg每日一次)与INX-315 (50 mg/kg每日两次)联合治疗显著抑制肿瘤生长，优于任一单药，且耐受性良好 [1]。 OVCAR3和OV5398肿瘤的药效动力学分析显示，末次给药后16小时pRb和cyclin A2水平持续降低，证实了体内靶点结合 [1]。 |
| 酶活实验 |
生化激酶测定使用Nanosyn Caliper测定平台，基于微流体检测技术。化合物以12点剂量反应形式在ATP的Km浓度下进行单孔测定，底物肽浓度为1 μmol/L，以星形孢菌素作为参照化合物。测定各CDK/cyclin复合物的IC₅₀值。选择性谱分析中，INX-315以100 nmol/L浓度在LanthaScreen Eu激酶结合测定和Z'-Lyte激酶测定中测试。对抑制率≥80%的激酶进行10点剂量反应曲线测定（1 μmol/L至49.5 pmol/L）以确定IC₅₀值 [1]。
微粒体稳定性测定：将INX-315 (1 μmol/L)与人、大鼠、小鼠和大鼠的肝微粒体在NADPH存在下于37°C孵育。在0、10、20、30和60分钟取等分试样，通过LC-MS/MS分析。计算剩余百分比，并使用GraphPad软件测定半衰期和清除率 [1]。 |
| 细胞实验 |
细胞活力测定：细胞接种于96孔板（1,000–5,000细胞/孔），用系列稀释的INX-315处理6天（某些细胞系处理2倍倍增时间）。使用CellTiter-Glo试剂盒按说明书测定活力。在酶标仪上读取发光值，计算IC₅₀ [1]。
细胞周期分析：用INX-315处理24小时的细胞经70%乙醇固定，碘化丙啶染色，流式细胞术分析。数据用FlowJo软件处理 [1]。 Western blot：细胞或肿瘤裂解液用RIPA或细胞裂解缓冲液（含蛋白酶/磷酸酶抑制剂）制备。蛋白经SDS-PAGE分离，转至硝酸纤维素或PVDF膜，用抗pRb、Rb、cyclin A2、p-CDC6、核仁素、GAPDH等抗体孵育，HRP标记二抗和化学发光检测 [1]。 衰老相关β-半乳糖苷酶染色：细胞固定后用β-半乳糖苷酶染色试剂盒染色。采集图像，量化每细胞整合信号。用DAPI染核，鬼笔环肽染细胞骨架以评估核和细胞大小 [1]。 RNA-seq和ATAC-seq：用RNeasy试剂盒提取RNA，用TruSeq Stranded mRNA建库，在Illumina NextSeq 500上测序。ATAC-seq用Omni-ATAC方案对50,000个细胞核进行操作，使用Illumina Tagment DNA Enzyme，在NextSeq 500上测序。数据用标准流程分析 [1]。 |
| 动物实验 |
在PDX研究中，将肿瘤碎片皮下植入免疫缺陷小鼠体内（OV5398使用NOD/SCID小鼠；GA0103和GA0114使用BALB/c裸鼠；OVCAR3和ST4316B使用无胸腺裸鼠）。当肿瘤体积达到约150–300 mm³时，将小鼠随机分组（每组n = 8–10只）。INX-315每周配制一次，溶于100% PEG400中，通过灌胃给药，剂量为25–100 mg/kg，每日两次（BID）或100 mg/kg，每日一次（QD）。Abemaciclib的制备方法如前所述，给药剂量为50–75 mg/kg；ribociclib溶于0.5%甲基纤维素中，给药剂量为50 mg/kg，每日一次（QD）。每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积，并监测小鼠体重。在实验终点或肿瘤负荷超过阈值时，对动物实施安乐死[1]。
对于转基因MMTV-rtTA/tetO-HER2模型，诱导肿瘤形成后，对已形成肿瘤的小鼠持续给予阿贝西利（75 mg/kg）治疗，直至获得耐药性（肿瘤复发）。随后，将耐药小鼠随机分为四组：载体组、继续给予阿贝西利（50 mg/kg）组、INX-315（50 mg/kg，每日两次）组或联合用药组。治疗持续长达5周，并进行肿瘤监测[1]。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
INX-315在肝微粒体中表现出较高的代谢稳定性。孵育60分钟后，母体化合物的回收率分别为：人94%，大鼠100%，小鼠100%，犬100%（数据来自补充图S1B；正文中未提供具体数值，但表明其稳定性较高）。半衰期和固有清除率已计算（数据未显示）[1]。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在所有体内疗效研究中，INX-315 的耐受性良好。治疗期间，所有小鼠的体重下降均未超过 5%。在剂量高达 100 mg/kg，每日两次，持续 8 周的情况下，未观察到任何不良临床症状（体况、呼吸频率、毛发状况、姿势或行为的变化）。与 CDK4/6 抑制剂联合使用时，未观察到除单独使用 CDK4/6 抑制剂之外的额外毒性 [1]。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
INX-315 是一种新型、高效且选择性的 CDK2 抑制剂，由 CDK4/6 抑制剂 trilaciclib 通过构效关系优化开发而来。它旨在靶向 CDK2 活性高的癌症，例如 CCNE1 扩增的肿瘤（如卵巢癌、胃癌）以及对 CDK4/6 抑制剂产生耐药性的乳腺癌。临床前数据显示，INX-315 可诱导细胞周期阻滞和治疗诱导的衰老，从而在异种移植和转基因模型中实现持久的肿瘤控制。它与 CDK4/6 抑制剂具有协同作用，可克服耐药性并延缓其出现。 INX-315 目前正在一项针对晚期实体瘤患者的 I 期临床试验中进行评估 (NCT05735080) [1]。CDK2 抑制剂 INX-315 是一种口服生物利用度高的小分子细胞周期蛋白依赖性激酶 2 (CDK2) 抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。口服后，CDK2 抑制剂 INX-315 可选择性地靶向、结合并抑制 CDK2 的活性。这可能导致细胞周期阻滞、诱导细胞凋亡以及抑制肿瘤细胞增殖。CDK 是一类丝氨酸/苏氨酸激酶，是细胞周期进程和细胞增殖的重要调节因子，在肿瘤细胞中经常过表达。
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| 分子式 |
C19H21N7O3S
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|---|---|
| 分子量 |
427.480141401291
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| 精确质量 |
427.142
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| 元素分析 |
C, 53.38; H, 4.95; N, 22.94; O, 11.23; S, 7.50
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| CAS号 |
2745060-92-6
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| PubChem CID |
162360412
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
2.4
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| tPSA |
152
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
759
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
S(C1C=CC(=CC=1)NC1=NC=C2C=C3NNC(C4(CCCCC4)N3C2=N1)=O)(N)(=O)=O
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| InChi Key |
KGJVKYSVVOQPDL-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H21N7O3S/c20-30(28,29)14-6-4-13(5-7-14)22-18-21-11-12-10-15-24-25-17(27)19(8-2-1-3-9-19)26(15)16(12)23-18/h4-7,10-11,24H,1-3,8-9H2,(H,25,27)(H2,20,28,29)(H,21,22,23)
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| 化学名 |
4-[(12-oxospiro[1,3,5,10,11-pentazatricyclo[7.4.0.02,7]trideca-2,4,6,8-tetraene-13,1'-cyclohexane]-4-yl)amino]benzenesulfonamide
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| 别名 |
INX-315; 2745060-92-6; INX315; 2QD8YT8RWZ; orb2565961;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~233.93 mM; with sonication)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.85 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加),澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，您可以添加 100 μL 25.0 mg/mL 透明 DMSO 储备液，并将其添加到 400 μL PEG300 中并充分混合。 然后向上述体系中加入50 μL Tween-80，混匀。 然后继续加入450 μL生理盐水至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.85 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加),澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，您可以添加 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液，并将其添加到 900 μL 20% SBE-β-CD 盐水溶液中并充分混合。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.85 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加),澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3393 mL | 11.6965 mL | 23.3929 mL | |
| 5 mM | 0.4679 mL | 2.3393 mL | 4.6786 mL | |
| 10 mM | 0.2339 mL | 1.1696 mL | 2.3393 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
M1-20
CDK12-Cyclin K Ligand-Linker Conjugates 1
CGP-74514 dihydrochloride
(S)-CDK2 degrader 6
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