| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
INX-315 is a potent and selective inhibitor of cyclin-dependent kinase 2 (CDK2). Biochemical IC₅₀ values (mean ± SEM, n ≥ 3) determined by Nanosyn assay are: CDK2/cyclin E1 0.6 ± 0.2 nmol/L, CDK2/cyclin A2 2.5 ± 0.7 nmol/L, CDK1/cyclin B1 2.5 ± 0.7 nmol/L, CDK3/cyclin E1 4 ± 1 nmol/L, CDK5 1 ± 0.2 nmol/L, CDK5/p25 4 ± 1 nmol/L, CDK7 4640 ± 390 nmol/L, CDK9/cyclin T1 30 ± 8.3 nmol/L, CDK4/cyclin D1 1240 ± 40 nmol/L, CDK6/cyclin D3 1710 ± 480 nmol/L. It also inhibits CSF1R with an IC₅₀ of 2.29 nmol/L in follow-up assays. Intracellular target engagement IC₅₀ measured by NanoBRET: CDK2/cyclin E1 2.3 ± 0.07 nmol/L, CDK2/cyclin A1 71 ± 0.5 nmol/L, CDK1/cyclin B1 374 ± 63.5 nmol/L, CDK9/cyclin T1 2950 ± 314 nmol/L. The selectivity for CDK2 over CDK1 is approximately 50-fold in biochemical assays and 163-fold in NanoBRET assays [1].
Cyclin-dependent kinase 2 (CDK2). CDK2 is a serine/threonine kinase that regulates cell cycle progression through the G1/S transition. It forms complexes with cyclin E and cyclin A and phosphorylates key substrates including retinoblastoma protein (Rb) for cell cycle progression. CDK2 is frequently dysregulated in cancer and is a validated target for anticancer therapy. INX-315 selectively inhibits CDK2. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
INX-315 能有效抑制 CCNE1 扩增的癌细胞系（卵巢癌和胃癌细胞系，如 OVCAR3、COV318、Kuramochi、MKN1 等）的增殖，平均 IC₅₀ 为 36 nmol/L（范围 10–64 nmol/L），而对非扩增细胞系的敏感性则低得多（平均 IC₅₀ 为 1435 nmol/L）。在 CDK4/6 抑制剂耐药的乳腺癌细胞（如对阿贝西利或阿贝西利/氟维司群耐药的 MCF7 和 T47D）中，INX-315 显示出更高的敏感性（IC₅₀ 值显著低于亲代细胞）。相比之下，正常成纤维细胞系 Hs68 对 INX-315 不敏感 (IC₅₀ > 1 μmol/L) [1]。
OVCAR3 和 MKN1 细胞的细胞周期分析显示，用 30–100 nmol/L INX-315 处理 24 小时后，细胞周期出现显著的 G₁ 期阻滞；在更高浓度 (≥300 nmol/L) 下，出现 G₁/G₂ 期联合阻滞。 G₁期阻滞伴随着视网膜母细胞瘤蛋白（Rb）在Ser807/811和Thr821位点的磷酸化水平降低、CDK2底物（如CDC6和核仁素）水平下降以及E2F靶标细胞周期蛋白A2的下调，如Western blot所示[1]。 INX-315可诱导CCNE1扩增细胞发生治疗诱导衰老（TIS）。经7天处理（100–1000 nmol/L）后，OVCAR3和MKN1细胞表现出衰老相关β-半乳糖苷酶活性增强、细胞核增大以及衰老基因特征表达上调（RNA-seq）。在 CDK4/6 抑制剂耐药的乳腺癌细胞中，添加 INX-315 可恢复与 CDK4/6 抑制剂在亲代细胞中诱导的衰老表型相似的表型，包括染色质重塑和 AP-1 靶基因的激活 [1]。 在耐药细胞中，INX-315 与 CDK4/6 抑制剂（阿贝西利、帕博西利、瑞博西利）联合使用，与单药治疗相比，可产生协同生长抑制作用，并更深层次地抑制 E2F 靶基因 [1]。 长期克隆形成实验表明，CDK4/6 抑制剂联合 INX-315 可在 10 周内阻止 CDK4/6 抑制剂耐药性的出现，而单独使用 CDK4/6 抑制剂则会导致耐药性增殖 [1]。 INX-315 选择性地靶向、结合并抑制…… CDK2活性抑制剂可诱导细胞周期停滞于G1期，并降低CDK2底物的磷酸化水平。它还能抑制E2F靶基因的表达。现有文献中未提供详细的IC50值。该抑制剂在CCNE1扩增的癌症和CDK4/6抑制剂耐药的管腔型乳腺癌模型中均具有抗癌活性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在CCNE1扩增的肿瘤模型中，口服INX-315可诱导剂量依赖性的肿瘤生长抑制。在胃腺癌PDX GA0103（CCNE1拷贝数约为10）中，每日两次（BID）给予25、50或100 mg/kg的INX-315，持续56天，可显著抑制肿瘤生长，其中100 mg/kg BID可导致肿瘤消退。在另一个胃癌PDX GA0114（CCNE1拷贝数约为3）中，每日两次（BID）给予100 mg/kg，持续5周可抑制肿瘤生长（P < 0.0001）。在卵巢癌PDX OV5398（CCNE1拷贝数约为9）中，每日两次（BID）给予100 mg/kg，持续8周可抑制肿瘤生长（P < 0.0001）。在OVCAR3 CDX中，每日两次（BID）给予100 mg/kg，同样可抑制肿瘤生长。未观察到明显的体重减轻（>5%）或毒性反应[1]。
在转基因MMTV-rtTA/tetO-HER2乳腺癌模型中，对阿贝西利产生耐药性的小鼠分别接受赋形剂、继续使用阿贝西利、INX-315（50 mg/kg，每日两次）或联合治疗。联合治疗在5周内显著减缓了肿瘤生长，而单药治疗效果有限。肿瘤分析显示，联合用药可更深层次地抑制E2F靶基因的表达，并恢复衰老标志物的表达[1]。 在CDK4/6抑制剂耐药的乳腺癌PDX模型（ST4316B）中，与单药治疗相比，ribociclib（50 mg/kg，每日一次）和INX-315（50 mg/kg，每日两次）联合用药可显著抑制肿瘤生长，且耐受性良好[1]。 在OVCAR3和OV5398肿瘤模型中进行的药效学分析显示，末次给药后16小时内pRb和cyclin A2水平持续降低，证实了药物在体内的靶点结合[1]。 在异种移植小鼠模型中，INX-315以剂量依赖的方式抑制肿瘤生长。口服后，INX-315可导致细胞周期阻滞、诱导细胞凋亡并抑制肿瘤细胞增殖。它已在 CCNE1 扩增的癌症模型和 CDK4/6i 耐药的管腔型乳腺癌模型中显示出活性。 |
| 酶活实验 |
采用配备微流控检测技术的Nanosyn Caliper Assay Platform进行生化激酶活性测定。化合物在ATP的Km浓度下，以1 μmol/L的磷酸化受体底物肽浓度，进行12点剂量反应单次重复测试。星形孢菌素用作参考化合物。测定了各种CDK/细胞周期蛋白复合物的IC50值。为进行选择性分析，在LanthaScreen Eu激酶结合测定和Z'-Lyte激酶测定（Thermo Fisher Scientific）中，以100 nmol/L的浓度测试了INX-315。抑制率≥80%的激酶在10点剂量反应曲线（1 μmol/L至49.5 pmol/L）中重新测试，以确定IC₅₀值[1]。
微粒体稳定性测定：将INX-315（1 μmol/L）与人、大鼠、小鼠和犬的肝微粒体在37°C下于NADPH存在下孵育。分别于0、10、20、30和60分钟取样，并用LC-MS/MS进行分析。计算剩余百分比，并使用GraphPad软件确定半衰期和清除率[1]。 体外激酶测定使用重组CDK2/cyclin E或CDK2/cyclin A复合物与ATP底物和不同浓度的INX-315孵育。肽底物（例如组蛋白H1或Rb衍生肽）的磷酸化可通过放射性测定法、荧光法或ELISA法进行测量。IC50值由剂量反应曲线确定。 |
| 细胞实验 |
将细胞接种于96孔板（1000–5000个细胞/孔），并用系列稀释的INX-315处理6天（或某些细胞系的2个倍增时间）。使用CellTiter-Glo（Promega）试剂盒，按照制造商说明书测定细胞活力。使用酶标仪读取发光值，并计算IC₅₀值[1]。
细胞周期分析：用INX-315处理24小时的细胞用70%乙醇固定，用碘化丙啶染色，并通过流式细胞术进行分析。使用FlowJo软件处理数据[1]。 蛋白质印迹：在含有蛋白酶/磷酸酶抑制剂的RIPA裂解液或细胞裂解缓冲液中制备细胞或肿瘤裂解液。蛋白质经SDS-PAGE分离后，转移至硝酸纤维素或PVDF膜上，并用针对pRb、Rb、cyclin A2、p-CDC6、nucleolin、GAPDH等的抗体进行检测。检测采用HRP标记的二抗和化学发光法[1]。 衰老相关β-半乳糖苷酶染色：细胞经固定后，使用β-半乳糖苷酶染色试剂盒进行染色。采集图像，并量化每个细胞的积分信号。用DAPI染色细胞核，用鬼笔环肽染色细胞骨架，以评估细胞核和细胞大小[1]。 RNA-seq和ATAC-seq：使用RNeasy试剂盒提取RNA，用TruSeq Stranded mRNA构建文库，并在Illumina NextSeq 500平台上进行测序。使用Omni-ATAC方案和Illumina Tagment DNA酶对50,000个细胞核进行ATAC-seq，并在NextSeq 500平台上进行测序。使用标准流程分析数据[1]。 用不同浓度的INX-315处理癌细胞系（包括CCNE1扩增和CDK4/6i耐药模型）。使用标准检测方法（MTT、CCK-8、CellTiter-Glo）测量细胞增殖。通过流式细胞术进行细胞周期分析。通过Western blotting检测CDK2底物磷酸化（例如Rb）。细胞凋亡通过 Annexin V/PI 染色和 caspase 激活进行评估。 |
| 动物实验 |
在PDX研究中，将肿瘤碎片皮下植入免疫缺陷小鼠体内（OV5398使用NOD/SCID小鼠；GA0103和GA0114使用BALB/c裸鼠；OVCAR3和ST4316B使用无胸腺裸鼠）。当肿瘤体积达到约150–300 mm³时，将小鼠随机分组（每组n = 8–10只）。INX-315每周配制一次，溶于100% PEG400中，通过灌胃给药，剂量为25–100 mg/kg，每日两次（BID）或100 mg/kg，每日一次（QD）。Abemaciclib的制备方法如前所述，给药剂量为50–75 mg/kg；ribociclib溶于0.5%甲基纤维素中，给药剂量为50 mg/kg，每日一次（QD）。每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积，并监测小鼠体重。动物在实验终点或肿瘤负荷超过限值时被实施安乐死[1]。
对于转基因MMTV-rtTA/tetO-HER2模型，诱导肿瘤形成后，对已形成肿瘤的小鼠持续给予阿贝西利（75 mg/kg）治疗，直至获得耐药性（肿瘤复发）。随后，将耐药小鼠随机分为载体组、继续给予阿贝西利（50 mg/kg）组、INX-315（50 mg/kg，每日两次）组或联合用药组。治疗持续长达5周，并进行肿瘤监测[1]。 携带人源肿瘤异种移植瘤的小鼠异种移植模型通过灌胃给予INX-315。定期使用游标卡尺测量肿瘤体积。以剂量依赖的方式评估肿瘤生长抑制情况。在研究终点，收集肿瘤进行组织病理学分析和生物标志物评估（例如 Ki-67、磷酸化 Rb、裂解 caspase-3）。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
INX-315 在肝微粒体中表现出较高的代谢稳定性。孵育 60 分钟后，母体化合物的回收率分别为：人 94%，大鼠 100%，小鼠 100%，犬 100%（数据来自补充图 S1B；文中未提供具体数值，但表明其稳定性高）。半衰期和固有清除率已计算（数据未显示）[1]。INX-315 具有口服生物利用度。口服给药后可吸收，并在血浆中达到治疗浓度。在异种移植模型中，INX-315 也采用口服给药。详细的药代动力学参数（Cmax、Tmax、AUC、t1/2）可在临床前研究中找到，但未在搜索结果中提供。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在所有体内疗效研究中，INX-315 的耐受性良好。治疗期间，所有小鼠的体重减轻均不超过 5%。在剂量高达 100 mg/kg，每日两次，持续 8 周的情况下，未观察到任何不良临床症状（体况、呼吸频率、毛发状况、姿势或行为的变化）。与单独使用 CDK4/6 抑制剂相比，INX-315 与其他 CDK4/6 抑制剂联合使用时未观察到其他毒性[1]。
INX-315 的毒理学数据仅限于临床前研究。作为一种 CDK2 抑制剂，其潜在毒性可能包括骨髓抑制、胃肠道反应和生殖毒性。在动物模型中，该化合物在治疗剂量下耐受性良好。治疗药物的开发需要进行标准的毒理学研究。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
INX-315是一种新型、高效且选择性强的CDK2抑制剂，通过优化CDK4/6抑制剂trilaciclib的结构-活性关系而开发。它旨在靶向CDK2活性高的癌症，如CCNE1扩增的肿瘤（例如卵巢癌、胃癌）和对CDK4/6抑制剂产生耐药的乳腺癌。前临床数据表明，INX-315可以诱导细胞周期停滞和治疗诱导的衰老，从而在异种移植和转基因模型中实现持久的肿瘤控制。它与CDK4/6抑制剂具有协同作用，可以克服耐药性并延缓其发生。INX-315目前正在对晚期实体瘤患者进行I期临床试验（NCT05735080）[1]。CDK2抑制剂INX-315是一种小分子细胞周期依赖性激酶2（CDK2）抑制剂，具有高口服生物利用度和潜在的抗肿瘤活性。口服给药后，CDK2抑制剂INX-315选择性靶向、结合并抑制CDK2活性。这可能导致细胞周期停滞、诱导凋亡和抑制肿瘤细胞增殖。CDK是一类丝氨酸/苏氨酸激酶，是细胞周期进程和细胞增殖的重要调节因子，通常在肿瘤细胞中过表达。
INX-315是一种用于癌症研究的研究级CDK2抑制剂。CAS: 2745060-92-6。它是一种口服生物利用度高的小分子CDK2抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。它在G1期诱导细胞周期停滞，抑制异种移植模型中的肿瘤生长，并在CCNE1扩增和CDK4/6i耐药癌症中具有活性。仅供研究使用。 |
| 分子式 |
C19H21N7O3S
|
|---|---|
| 分子量 |
427.480141401291
|
| 精确质量 |
427.142
|
| 元素分析 |
C, 53.38; H, 4.95; N, 22.94; O, 11.23; S, 7.50
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| CAS号 |
2745060-92-6
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| PubChem CID |
162360412
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
2.4
|
| tPSA |
152
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
30
|
| 分子复杂度/Complexity |
759
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
S(C1C=CC(=CC=1)NC1=NC=C2C=C3NNC(C4(CCCCC4)N3C2=N1)=O)(N)(=O)=O
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| InChi Key |
KGJVKYSVVOQPDL-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H21N7O3S/c20-30(28,29)14-6-4-13(5-7-14)22-18-21-11-12-10-15-24-25-17(27)19(8-2-1-3-9-19)26(15)16(12)23-18/h4-7,10-11,24H,1-3,8-9H2,(H,25,27)(H2,20,28,29)(H,21,22,23)
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| 化学名 |
4-[(12-oxospiro[1,3,5,10,11-pentazatricyclo[7.4.0.02,7]trideca-2,4,6,8-tetraene-13,1'-cyclohexane]-4-yl)amino]benzenesulfonamide
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| 别名 |
INX-315; 2745060-92-6; INX315; 2QD8YT8RWZ; orb2565961;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~233.93 mM; with sonication)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.85 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加),澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，您可以添加 100 μL 25.0 mg/mL 透明 DMSO 储备液，并将其添加到 400 μL PEG300 中并充分混合。 然后向上述体系中加入50 μL Tween-80，混匀。 然后继续加入450 μL生理盐水至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.85 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加),澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，您可以添加 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液，并将其添加到 900 μL 20% SBE-β-CD 盐水溶液中并充分混合。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.85 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加),澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3393 mL | 11.6965 mL | 23.3929 mL | |
| 5 mM | 0.4679 mL | 2.3393 mL | 4.6786 mL | |
| 10 mM | 0.2339 mL | 1.1696 mL | 2.3393 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Link: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT05735080
Conditions:Breast Cancer|Breast Cancer Metastatic|Hormone Receptor Positive Tumor|Human Epidermal Growth Factor 2 Negative Carcinoma of Breast|Ovarian Cancer|CCNE1 Amplification|Solid Tumor|Advanced Cancer|Metastatic CancerInvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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